
95C細胞【人肺巨細胞癌細胞(低轉移)】
- 來源:肺巨細胞癌;腹水轉移
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:95C細胞表現出低轉移能力。與(yu) 高轉移細胞係95D相比,95C在侵襲和遷移方麵的功能顯著降低
95C細胞源自一名65歲中國男性肺巨細胞癌患者的腹水轉移病灶,屬於(yu) 人肺巨細胞癌細胞係PLA-801的一個(ge) 亞(ya) 係。PLA-801細胞係包含了4個(ge) 通過單細胞克隆技術分離的亞(ya) 係,即95A、95C、95D、95E,其中95C細胞具有較低的轉移能力。95C細胞與(yu) 高轉移能力的95D細胞來自同一個(ge) kaiyun网站安全係,但在侵襲性和遷移性方麵明顯弱於(yu) 95D細胞。
95C細胞特性特征
95C細胞具有致瘤性,能夠在裸鼠體(ti) 內(nei) 形成腫瘤。皮下接種裸鼠後,95C細胞自發轉移的發生率較低。
95C細胞的基因表達譜與(yu) 高轉移細胞係95D相比,存在顯著差異,尤其在與(yu) 細胞遷移和侵襲相關(guan) 的基因上。研究顯示,某些與(yu) 細胞增殖、轉移和死亡相關(guan) 的基因在95C細胞中表達水平較低。
95C細胞的磷酸化蛋白質組與(yu) 高轉移細胞係95D的比較分析顯示,95C細胞中某些關(guan) 鍵蛋白的磷酸化水平較低。
95C細胞參數表
細胞名稱 | 95C細胞【人肺巨細胞癌細胞(低轉移)】 |
細胞別稱 | PLA801C; PLA-801C; PLA801-95C;95C |
細胞係編號 | CVCL_WW01 (PLA-801A), CVCL_7110 (PLA-801D), CVCL_WW02 (PLA-801E) |
來源 | 65歲中國男性肺巨細胞癌患者腹水轉移病灶 |
細胞形態 | 上皮細胞樣,貼壁細胞 |
轉移能力 | 低轉移能力 |
致瘤性 | 能在裸鼠體內形成腫瘤 |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
生物學特性 | 侵襲能力和遷移能力較弱 |
遺傳學特征 | 染色體數目異常,存在染色體缺失和重排 |
生物學標誌物 | 高表達CK,低表達E-鈣黏蛋白 |
培養基及添加物 | RPMI 1640 + 10%胎牛血清 + 1×青黴素/鏈黴素溶液 |
培養條件 | 37°C, 5% CO2 |
換液周期 | 2-3天 |
培養基體積 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4 |
傳代方法 | 胰酶消化後傳代,通常1:2至1:3 |
生長曲線 | 對數生長期4-5天,最大密度約1×10^6/ml |
倍增時間 | 約24小時 |
保存條件 | 液氮罐中保存,氣相保存 |
細胞活力 | 高活力,接種後24小時貼壁率>90% |
研究應用 | 肺癌轉移機製研究、藥物篩選、細胞生物學研究 |
凍存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO或92%完全培養基 + 8% DMSO |
凍存規格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
凍存方法 | 程序凍存或常規凍存 |
生物安全等級 | 1 |
收錄 | 中科院NCACC |
培養教程
95C人肺巨細胞癌細胞(低轉移)培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮罐中取出凍存的95C細胞管,迅速放入37°C水浴中融化,輕輕搖動直至冰塊完全融化。
將95C細胞懸液移至15 ml離心管中,緩慢加入10 ml預溫的RPMI 1640培養(yang) 基,輕輕混勻。
以300×g離心5分鍾,棄去上清,用5 ml新鮮的培養(yang) 基重懸95C細胞。
將95C細胞懸液接種於(yu) T25培養(yang) 瓶中,添加10-12 ml培養(yang) 基。
置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 。24小時後更換培養(yang) 基以去除非貼壁的95C細胞。
細胞培養
在培養(yang) 95C細胞的過程中,每2-3天更換一次培養(yang) 基,保持95C細胞在適宜的生長環境中。當95C細胞生長至80-90%匯合時,進行傳(chuan) 代操作。
傳代方法
棄去舊的培養(yang) 基,用PBS輕輕洗滌95C細胞一次。
加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C下消化3-5分鍾,觀察95C細胞的脫落情況。
當95C細胞大部分脫落時,加入等量培養(yang) 基終止消化作用。
將95C細胞懸液轉移至15 ml離心管中,300×g離心5分鍾。
棄去上清,用新鮮預溫的培養(yang) 基重懸95C細胞。
計數後,根據需要按1:2至1:4的比例將95C細胞接種至新的培養(yang) 瓶中,添加適量培養(yang) 基。
注意事項
在傳(chuan) 代95C細胞的過程中,消化時間需嚴(yan) 格控製,以避免過度消化導致95C細胞損傷(shang) 。
95C細胞接種後的24小時內(nei) 避免換液,以確保95C細胞順利貼壁。
傳(chuan) 代時應盡量避免培養(yang) 基中產(chan) 生氣泡,因為(wei) 氣泡可能會(hui) 影響95C細胞的正常生長。
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