
B95-8細胞株是一種由絨猴(Macaca mulatta)的外周血淋巴細胞通過Epstein-Barr病毒(EB病毒)轉化形成的細胞係,將絨猴的EB病毒轉化的白細胞暴露於(yu) 從(cong) 人類白細胞中提取的EB病毒,進而通過病毒感染實現細胞的持續增殖。B95-8細胞係具備顯著的連續傳(chuan) 代能力,倍增時間約為(wei) 40小時,同時能夠釋放高滴度的EB病毒,被廣泛應用於(yu) 病毒學和免疫學研究中,尤其適合用於(yu) EB病毒的轉染研究和人類淋巴細胞係的建立。
B95-8細胞特性特征
高滴度EB病毒釋放:B95-8細胞是一個(ge) 連續株,能夠釋放高滴度的EB病毒,成為(wei) 研究EB病毒及其相關(guan) 疾病的重要工具。
EB病毒基因組:B95-8細胞中攜帶有EB病毒的基因組,能夠在感染後持續表達EB病毒的相關(guan) 蛋白。
表麵標誌物:B95-8細胞通常表達B細胞特異性標誌物,如CD19、CD20等,這些標誌物在免疫學研究中具有重要意義(yi) 。
蛋白質表達:B95-8細胞能夠表達多種與(yu) EB病毒相關(guan) 的蛋白質,包括潛伏膜蛋白(LMP)和早期抗原(EA),這些蛋白在研究EB病毒的潛伏感染及其致病機製中至關(guan) 重要。
基因表達譜:研究表明,B95-8細胞的基因表達譜與(yu) 正常B細胞有所不同,這為(wei) 理解EB病毒如何影響宿主細胞提供了線索
B95-8細胞參數表
細胞名稱 | B95-8細胞(絨猴EB病毒轉化的白細胞) |
細胞別稱 | B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D |
來源 | 絨猴外周血淋巴細胞通過EB病毒轉化 |
細胞類型 | 懸浮細胞 |
形態特征 | 外周血淋巴細胞樣 |
原始來源 | Cotton-top Tamarin Monkey |
細胞特性 | Lymphoblasts(淋巴母細胞) |
培養基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
胰蛋白酶消化濃度 | 0.25% |
倍增時間 | 約40小時 |
接種密度 | 1:2至1:4 |
培養密度 | 3-9 x 10^5 cells/ml |
換液周期 | 每2-3天更換一次培養基 |
培養環境 | 溫度:37℃,CO₂濃度:5% |
EB病毒基因組 | 存在EB病毒相關基因 |
表麵標誌物 | CD19、CD20等B細胞特異性標誌物 |
蛋白質表達 | 表達潛伏膜蛋白(LMP)和早期抗原(EA) |
遺傳穩定性 | 良好的遺傳穩定性,適合長期實驗 |
基因表達譜 | 與正常B細胞有所不同 |
其它特性 | 高滴度EB病毒釋放;連續傳代能力 |
應用領域 | 病毒學、免疫學、疫苗開發 |
凍存條件 | -80℃或液氮中保存 |
培養教程
B95-8絨猴EB病毒轉化的白細胞培養教程
細胞複蘇
將培養(yang) B95-8細胞的培養(yang) 基預熱至37℃。
在生物安全櫃內(nei) 進行操作,確保無菌環境,以避免B95-8細胞受到汙染。
從(cong) 液氮中取出B95-8細胞凍存管,立即置於(yu) 37℃水浴中,輕輕搖晃,約1-2分鍾後完全解凍。
將解凍的B95-8細胞轉移至無菌離心管中,加入5-10毫升預熱培養(yang) 基,混勻。
200-300g條件下離心5分鍾,棄去上清液以去除冷凍保護劑,確保B95-8細胞複蘇的完整性。
用新鮮培養(yang) 基將B95-8細胞重懸,並根據培養(yang) 需求選擇合適的培養(yang) 容器,例如在6cm培養(yang) 皿中加入10ml培養(yang) 基。
將B95-8細胞培養(yang) 皿置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中進行培養(yang) ,以確保細胞正常生長。
細胞傳代
每2-3天觀察B95-8細胞的形態和密度,注意是否有汙染跡象,保持B95-8細胞的健康狀態。
當B95-8細胞密度達到70%-80%時進行傳(chuan) 代。
棄去舊培養(yang) 基,用無鈣鎂的PBS(磷酸鹽緩衝(chong) 液)洗滌B95-8細胞。
加入0.25%胰蛋白酶溶液,在37℃下消化2-5分鍾,觀察B95-8細胞是否開始脫落。
加入等體(ti) 積的培養(yang) 基終止胰酶消化,輕輕吹打使B95-8細胞重懸。
按適當比例(如1:2或1:4)將B95-8細胞重懸液接種至新的培養(yang) 皿中,加入新鮮培養(yang) 基。
將B95-8細胞繼續在37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) ,確保細胞增殖的穩定性。
注意事項
培養(yang) B95-8細胞時,應嚴(yan) 格無菌操作,避免細菌和真菌汙染。
通過顯微鏡觀察B95-8細胞的生長狀態,定期檢查以確認細胞健康,如發現培養(yang) 基顏色異常或沉澱等汙染跡象,應立即處理。
控製B95-8細胞的傳(chuan) 代頻率,確保每次傳(chuan) 代的細胞密度適中,避免過度或不足的傳(chuan) 代。
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參考文獻
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