細胞培養(yang) 
細胞工程 
細胞生物學 
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品牌價(jia) 值 
貨號：STM-CL-8146 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管
LLC-MK2細胞（恒河猴腎細胞）
- 來源：腎
- 細胞特征：貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基：MEM＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：病毒敏感性: 對多種病毒敏感，包括： 牛病毒性腹瀉病毒1 人脊髓灰質炎病毒1 人柯薩奇病毒B4 也對腸道病毒、鼻病毒、粘病毒和痘病毒家族中的成員敏感
LLC-MK2（Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2）細胞係是一種上皮細胞係，源自成年恒河猴（Macaca mulatta）的腎髒組織。LLC-MK2細胞最初由RN Hull保藏，廣泛應用於(yu) 生物醫學研究中，尤其在病毒學研究中具有顯著價(jia) 值。
在培養(yang) 方麵，LLC-MK2細胞的貼壁生長依賴於(yu) 適宜的培養(yang) 基，且需選擇經質量檢測的血清作為(wei) 補充。研究表明，大量的馬血清能夠顯著促進其生長；而更換其他血清類型通常會(hui) 導致生長速率降低，並出現較長的生長滯後期。
LLC-MK2細胞特性特征
LLC-MK2細胞對多種病毒表現出易感性，包括牛病毒性腹瀉病毒1型、人脊髓灰質炎病毒1型和人柯薩奇病毒B4型。
LLC-MK2細胞還對腸道病毒、鼻病毒、痘病毒家族以及粘病毒等多種病毒具有較高的敏感性。
LLC-MK2細胞係表達纖溶酶原激活劑，這一特征使其在研究纖溶機製和相關(guan) 疾病中具有潛在應用價(jia) 值。
LLC-MK2細胞參數表
| 細胞名稱 | LLC-MK2細胞（恒河猴腎細胞） |
| 細胞別稱 | Llc-Mk2; LLC-MK-2; LLCMK2; LLcMK2; Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2 |
| ATCC編號 | CCL-7 |
| 描述 | 源自六隻成年綠猴的腎細胞懸液，對多種病毒敏感 |
| 種屬 | 恒河猴（Macaca mulatta） |
| 組織來源 | 腎髒 |
| 形態 | 上皮細胞 |
| 生長方式 | 貼壁生長 |
| 無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
| 病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性 |
| 運輸方式 | 複蘇發貨或幹冰冷凍發貨 |
| 安全性 | 所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在生物危害性，必須在二級生物安全台內操作，並請注意防護。 |
| 供應限製 | 僅供科學研究之用 |
| 培養基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 溫度 | 37°C |
| 氣相 | 95%空氣，5%二氧化碳 |
| 培養基更換頻率 | 每2-3天更換一次 |
| 最佳細胞密度 | 達到80%-90%時進行傳代 |
| 傳代比例 | 推薦1:2至1:10 |
| 凍存液 | DMSO（終濃度10%） |
| 凍存條件 | -80°C保存2小時後轉入液氮儲存 |
| 基因表達 | 表達纖溶酶原激活劑 |
培養教程
LLC-MK2恒河猴腎細胞培養教程
收到LLC-MK2細胞後的處理
包裝檢查: 收到LLC-MK2細胞後，檢查運輸包裝的密封性，確保LLC-MK2細胞培養(yang) 瓶無破損、漏液或渾濁現象。若發現異常，請聯係供應商。
顯微觀察: 去除LLC-MK2細胞培養(yang) 瓶的封口膜，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中靜置2-3小時後，利用顯微鏡觀察LLC-MK2細胞的生長狀態，確保細胞形態正常、無汙染。
培養(yang) 基更換: 倒掉原培養(yang) 基，加入6 ml完全培養(yang) 基（建議使用高糖DMEM培養(yang) 基，添加10%胎牛血清），為(wei) LLC-MK2細胞提供最佳生長環境。
LLC-MK2細胞複蘇
快速解凍: 將裝有凍存LLC-MK2細胞的凍存管置於(yu) 37℃水浴中快速解凍，輕輕搖晃以確保LLC-MK2細胞完全溶解。
離心清洗: 解凍後，立即加入4 ml預熱的培養(yang) 基，輕輕混勻，在1000 rpm條件下離心4分鍾，去除上清液，減少冷凍保存介質對LLC-MK2細胞的影響。
重懸培養(yang) : 加入1-2 ml新鮮培養(yang) 基重懸LLC-MK2細胞，將細胞懸液轉移至新的培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中，補充約8 ml培養(yang) 基，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
培養(yang) 基更換: 次日更換培養(yang) 基，以去除LLC-MK2細胞凍存過程中殘留的物質，同時觀察細胞密度及狀態。
LLC-MK2細胞傳代
傳(chuan) 代時機: 當LLC-MK2細胞鋪滿培養(yang) 瓶的80%-90%時，應進行傳(chuan) 代操作。
PBS清洗: 棄去舊培養(yang) 基，用無鈣鎂PBS溶液輕輕洗滌LLC-MK2細胞1-2次，去除殘留培養(yang) 基成分。
胰酶消化: 加入1 ml胰蛋白酶-EDTA（0.25%胰酶和0.53 mM EDTA）溶液，放置在37℃孵育1-2分鍾，待LLC-MK2細胞逐漸變圓脫落。
終止消化: 觀察細胞消化情況，輕敲瓶壁後加入含血清的培養(yang) 基終止消化。
離心重懸: 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清後加入1-2 ml培養(yang) 基重懸LLC-MK2細胞。
比例分裝: 將LLC-MK2細胞懸液按1:2比例接種到新的培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中，並每瓶添加8 ml新鮮培養(yang) 基。
LLC-MK2細胞凍存
準備工作: LLC-MK2細胞生長狀態良好、無汙染時，進行凍存操作。
細胞消化與(yu) 計數: 棄去培養(yang) 基，用PBS清洗一次，再加入1 ml胰酶消化，使LLC-MK2細胞脫落。隨後加入等體(ti) 積含血清的培養(yang) 基終止消化，並進行細胞計數。
離心和重懸: 在1000 rpm條件下離心4分鍾，棄去上清後根據細胞密度調整懸液體(ti) 積，加入終濃度10%的DMSO和血清，製備LLC-MK2細胞懸液（密度不低於(yu) 1 x 10^6/ml）。
分裝與(yu) 降溫: 每支凍存管加入1 ml LLC-MK2細胞懸液，密封並標記。將凍存管放入程序降溫盒中，以-1℃/分鍾速率置於(yu) -80℃冰箱冷凍約2小時，然後轉移至液氮罐中長期保存。
LLC-MK2細胞培養注意事項
培養(yang) 基和血清質量: 使用經過質量檢測的胎牛血清，確保無雜質或汙染。馬血清可顯著促進LLC-MK2細胞增殖，若更換其他類型血清，可能導致LLC-MK2細胞生長減緩。
記錄與(yu) 觀察: 建議在收到LLC-MK2細胞的前三天，每日拍攝顯微圖像，記錄LLC-MK2細胞形態和密度變化，以便後續參考。
操作環境: 所有LLC-MK2細胞操作均應在二級生物安全櫃中進行，且必須穿戴防護裝備，嚴(yan) 格遵守實驗室安全操作規範。