
HGC27胃癌細胞(人未分化胃癌細胞)
- 來源:胃,淋巴結轉移
- 細胞特征:貼壁細胞,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
- 其他:HGC-27細胞能夠分泌粘液素;P53基因呈陰性
HGC27細胞係來源於(yu) 一位未分化胃癌患者的淋巴結轉移組織,HGC27胃癌細胞係能夠分泌粘液素,體(ti) 現了胃癌的病理特征。HGC-27細胞表現出上皮樣形態,適合貼壁生長。
HGC27胃癌細胞特性特征
分泌特性: HGC27細胞能夠分泌粘液素,這一特性與(yu) 其來源於(yu) 胃癌的特征密切相關(guan) 。
致瘤性: 在裸鼠體(ti) 內(nei) ,HGC27細胞具有致瘤性。
P53狀態: HGC27細胞係的P53基因呈陰性。
HGC27胃癌細胞參數表
細胞名稱 | HGC27胃癌細胞(人未分化胃癌細胞) |
別名 | HGC-27; HGC 27 |
種屬來源 | 人 |
組織來源 | 胃,淋巴結轉移 |
疾病特征 | 胃癌,未分化 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞數量 | >1x10^6 細胞數/支 |
包裝形式 | T25培養瓶或1mL凍存管 |
培養基 | RPMI-1640+20% FBS+1% P/S |
培養環境 | 95%空氣+5% CO2;37°C |
傳代比例 | 1:3-1:6 |
傳代周期 | 48-72小時 |
檢測結果 | 細菌、真菌、支原體、HIV、乙肝、丙肝均為陰性 |
致瘤性 | 裸鼠體內具有致瘤性 |
P53表達 | 呈陰性 |
運輸方式 | 幹冰運輸或常溫運輸 |
保存條件 | 液氮存儲或-80°C冰箱保存 |
安全性 | 視為有潛在的生物危害性,需在二級生物安全台內操作 |
培養教程
HGC27人未分化胃癌細胞培養教程
細胞複蘇
複蘇24小時後,觀察HGC27細胞的貼壁情況。如果細胞貼壁良好,吸棄舊培養(yang) 基,換上新鮮的預熱完全培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。
將凍存管從(cong) 液氮中取出,迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍(約1分鍾),確保HGC27細胞不受熱損傷(shang) 。
解凍後,將HGC27細胞懸液迅速加入5-6 mL預熱的完全培養(yang) 基中,並輕輕混合。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液後,將HGC27細胞輕輕重懸於(yu) 2 mL完全培養(yang) 基中。
將HGC27細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中,並放入37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
HGC27細胞傳代
傳(chuan) 代時機: 當HGC27細胞生長至80%-90%匯合度時進行傳(chuan) 代,以保持細胞的健康狀態。
吸棄舊培養(yang) 基後,用1 mL無菌PBS清洗一次,去除殘留的培養(yang) 基和血清。
加入1 mL 0.25%胰酶,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,直到HGC27細胞皺縮變圓。
加入2 mL完全培養(yang) 基終止消化,輕輕吹打混勻HGC27細胞懸液。
以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清液後,將HGC27細胞重懸於(yu) 新培養(yang) 基中。
將HGC27細胞懸液分配至新的培養(yang) 瓶中,標記後放入37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
HGC27細胞凍存
凍存液配製: 使用90%胎牛血清和10% DMSO混合配製HGC27細胞凍存液(現用現配)。
將HGC27細胞懸液分裝至凍存管中,清楚標記。
將HGC27細胞凍存管置於(yu) -80℃冰箱中過夜,之後轉移至液氮中長期保存。
注意事項
換液周期: 每2-3天更換HGC27細胞的培養(yang) 基,以保持培養(yang) 環境的適宜狀態。
細胞狀態觀察: 定期顯微鏡檢查HGC27細胞的形態和生長情況,確保細胞健康。
操作安全性: 在二級生物安全櫃中進行操作,以避免外界汙染。
HGC27細胞死亡的判斷方法
細胞形態觀察
顯微鏡檢查: 在顯微鏡下觀察HGC27細胞形態。如果HGC27細胞皺縮、變圓、脫落,或缺乏貼壁生長,可能意味著HGC27細胞已經死亡。
貼壁情況: 正常情況下,HGC27細胞應平鋪貼壁生長。如果大部分HGC27細胞未能貼壁或漂浮在培養(yang) 基中,可能表明細胞已經死亡。
細胞計數
細胞計數法: 使用細胞計數板或自動細胞計數儀(yi) 對HGC27細胞進行計數。如果HGC27細胞數量顯著減少,且與(yu) 預期生長曲線不符,可能意味著HGC27細胞已死亡。
細胞活性檢測
台盼藍染色: 活細胞不會(hui) 被台盼藍染色,而死HGC27細胞則會(hui) 呈現藍色染色,通過這種方法可以直觀地判斷HGC27細胞的存活狀態。
MTT法: 通過MTT或其他檢測方法評估HGC27細胞的代謝活性。如果代謝活性明顯降低,可能意味著HGC27細胞已經死亡。
培養(yang) 基觀察
培養(yang) 基渾濁度: 如果培養(yang) 基變得異常渾濁,可能是由於(yu) HGC27細胞死亡或細菌汙染引起的。
pH變化: 檢查HGC27細胞培養(yang) 基的pH值變化,死亡細胞可能導致培養(yang) 基酸堿度發生異常。
其他指標
細胞凋亡標誌物: 可通過流式細胞術檢測HGC27細胞凋亡相關(guan) 標誌物,如Annexin V和PI染色,進一步確認HGC27細胞的存活狀態。
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參考文獻
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