DMS114細胞（人小細胞肺癌細胞）

DMS114細胞係是一種人源小細胞肺癌（SCLC）細胞係，最初從(cong) 一名68歲未接受過治療的白人男性患者的縱隔活檢樣本中分離。DMS114細胞係是由美國國家癌症研究所（NCI）的模式識別與(yu) 分類係統實驗室（PMCL）建立，具有高度增殖能力和快速生長的特點，是進行小細胞肺癌研究的重要實驗材料。廣泛應用於(yu) 小細胞肺癌的藥物篩選和生物學研究中，特別是臨(lin) 床前藥物開發和療效評估研究。

DMS114細胞係早期傳(chuan) 代過程中曾受到牛支原體(ti) （Acholeplasma laidlawii）的汙染，後來通過抗血清和卡那黴素治療得以清除。在冷凍保存前，已確認支原體(ti) 汙染得到有效控製。

DMS114細胞特性特征

分子表達特征

• 表達EGF（表皮生長因子）和CR3補體(ti)

• 表達Leu 7、My23和CD11b等標記物

• 表達HLA I類和II類抗原

• 基因表達：促腎上腺皮質激素；農(nong) 民；胰高血糖素；17-β-雌二醇；催產(chan) 素-神經生理學
  

其他特征

• 汙染：早期傳(chuan) 代時曾受到牛支原體(ti) （laidlawii Acholeplasma）汙染,後經過治療

• 致瘤性：在皮下接種10^7個(ge) 細胞的裸鼠中,腫瘤在21天內(nei) 以100%的頻率發展
  

• 藥物敏感性：表現出對多種化學治療藥物（如順鉑、依托泊苷）的敏感性

• 應用：廣泛應用於(yu) 小細胞肺癌的藥物篩選和生物學特性研究

DMS114細胞參數表

DMS114人小細胞肺癌細胞培養教程

DMS114細胞複蘇

• 在無菌條件下準備一個(ge) 新的100mm培養(yang) 皿，加入12mL預熱至37℃的培養(yang) 基。推薦使用DMEM/F-12或RPMI-1640培養(yang) 基，並添加10%胎牛血清（FBS），以促進DMS114細胞的複蘇。
  

• 確保所有操作均在無菌環境下進行，佩戴無菌手套和適當的防護裝備，以防止DMS114細胞在複蘇過程中受到汙染。

• 從(cong) 液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存的DMS114細胞凍存管。
  

• 將凍存管迅速放入37℃的水浴中，輕輕搖動凍存管，使其均勻解凍。整個(ge) 過程應在1-2分鍾內(nei) 完成，以確保DMS114細胞的活性不受溫度波動的影響。

• DMS114細胞完全解凍後，立即將細胞懸液轉移到準備好的培養(yang) 皿中。為(wei) 確保DMS114細胞均勻分布，可以輕輕順時針旋轉培養(yang) 皿。
  

• 將培養(yang) 皿放入37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中，靜置過夜。次日更換培養(yang) 液，以去除解凍過程中可能產(chan) 生的DMS114細胞碎片和DMSO。
  

• 觀察DMS114細胞的生長情況，通常在2-4天內(nei) ，DMS114細胞會(hui) 達到80-90%的匯合度。

DMS114細胞傳代

• 待DMS114細胞達到適當的匯合度（通常為(wei) 80-90%）時，首先吸除舊的培養(yang) 基，並用無鈣鎂磷酸鹽緩衝(chong) 液（PBS）洗滌DMS114細胞兩(liang) 次，以去除殘留的血清和其他培養(yang) 基成分。
  

• 向培養(yang) 皿中加入2mL 0.25%胰酶-0.02% EDTA溶液，輕輕晃動培養(yang) 皿，使溶液均勻覆蓋DMS114細胞。
  

• 在顯微鏡下觀察DMS114細胞，待DMS114細胞開始輕微脫落時，迅速吸除大部分胰酶，僅(jin) 保留約0.5mL繼續消化。將培養(yang) 皿放回培養(yang) 箱中約1分鍾，確保DMS114細胞完全脫落。

• 向培養(yang) 皿中加入6mL預熱的培養(yang) 基，輕輕吹打使DMS114細胞均勻懸浮。將DMS114細胞懸液轉移至15mL離心管中，並以1000rpm離心5分鍾。
  

• 離心後棄去上清液，加入適量新鮮培養(yang) 基重懸DMS114細胞。按照1:2或1:3的比例將DMS114細胞接種到新的培養(yang) 皿中，並放入培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
  

DMS114細胞凍存

• 製備凍存液，使用90%的胎牛血清（FBS）與(yu) 10%的二甲基亞(ya) 碸（DMSO）混合。確保凍存液充分混合均勻，以便DMS114細胞能夠在凍存過程中保持活性。
  

• 在DMS114細胞達到適宜的匯合度並完成傳(chuan) 代操作後，收集DMS114細胞懸液。離心後去除上清，使用3mL凍存液重懸DMS114細胞。
  

• 將重懸後的DMS114細胞分裝到多個(ge) 凍存管中，每管約1mL。確保凍存管標記清晰，包括“DMS114細胞”名稱、傳(chuan) 代次數和凍存日期。
  

• 將凍存管放入程序降溫盒中，以-1℃/分鍾的速度逐步降溫至-80℃。此後，將DMS114細胞凍存管轉移至液氮罐中長期保存。
  

注意事項

• 操作過程中應嚴(yan) 格遵循無菌技術，避免DMS114細胞汙染。

• 複蘇DMS114細胞時，應避免凍存管在解凍過程中暴露於(yu) 較大溫差環境中，以防凍存管破裂。

• DMS114細胞培養(yang) 期間，定期觀察細胞形態和生長狀態，必要時及時更換培養(yang) 液。