SNU16細胞（人胃癌細胞）

SNU-16細胞係是由韓國首爾國立大學醫學院的J. Park於(yu) 1987年建立的。SNU16細胞來自一名33歲未接受化療的亞(ya) 裔女性患者的低分化胃癌腹水樣本。由於(yu) 是在患者化療前采集的，能夠較好地反映原發腫瘤的特性，在胃癌研究，特別是生物學特性和藥物篩選方麵具有重要應用價(jia) 值。SNU16細胞形態為(wei) 上皮細胞，呈圓形，主要以懸浮聚集體(ti) 的形式生長。

SNU16細胞係呈現雙峰染色體(ti) 數目分布，主要為(wei) 低四倍體(ti) 。此外，9條標記染色體(ti) 在所有細胞中均有發現，部分細胞中還存在額外的標記染色體(ti) 和DM拷貝。

SNU16細胞特性特征

• SNU16細胞對血管活性腸肽（VIP）受體(ti) 呈陽性,但缺乏胃泌素受體(ti)

• 基因表達：myc+；erb B2+；Rh+；癌胚抗原；標簽72；A型血
  

• c-myc原癌基因被擴增,但表達的c-erb-B-2 RNA與(yu) 其他細胞係相當。而N-myc、L-myc、myb和EGF受體(ti) 基因中沒有發現擴增或重排的證據

• SNU16細胞表達表麵糖蛋白癌胚抗原（CEA）和TAG-72

• SNU16細胞是左旋多巴脫羧酶（DDC）陽性

• SNU16細胞有致瘤性,在半固體(ti) 培養(yang) 基中的集落形成效率為(wei) 10%

• 基因未表達：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌素釋放肽。

SNU16人胃癌細胞參數表

SNU16人胃癌細胞培養教程

SNU16細胞的複蘇

• 完全培養(yang) 基的製備：使用RPMI-1640培養(yang) 基，添加10%胎牛血清和1%雙抗（青黴素-鏈黴素），混合均勻，確保SNU16細胞的適宜生長環境。

• 預熱培養(yang) 基：將5 mL完全培養(yang) 基置於(yu) 15 mL離心管中，並在37°C水浴鍋中預熱，準備SNU16細胞的複蘇。

• 快速解凍SNU16細胞：從(cong) 液氮或-80°C冰箱中取出凍存的SNU16細胞，立即將其置於(yu) 37°C水浴鍋中，輕輕搖晃使細胞快速解凍，過程應在1分鍾內(nei) 完成。

• 離心：將解凍後的SNU16細胞移入超淨工作台，在預熱的培養(yang) 基中混合後，置於(yu) 15 mL離心管中，以1000 rpm離心5分鍾。

• 去除上清：離心後，小心吸棄上清，保留SNU16細胞沉澱，並用2 mL完全培養(yang) 基輕輕重懸SNU16細胞。

• 接種SNU16細胞：將重懸後的SNU16細胞接種到T25培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。

SNU16細胞的常規傳代

• 培養(yang) 基更換：每2-3天更換一次新鮮的完全培養(yang) 基，以保證SNU16細胞生長所需的營養(yang) 。

• 傳(chuan) 代時機：當SNU16細胞融合度達到80-90%時，進行傳(chuan) 代操作。

• 吸棄培養(yang) 基，用PBS緩衝(chong) 液洗滌SNU16細胞兩(liang) 次，以去除殘留培養(yang) 基。
  

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，消化SNU16細胞5-10分鍾，觀察細胞從(cong) 瓶壁脫落的情況。

• 加入等量的完全培養(yang) 基終止消化反應，並輕輕吹打SNU16細胞，製備成單細胞懸液。

• 按1:2至1:3的比例，將SNU16細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶中，繼續培養(yang) 。

SNU16細胞的凍存

• 收集SNU16細胞：在細胞處於(yu) 對數生長期時進行收集，以1000 rpm離心5分鍾，去除上清。

• 製備凍存液：用凍存液（10%DMSO和90%胎牛血清）重懸SNU16細胞沉澱，將SNU16細胞密度調整為(wei) 1×10^6至1×10^7 cells/mL。

• 分裝和初步凍存：將SNU16細胞懸液分裝至凍存管中，置於(yu) -80°C冰箱中過夜。

• 長期保存：次日將凍存管轉移至液氮罐中，進行SNU16細胞的長期保存。

SNU16細胞培養的注意事項

• 使用新鮮配製的培養(yang) 基，不建議重複使用培養(yang) 基，以確保SNU16細胞生長環境的穩定。

• 凍存的SNU16細胞收到後應立即轉入液氮或-80°C冰箱中保存，以保證SNU16細胞的活力。

• 複蘇後的SNU16細胞培養(yang) 瓶可使用75%酒精進行表麵消毒，消毒後靜置2-3小時再進行操作。

• 在進行任何操作之前，培養(yang) 基、血清等試劑應預熱至37°C，以確保SNU16細胞不會(hui) 受到溫度變化的應激。