Vero E6細胞（非洲綠猴腎細胞VERO C1008）

VERO C1008（也稱為(wei) Vero E6）是一株從(cong) 非洲綠猴（Chlorocebus aethiops）腎髒上皮細胞中分離並衍生出的細胞係，是Vero 76細胞的克隆衍生株，而Vero 76細胞則是最早建立的VERO細胞株之一。Vero細胞係最早由日本千葉大學的Yasumura和Kawakita於(yu) 1962年分離和擴增，得名“VERO”來自世界語“Verda Reno”，意指“綠色的腎髒”，也象征著“真相”。

Vero E6細胞因低傳(chuan) 代特性及高活力，在生物醫學領域，特別是病毒學研究、疫苗生產(chan) 和藥物篩選中應用廣泛，常用於(yu) 病原體(ti) 分離與(yu) 增殖研究。

Vero E6細胞特性特征

• 生長特性：Vero E6細胞係在培養(yang) 時形成單層膜，並表現出一定程度的接觸抑製，適合用於(yu) 慢速複製病毒的培養(yang) 。

• 非整倍體(ti) ：Vero E6細胞是連續的非整倍體(ti) 細胞，這意味著其染色體(ti) 數目與(yu) 正常細胞不同，能夠在多次分裂後保持活性。
  

• 幹擾素反應：Vero E6細胞係具有幹擾素分泌缺陷，無法自主分泌幹擾素，但仍然對外源性α/β-幹擾素有正常反應，這使其在研究病毒感染機製時具有一定的優(you) 勢。

• 基因組穩定性：Vero E6細胞係在多次傳(chuan) 代後保持較高的基因組穩定性，這對於(yu) 長期實驗和藥物篩選至關(guan) 重要
  

Vero E6細胞參數表

Vero E6細胞（非洲綠猴腎細胞VERO C1008）培養教程

細胞複蘇

• 檢查收到的Vero E6細胞凍存管，確保其完好無損且無泄漏。
  

• 準備適宜的Vero E6細胞培養(yang) 基：89%高糖DMEM培養(yang) 基，加入10%胎牛血清及1%抗生素以防汙染。

• 將含1 mL Vero E6細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中迅速解凍，解凍時間約1至2分鍾。
  

• 解凍後，將細胞懸液轉入裝有4 mL預溫培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。

• 在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。

• 將Vero E6細胞沉澱重新懸浮於(yu) 1-2 mL新鮮培養(yang) 基中，輕輕吹打以均勻分布。

• 將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，加入約8 mL培養(yang) 基後置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ，以便Vero E6細胞複蘇並適應新的培養(yang) 環境。

細胞傳代

• 當Vero E6細胞生長達到80%-90%匯合時即可傳(chuan) 代，避免過度擁擠導致的生長受限。
  

• 棄去舊培養(yang) 基，用不含鈣、鎂離子的PBS緩衝(chong) 液洗滌Vero E6細胞1至2次，以去除殘留物質。
  

• 加入1 mL含0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的消化液，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 觀察Vero E6細胞狀態，待大部分細胞變圓鬆散時，即可終止消化。

• 輕輕敲打培養(yang) 瓶壁停止消化，並加入少量新鮮培養(yang) 基稀釋消化液。

• 將消化後的Vero E6細胞懸液轉移至離心管中，加入6-8 mL新鮮培養(yang) 基後，離心（1000 RPM, 4分鍾）去除上清。

• 將Vero E6細胞沉澱重新懸浮於(yu) 適量新鮮培養(yang) 基中，根據需求將細胞按1:2至1:4的比例分裝至新的培養(yang) 瓶中，每瓶加入約8 mL培養(yang) 基。

細胞凍存

• Vero E6細胞凍存液配方為(wei) 55%基礎培養(yang) 基、40%胎牛血清及5%DMSO。
  

• 當Vero E6細胞生長良好並達到80%-90%匯合度時，收集細胞以進行凍存。
  

• 按照傳(chuan) 代步驟消化和收集Vero E6細胞，並將其重新懸浮在適量的凍存液中。

• 將Vero E6細胞懸液分裝至凍存管中，每管約含1 mL細胞。

• 將凍存管置於(yu) -80℃冰箱中預冷24小時，然後轉移至液氮罐中長期保存，以確保Vero E6細胞的活力。

注意事項

• 汙染監測：每次操作前後應仔細檢查Vero E6細胞的汙染情況。如有汙染，應及時處理並報告。

• 換液頻率：建議每周換液2至3次，以維持Vero E6細胞的最佳生長環境並清除代謝廢物。