HFL1細胞（人胚肺成纖維細胞）

HFL1人胚肺成纖維細胞是一種從(cong) 健康白人胎兒(er) 肺組織中分離的細胞係，是一種有限傳(chuan) 代的細胞係，來源於(yu) 16周大的男胎兒(er) 肺組織。

HFL1細胞係具備正常的核型，通常在傳(chuan) 代10次以內(nei) 具有良好的生長性，並且在適宜條件下能夠穩定傳(chuan) 代至46代。HFL1細胞以貼壁生長為(wei) 主，主要用於(yu) 各類科研研究，尤其在毒理學領域應用廣泛。文獻中報道了HFL1細胞存在一定的細胞遺傳(chuan) 不穩定性。

HFL1細胞特性特征

• 核型：HFL1細胞具有正常的二倍體(ti) 核型。

• 同工酶：HFL1細胞表達同工酶G6PD，B型。

• 基因表達：HFL1細胞係在研究中常用於(yu) 分析與(yu) 肺部疾病、細胞增殖和分化相關(guan) 的基因表達

HFL1細胞參數表

HFL1人胚肺成纖維細胞培養教程

HFL1細胞複蘇

• 配製HFL1細胞完全培養(yang) 基，使用F12K基礎培養(yang) 基，加入10%胎牛血清和1%抗生素（如青黴素-鏈黴素混合液）。
  

• 在37℃水浴中預熱5ml HFL1細胞的完全培養(yang) 基。

• 從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出凍存的HFL1細胞管，立即放入37℃水浴中輕輕搖晃，快速解凍（約1分鍾內(nei) 完成）。
  

• 將解凍後的HFL1細胞懸液轉移至15ml離心管中，加入預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻。
  

• 以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液，保留HFL1細胞沉澱。

• 用2ml完全培養(yang) 基輕輕重懸HFL1細胞沉澱。
  

• 將重懸的HFL1細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中，標記培養(yang) 瓶。

• 將HFL1細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中進行培養(yang) 。
  

• 24小時後，檢查HFL1細胞貼壁情況。如未貼壁HFL1細胞較多，應棄去舊培養(yang) 基，換上新鮮預熱的完全培養(yang) 基。

HFL1細胞傳代

• 當HFL1細胞生長至80%-90%匯合度時，開始傳(chuan) 代操作。
  

• 吸棄培養(yang) 基，加入1ml無菌PBS潤洗HFL1細胞一次，以去除殘餘(yu) 培養(yang) 基及血清。

• 加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕搖動培養(yang) 瓶，室溫孵育2-5分鍾，觀察HFL1細胞脫落情況。
  

• 加入2-3ml完全培養(yang) 基終止胰酶反應。
  

• 將HFL1細胞懸液轉移至離心管中，1000rpm離心5分鍾，去除上清液。
  

• 用適量完全培養(yang) 基重懸HFL1細胞，按1:2或1:3的比例（如1ml細胞懸液加入2-3ml培養(yang) 基）。
  

• 將重懸的HFL1細胞轉移至新的培養(yang) 瓶中，並做好標記。

• 將HFL1細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
  

HFL1細胞凍存

• 配製HFL1細胞凍存液，使用90%胎牛血清和10% DMSO，確保現用現配。
  

• 按照傳(chuan) 代步驟收集HFL1細胞，離心後棄去上清液。
  

• 用HFL1細胞凍存液重懸HFL1細胞，通常以1x10^6 HFL1細胞/ml的濃度進行凍存。
  

• 將重懸的HFL1細胞分裝至凍存管中，標記清楚。
  

• 將HFL1細胞凍存管先置於(yu) -80℃冰箱中過夜，隨後轉入液氮中長期保存。

注意事項

• HFL1細胞培養(yang) 基更換：建議每2-3天更換一次HFL1細胞培養(yang) 基，並定期觀察HFL1細胞狀態。

• HFL1細胞觀察：應使用顯微鏡定期檢查HFL1細胞形態和生長情況。

• 無菌操作：在整個(ge) HFL1細胞培養(yang) 過程中保持嚴(yan) 格的無菌操作，以防止汙染。