
原代大鼠睾丸支持細胞
- 來源:大鼠睾丸組織
- 細胞特征:貼壁 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:kaiyun网站安全專(zhuan) 用培養(yang) 基
大鼠睾丸支持細胞來源正常的大鼠睾丸組織;大鼠睾丸支持細胞是雄性睾丸間質中的關(guan) 鍵細胞,其主要職責包括合成和分泌睾丸酮,及支持精子的發生、成熟和性功能的維持。
大鼠睾丸支持細胞形態特征獨特,呈現出圓形、橢圓形或不規則形的胞體(ti) ,核位於(yu) 中央,胞質呈嗜酸性,含有1-2個(ge) 核仁和管脊狀線粒體(ti) ,沒有分泌顆粒。
大鼠睾丸支持細胞純度高於(yu) 90%,不含有多種病原體(ti) 。
大鼠睾丸支持細胞參數表
細胞類型 | 大鼠睾丸支持細胞(kaiyun网站安全) |
細胞類型 | 睾丸支持細胞 |
組織來源 | 大鼠正常睾丸組織 |
形態特征 | 圓形、橢圓形或不規則形的胞體;胞質呈嗜酸性;無分泌顆粒 |
細胞純度 | 高於90% |
檢測項目 | 3β-HSD免疫熒光染色為陽性;GATA4免疫熒光染色為陽性 |
病原體檢測 | 不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
生長特征 | 梭形細胞;貼壁生長 |
倍增時間 | 每周 2 至 3 次 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,濕度70%-80% |
凍存條件 | 凍存液:90%FBS,DMSO 10%;或使用非程序凍存液 |
培養基配置 | 基礎培養基500ml;生長添加劑5ml;胎牛血清50ml;雙抗5ml |
運輸方式 | 凍存細胞懸液置於凍存管中,置於幹冰的泡沫保溫盒中;或T-25培養瓶充滿完全培養基後進行常溫運輸 |
產品用途 | 僅限於科學研究,不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 |
培養教程
大鼠睾丸支持細胞複蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管置於(yu) 37℃水浴中迅速搖晃解凍。
加入4mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液。
補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜。
大鼠睾丸支持細胞傳代
當細胞密度達80%-90%時進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加入1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,立即加入少量培養(yang) 基終止消化。
補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
大鼠睾丸支持細胞凍存
待細胞生長狀態良好時,進行細胞凍存。
棄去培養(yang) 基後,PBS清洗一遍後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml含血清的培養(yang) 基終止消化。
4 min 1000rpm離心去掉上清。
加入1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為(wei) 10%,細胞密度不低於(yu) 1x106/ml。
每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(ge) 小時以後轉入液氮灌存。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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- 摘要:通過簡化、優化現有的SD大鼠睾丸支持細胞分離純化方法,獲得高純度大量的支持細胞。選用15d...
- 中華男科學雜誌 > 2017年6期
- 摘要:目的:探討TGF-β1在大鼠睾丸支持細胞增殖和凋亡中的作用以及對緊密連接相關蛋白基因表達的...
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- 摘要:目的:觀察益精方對腺嘌呤法誘導的腎陽虛不育大鼠的精子密度和精子活動率、血清激素水平以及cl...
- 《中國毒理學會第七次全國毒理學大會暨第八屆湖北科技論壇論文集》 2015年
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- 《中國細胞生物學學會第八屆會員代表大會暨學術大會論文摘要集》 2003年
- 摘要:...與多巴胺能神經元的分化密切相關。本研究將體外分離的大鼠Sertoli細胞與孕13天大...
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