S-180腫瘤細胞（小鼠腹水瘤細胞）

S-180腫瘤細胞來源於(yu) 昆明小鼠的腹水瘤，創建於(yu) 1959年。S180腫瘤細胞保留了肉瘤的腫瘤特性，廣泛用於(yu) 腫瘤發生機製的研究等。在體(ti) 外培養(yang) 時，S-180細胞通常表現為(wei) 圓形，並具有半貼壁半懸浮的生長特性。

通常，S-180細胞通過昆明小鼠腹水進行傳(chuan) 代。在實驗中，將1.0x10^6個(ge) S-180細胞注射入小鼠腹腔，經過10天後，在無菌條件下抽取腹水，隨後用PBS稀釋並計數，最後用於(yu) 腹腔內(nei) 的再接種以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。S180腫瘤細胞係經過鼠痘病毒檢測確認為(wei) 陰性，可以用於(yu) 3D細胞培養(yang) 實驗。

S-180腫瘤細胞－小鼠腹水瘤細胞參數表

S-180小鼠腹水瘤細胞培養教程

S180細胞複蘇

• 解凍S180細胞：將含有1mL S180細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速解凍，輕輕搖晃至完全融化。

• 混合培養(yang) 基：將S180細胞懸液加入4mL培養(yang) 基中，輕輕混勻。

• 離心處理：在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液。

• 補加培養(yang) 基：加入1-2mL培養(yang) 基，吹打混勻S180細胞。

• 培養(yang) 過夜：將S180細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，培養(yang) 過夜（或加入10cm培養(yang) 皿中，加入約8mL培養(yang) 基）。

• 換液檢查：第二天換液並檢查S180細胞密度。

S180細胞傳代

• 準備工作：當S180細胞密度達到80%-90%時，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• PBS清洗：棄去培養(yang) 上清液，用不含鈣、鎂的PBS清洗S180細胞1-2次。

• 消化S180細胞：加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 終止消化：觀察到大部分S180細胞變圓並脫落後，輕敲幾下培養(yang) 瓶，加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 離心與(yu) 補加：將S180細胞懸液轉移至離心管中，在1000RPM條件下離心4分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 基，吹打混勻。

• 分瓶培養(yang) ：按1:2的比例將S180細胞懸液分至新的含8mL培養(yang) 基的培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中。

S180細胞凍存

• S180細胞狀態檢查：當S180細胞生長良好時，可以進行凍存。

• 棄去培養(yang) 基：棄去培養(yang) 基，用PBS清洗S180細胞。

• 消化與(yu) 收集：使用消化液收集S180細胞，離心後棄去上清液。

• 準備凍存液：配製55%基礎培養(yang) 基、40%胎牛血清（FBS）和5%DMSO的凍存液。

• 凍存：將S180細胞懸液分裝至凍存管中，置於(yu) 液氮中保存。

培養條件和注意事項

• 培養(yang) 基：通常使用RPMI-1640或DMEM培養(yang) 基，添加10%的胎牛血清（FBS）和1%的青黴素/鏈黴素（P/S）。

• 培養(yang) 環境：確保培養(yang) 環境為(wei) 95%空氣和5% CO2，溫度為(wei) 37℃。

• S180細胞密度：傳(chuan) 代時確保S180細胞密度在80%-90%。

• 汙染檢查：收到S180細胞後，檢查是否漏液或汙染，必要時聯係供應商。

• 傳(chuan) 代頻率：建議每周傳(chuan) 代2次，比例為(wei) 1:2至1:6。

實驗過程中的傳代

• 在實驗中，將1.0x10^6個(ge) S180細胞注射入昆明小鼠的腹腔內(nei) ，10天後，在無菌條件下抽取腹水，用PBS稀釋後計數，再次用於(yu) 腹腔內(nei) 的接種以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• S180細胞係經過鼠痘病毒檢測確認陰性，可以用於(yu) 3D細胞培養(yang) 實驗。

• S180細胞在體(ti) 外培養(yang) 時，表現為(wei) 半貼壁半懸浮生長特性，具有顯著的腫瘤原性