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細胞凍存培養(yang) 基

細胞凍存培養(yang) 基

5% 至 10% 的甘油和 DMSO 是最常見的凍存保護劑。雖然 DMSO 對細胞有毒性，但它比甘油滲透細胞的速度快得多，並且產(chan) 生更可重複的結果。不過DMSO 會(hui) 導致某些細胞分化（例如 HL-60 細胞），並且對某些細胞（例如 HBE4-E6/E7 肺上皮細胞）可能毒性過大。在這些情況下應使用甘油。甘油可以通過高壓滅菌進行滅菌，而 DMSO 必須通過過濾進行滅菌。處理任何 DMSO 溶液時都應小心，因為(wei) 它會(hui) 迅速滲透完整的皮膚，並可能攜帶有毒汙染物。

僅(jin) 使用試劑級（或更高級，如細胞培養(yang) 級）DMSO 或甘油。將二者分裝並避光保存。 开云在线登录提供的DMSO已經過全麵測試，可用於(yu) 細胞培養(yang) 。

對於(yu) 在無血清培養(yang) 基中生長的細胞，在細胞凍存和恢複培養(yang) 基中添加 50% 條件培養(yang) 基（細胞在其中生長 24 小時的無血清培養(yang) 基）可提高恢複和存活率。在無血清凍存培養(yang) 基中添加 10% 至 20% 細胞培養(yang) 級牛血清白蛋白也可提高凍存後存活率。

無血清凍存培養(yang) 基也已開發出來。开云在线登录無血清細胞凍存培養(yang) 基 既可用於(yu) 在補充血清的生長培養(yang) 基中培養(yang) 的細胞，也可用於(yu) 在無血清條件下生長的細胞。這種專(zhuan) 有配方含有 10% DMSO 和甲基纖維素，適用於(yu) 貼壁和懸浮細胞培養(yang) 物的凍存保存。使用無血清凍存培養(yang) 基凍存保存的細胞顯示出與(yu) 在 DMSO 和 FBS 中保存的細胞相當的活力和貼壁率（貼壁細胞）

使用無血清細胞凍存保存的細胞其活力水平和貼壁百分比與(yu) 在 DMSO 和 FBS 中保存的細胞相當。

凍存培養(yang) 基配方的其他變化包括高濃度（高達 90%）血清，據推測可提供一些凍存保護以及額外的生長因子；使用專(zhuan) 為(wei) 低溫條件設計的平衡鹽溶液代替專(zhuan) 為(wei) 37°C 孵育設計的培養(yang) 基；並添加凋亡抑製劑，可防止恢複後延遲發生細胞死亡。21需要根據經驗確定單個(ge) 細胞係的最佳配方。

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