
CMT93細胞(小鼠直腸多倍體(ti) 癌細胞係)
- 來源:直腸
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:CMT93細胞多倍體(ti) 癌細胞,含有多於(yu) 正常二倍體(ti) 的染色體(ti) 數量
CMT-93是源自小鼠直腸組織的多倍體(ti) 癌細胞係,上皮細胞形態,常用於(yu) 結腸癌和直腸癌的研究。CMT93細胞係從(cong) 一隻19個(ge) 月大的雄性C57BL/1CRF小鼠分離出來,該小鼠在18個(ge) 月內(nei) 每周接受一次N-甲基-N-亞(ya) 硝基脲(MAMA)的腹膜內(nei) 注射,最終誘發多倍體(ti) 癌。
CMT93細胞特性特征
抗原表達:表達H-2b抗原
致瘤性:CMT93細胞在裸小鼠中具有高度致瘤性、皮下接種10^7個(ge) 細胞後,21天內(nei) 以100%的頻率(5/5)形成腫瘤
生長特性:培養(yang) 1個(ge) 月後,CMT93細胞形成腺泡和連接複合體(ti) 、在裸鼠中可產(chan) 生大腫瘤(6×10^6個(ge) 細胞接種物)
分子特征:鼠痘病毒呈陰性
CMT93細胞參數表
細胞名稱 | CMT93細胞(小鼠直腸多倍體癌細胞係) |
別名 | CMT-93;小鼠直腸多倍體癌細胞;CMT 93; C57 Mouse Tumor 93 |
物種信息 | 雄性19個月小鼠(Mus musculus);C57BL/1CRF; |
分離部位 | 直腸 |
細胞類型 | 癌細胞,多倍體 |
形態 | 上皮細胞樣,貼壁生長 |
ATCC編號 | CCL-223 |
誘發方法 | 每周接受MAMA(N-甲基-N-亞硝基脲)的腹膜內注射,持續18個月 |
建立過程 | 經過四次體內傳代和外植體培養獲得 |
致瘤性 | 在裸小鼠中皮下接種10^7個細胞,21天內100%形成腫瘤(5/5) |
抗原表達 | H-2b |
病毒檢測 | 鼠痘病毒陰性 |
細胞周期 | 周期約24小時;倍增時間約18-24小時 |
培養基 | DMEM高糖培養基;10%胎牛血清,1%雙抗 |
培養條件 | 37℃,5% CO2;普通細胞培養處理的塑料表麵 |
傳代方法 | 胰蛋白酶-EDTA消化 |
傳代比例 | 1:2至1:6 |
傳代頻率 | 每3-4天,或當細胞密度達到70-80% |
凍存介質 | 90%完全培養基 + 10% DMSO |
凍存密度 | ≥1 x 10^6 cells/mL |
儲存溫度 | 液氮氣相(-150℃以下) |
細胞活力 | ≥95%(台盼藍排除法) |
無菌檢測 | 細菌、真菌、支原體均陰性 |
種屬鑒定 | PCR方法確認為小鼠來源 |
主要用途 | 結直腸癌研究、藥物篩選、腫瘤生物學研究 |
特殊應用 | 多倍體癌細胞研究、腫瘤微環境研究 |
生物安全等級 | BSL-1 |
培養教程
CMT93小鼠直腸多倍體癌細胞係培養教程
CMT-93細胞複蘇
將凍存管在37°C水浴中快速解凍,約1-2分鍾。
將解凍後的CMT-93細胞懸液轉移至含有4mL預熱培養(yang) 基的離心管中。
以1000rpm離心4分鍾。
棄去上清,用1-2mL新鮮培養(yang) 基重懸CMT-93細胞。
將重懸的CMT-93細胞轉移到T25培養(yang) 瓶中,補充至總量6-8mL培養(yang) 基。
將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
次日更換新鮮培養(yang) 基,去除死CMT-93細胞。
CMT-93細胞傳代
當CMT-93細胞密度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。
棄去舊培養(yang) 基,用PBS輕柔洗滌CMT-93細胞1-2次。
加入適量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C消化2-3分鍾。
顯微鏡下觀察CMT-93細胞脫落情況。
加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基終止消化。
以1000rpm離心4分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸CMT-93細胞。
按1:2至1:6的比例將CMT-93細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。
每3-4天傳(chuan) 代一次。
CMT-93細胞凍存
製備凍存液:90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO。
收集對數生長期的CMT-93細胞。
調整CMT-93細胞密度至≥1 x 10^6 cells/mL。
將CMT-93細胞懸浮在凍存液中。
分裝至凍存管中,每管1mL。
使用程序降溫盒在-80°C冰箱中緩慢降溫。
24小時後轉移到液氮中長期保存。
注意事項
定期觀察CMT-93細胞形態和生長狀態,確保CMT-93細胞健康。
保持無菌操作,防止汙染。
避免CMT-93細胞過度生長或密度過低,以確保實驗數據的可靠性。
定期進行CMT-93細胞特性鑒定,如短串聯重複序列 (STR) 分析,確保CMT-93細胞係的穩定性和準確性。
相關資料
STR鑒定及相關
Mouse STR 1-1 | 15 |
Mouse STR 1-2 | 19,20 |
Mouse STR 2-1 | 16 |
Mouse STR 3-2 | 14 |
Mouse STR 4-2 | 20.3 |
Mouse STR 5-5 | 14,16,17 |
Mouse STR 6-4 | 18,19 |
Mouse STR 6-7 | 15 |
Mouse STR 7-1 | 26.2 |
Mouse STR 8-1 | 16 |
Mouse STR 11-2 | 16 |
Mouse STR 12-1 | 17 |
Mouse STR 13-1 | 17 |
Mouse STR 15-3 | 22.3 |
Mouse STR 17-2 | 15,16 |
Mouse STR 18-3 | 16 |
Mouse STR 19-2 | 14 |
Mouse STR X-1 | 27 |