CHL細胞（中國倉(cang) 鼠肺成纖維細胞）

中國倉(cang) 鼠肺細胞（CHL）是一種由一日齡雌性中國倉(cang) 鼠（Cricetulus griseus）肺組織衍生的成纖維樣貼壁細胞係，最早由Koyama等人在1970年建立，經過自發性永生化處理後形成了穩定的增殖能力。CHL細胞呈成纖維細胞樣形態，具有良好的貼壁生長特性，適應性較強。CHL細胞係因其對化學物質的高度敏感性，被廣泛應用於(yu) 染色體(ti) 畸變檢測、基因表達研究、藥物篩選和毒理學評估等生物醫學研究領域，是細胞毒性和遺傳(chuan) 毒性研究中的重要工具。

CHL細胞特性特征

• 關(guan) 鍵基因: CHL細胞表達多種基因，包括人組織型纖溶酶原激活劑（t-PA），這使其在研究纖溶過程和相關(guan) 疾病時具有重要價(jia) 值。
  

• 生物標誌物: CHL細胞在化學誘導染色體(ti) 畸變實驗中表現出對多種化學物質的敏感性，是檢測染色體(ti) 異常的重要模型
  

CHL細胞參數表

中國倉鼠肺成纖維細胞CHL培養教程

複蘇步驟

• 預熱培養(yang) 基：在37℃水浴中預熱5 ml完全培養(yang) 基，以利於(yu) CHL細胞的複蘇。

• 解凍細胞：從(cong) 液氮罐中取出凍存的CHL細胞管，立即置於(yu) 37℃水浴中，輕輕搖動，快速解凍（約1分鍾）。

• 離心清洗：將解凍後的CHL細胞懸液轉入15 ml離心管，加入預熱的完全培養(yang) 基混勻，1000 rpm離心5分鍾。

• 重懸細胞：棄去上清液，加入2 ml完全培養(yang) 基輕輕重懸CHL細胞。

• 接種培養(yang) ：將重懸後的CHL細胞轉移至T25培養(yang) 瓶，補足至10 ml完全培養(yang) 基，置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

• 貼壁觀察：複蘇24小時後，觀察CHL細胞貼壁情況，若發現未貼壁細胞，可棄去培養(yang) 基並更換新鮮培養(yang) 基。

CHL細胞傳代

• 生長狀態檢查：當CHL細胞達到80%-90%匯合度時即可進行傳(chuan) 代操作。

• PBS洗滌：吸棄舊培養(yang) 基，加入1 ml無菌PBS輕輕衝(chong) 洗CHL細胞一次，以去除殘餘(yu) 的培養(yang) 基和血清。

• 胰酶消化：加入1 ml胰酶確保均勻覆蓋，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化2-3分鍾，觀察CHL細胞皺縮但尚未完全脫落。

• 終止消化：加入2-3 ml完全培養(yang) 基中和胰酶，用手輕拍培養(yang) 瓶底部，幫助CHL細胞脫落。

• 離心收集：將CHL細胞懸液轉入15 ml離心管，1000 rpm離心5分鍾，吸棄上清。

• 重懸和分瓶：用完全培養(yang) 基重懸CHL細胞，按1:2或1:4的比例接種至新的T25培養(yang) 瓶或其他規格的培養(yang) 瓶中。

CHL細胞凍存

• 收集細胞：按傳(chuan) 代步驟獲得CHL細胞沉澱，並計數細胞濃度（約200-300萬(wan) /ml）。

• 重懸細胞：用預冷凍存液輕輕重懸CHL細胞，將細胞懸液轉入標記好的凍存管中。

• 程序凍存：將凍存管置於(yu) 程序凍存盒中，在-80℃冰箱中過夜，再轉入液氮保存。若無程序凍存盒，可將CHL細胞凍存管置於(yu) 泡沫盒中，在4℃靜置5-10分鍾後轉入-80℃冰箱。

注意事項

• 消化和傳(chuan) 代過程中避免氣泡產(chan) 生，以防對CHL細胞造成損傷(shang) 。

• 胰酶消化時間需精確控製，過長或過短可能影響CHL細胞狀態。

• 定期檢查CHL細胞生長狀態，及時更換培養(yang) 基和傳(chuan) 代，以維持細胞的健康生長。