PC14細胞係（人肺癌細胞係）

PC-14細胞係最初於(yu) 1989年在日本的理研生物資源中心建立，起源於(yu) 一位男性肺腺癌患者的腫瘤組織。由於(yu) 當時的誤識，該細胞係最初被標記為(wei) PC-14。然而，通過後續的短串聯重複序列（STR）DNA分析，發現pc14細胞係與(yu) 另一種源自人類肺腺癌的分化型細胞係PC-9相同。鑒於(yu) 此，pc14細胞的名稱隨後被更改為(wei) PC-9，以反映其真實的身份。PC-9細胞係在肺腺癌研究中具有重要意義(yi) ，並被廣泛用於(yu) 探討癌症的病理機製以及評估藥物的療效。

PC14細胞係特性特征

• 生長：pc14細胞具有較強的增殖能力，適合用於(yu) 各種實驗研究。

• 基因組：pc14細胞表現出非整倍體(ti) 和多倍體(ti) 的特征，反映出基因拷貝數的增加和細胞增殖的失控。

• 生物標誌物：pc14細胞表達與(yu) 肺癌相關(guan) 的多種生物標誌物，如EGFR等。

• 信號通路：多種信號通路（如PI3K/Akt、MAPK等）可能被激活

PC14細胞係參數表

PC14人肺癌細胞係培養教程

PC14細胞複蘇

• 將PC14細胞凍存管從(cong) 液氮中取出後，立即放入37°C水浴中，輕輕搖動以加速解凍，確保解凍過程迅速完成，以減少細胞損傷(shang) 。
  

• 解凍後，迅速將1 mL PC14細胞懸液轉移至裝有4 mL完全培養(yang) 基（RPMI 1640，含10% FBS和2 mM穀氨酰胺）的離心管中。
  

• 在1000 RPM下離心4分鍾，去除上清液，保留PC14細胞沉澱。
  

• 向PC14細胞沉澱中加入1-2 mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打以使細胞懸浮均勻，然後將懸浮液轉移至T25培養(yang) 瓶中。
  

• 將培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中，培養(yang) 過夜，以便PC14細胞貼壁生長。
  

PC14細胞傳代

• 次日檢查PC14細胞狀態，當細胞覆蓋麵積達到80%-90%時，進行傳(chuan) 代操作。
  

• 棄去培養(yang) 基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗滌PC14細胞1-2次，以去除殘留培養(yang) 基。
  

• 加入1 mL胰酶-EDTA溶液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），將培養(yang) 瓶放回培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，待PC14細胞變圓且鬆散脫落。
  

• 輕輕敲打培養(yang) 瓶的側(ce) 壁，加入少量含血清的培養(yang) 基終止消化反應。

• 補加6-8 mL培養(yang) 基，輕輕混勻後，在1000 RPM下離心4分鍾，去除上清液。

• 用1-2 mL培養(yang) 基重懸PC14細胞，按1:2的比例分配到新的培養(yang) 瓶中，並補加8 mL新鮮培養(yang) 基。

PC14細胞凍存

• 當PC14細胞生長狀態良好時，棄去培養(yang) 基，用PBS清洗細胞1-2次。
  

• 加入1 mL胰酶消化，待PC14細胞脫落後，加入1 mL含血清的培養(yang) 基終止消化。使用血球計數板計數PC14細胞數量。
  

• 在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 用血清重懸PC14細胞，並按10%的終濃度加入DMSO，確保細胞濃度不低於(yu) 1x10^6 cells/mL。
  

• 將重懸的PC14細胞懸液分裝到凍存管中，放入程序降溫盒中，置於(yu) -80°C冰箱中預凍2小時後轉移至液氮中長期保存。
  

注意事項

• 汙染檢測：定期檢測PC14細胞是否有支原體(ti) 或其他汙染。

• 傳(chuan) 代頻率：保持固定的傳(chuan) 代頻率和PC14細胞密度，避免傳(chuan) 代過遲或過早。

• 操作衛生：培養(yang) 和傳(chuan) 代PC14細胞過程中應注意無菌操作，避免交叉汙染。