KMB17細胞（人胚肺二倍體(ti) 細胞） （暫不提供）

KMB-17人胚肺二倍體(ti) 細胞係是由中國醫學科學院昆明醫學生物學研究所在1975年建立的，來源於(yu) 一名4周齡女性胚胎的正常肺組織。KMB17細胞具有二倍體(ti) 細胞特性，呈現典型的成纖維細胞樣形態，並以貼壁方式生長，能夠在常規培養(yang) 條件下穩定擴增，且可傳(chuan) 代至25代以上，保持較強的增殖能力。KMB-17細胞係在生物醫學領域，特別是肺損傷(shang) 、分化以及病毒學研究中具有重要應用，常被用作轉染實驗的宿主細胞。需要注意的是，盡管最初認為(wei) 該細胞係來自肺組織，但後續同工酶分析和DNA指紋技術顯示該細胞係已被HeLa細胞汙染，因此在研究中應特別留意這一汙染風險，以確保實驗結果的可靠性。

KMB17細胞特性特征

• 細胞類型：二倍體(ti) 細胞，形態上呈現成纖維細胞樣，適合貼壁生長。

• 生長特性：細胞以貼壁方式生長，呈短梭形，具有良好的增殖能力。

• 基因組特征：KMB-17細胞為(wei) 二倍體(ti) ，其基因組中含有兩(liang) 個(ge) 完整的染色體(ti) 組，適合用於(yu) 遺傳(chuan) 學和分子生物學研究。
  

• 同工酶分析：KMB17細胞係的同工酶分析顯示其具有人類特征，包括多種酶類的表達，如AST、MD等。

KMB17細胞參數表

KMB17人胚肺二倍體細胞培養教程

KMB17細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出冷凍的KMB17細胞，立即放入37℃的水浴中快速解凍，輕輕搖動凍存管以均勻加熱解凍。確保已準備好完全培養(yang) 基，如MEM培養(yang) 基，並添加10%胎牛血清（FBS）以維持KMB17細胞的正常生長。

• 細胞完全解凍後，迅速將KMB17細胞懸液（約1 mL）加入4 mL預溫至37℃的完全培養(yang) 基中，輕輕混勻以確保KMB17細胞的均勻分布。

• 將KMB17細胞懸液在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液，然後加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打以重新懸浮細胞。

• 將複蘇後的KMB17細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，加入8 mL培養(yang) 基。將培養(yang) 皿放置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中，過夜後更換新鮮培養(yang) 基，觀察KMB17細胞的貼壁情況及生長狀態。

KMB17細胞傳代

• 當KMB17細胞生長至80%-90%匯合時，需進行傳(chuan) 代，以保持細胞活力。細胞密度過高可能影響KMB17細胞的增殖能力，因此建議及時傳(chuan) 代。

• 棄去培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基，用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕清洗KMB17細胞一次，去除殘留培養(yang) 基。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化KMB17細胞，通常2-3分鍾即可。細胞開始脫落時，立即加入完全培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打以形成均勻的KMB17細胞懸液。

• 將消化後的KMB17細胞懸液轉移至無菌離心管，在1000 RPM下離心5分鍾，棄去上清液。重新懸浮KMB17細胞於(yu) 新鮮的完全培養(yang) 基中，按1:3或1:4的比例接種到新的培養(yang) 瓶中，並加入足量培養(yang) 基。

• KMB17細胞適合在37℃、5% CO₂條件下生長，濕度控製在70%-80%為(wei) 最佳。

KMB17細胞凍存

• 使用90%的完全培養(yang) 基和10%的二甲基亞(ya) 碸（DMSO）作為(wei) KMB17細胞凍存液。

• 將KMB17細胞懸液分裝至凍存管中，緩慢降溫至-80℃，並於(yu) 24小時後轉移至液氮中進行長期保存。