HEL細胞（人紅白細胞白血病細胞）

HEL細胞係（人類紅白血病細胞係）源自一名30歲白人男性患者，患有惡性紅細胞白血病。HEL細胞係從(cong) 患者的外周血中建立，細胞形態呈現淋巴母細胞樣特征，主要以懸浮狀態生長，但部分細胞也表現出貼壁生長的能力。HEL細胞提供了一種用於(yu) 研究紅細胞分化和球蛋白基因表達的模型，它類似於(yu) 小鼠中的血友病。

HEL細胞特性特征

• EB病毒核抗原：HEL細胞為(wei) EB病毒核抗原陰性。

• 免疫球蛋白：HEL細胞表麵和細胞質中均未檢測到免疫球蛋白。

• HLA抗原：HEL細胞表達多種HLA抗原，包括HLA-A3、AW32和BW35。

• 其他抗原：HEL細胞還表達β-2小球蛋白和一定比例的Ia抗原。

• 珠蛋白合成：HEL細胞能夠自發和誘導珠蛋白合成，主要產(chan) 生Gγ和Aγ鏈，同時少量表達胚胎鏈（ε、ζ）和α鏈，但β鏈無法檢測到。
  

• JAK2基因：通過RT-PCR和測序確認了HEL細胞中突變JAK2的表達。

• HEL細胞表達多種細胞表麵標誌物，包括CD3-、CD13+、CD14-、CD19-、CD33+、CD41a+、CD71+和CD235a+

• 羥基脲是一種常用於(yu) 治療各種癌症（包括紅白血病）的藥物，也可能調節HEL細胞的死亡。
  

HEL細胞參數表

HEL人紅白細胞白血病細胞培養教程

HEL細胞呈圓形懸浮生長，偶有小聚團，部分HEL細胞會(hui) 附著於(yu) 培養(yang) 瓶底。HEL細胞廣泛應用於(yu) 紅細胞分化和珠蛋白基因表達的研究。

HEL細胞的複蘇步驟

• 將凍存的HEL細胞管置於(yu) 37°C水浴中迅速解凍。

• 解凍後，立即加入4 mL預熱的完全培養(yang) 基（90% RPMI-1640 + 10% FBS），輕輕混勻HEL細胞。

• 以1000 rpm離心3分鍾，小心吸去上清，並用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸HEL細胞。

• 將HEL細胞懸液接種到T25培養(yang) 瓶中，加入適量的培養(yang) 基（約10-12 mL），置於(yu) 37°C、5% CO2培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

HEL細胞的常規傳代步驟

• 當HEL細胞密度達到80%-90%時，需進行傳(chuan) 代操作。

• 輕輕吹打HEL細胞以懸浮貼壁的HEL細胞，將HEL細胞懸液收集到離心管中。

• 以1000 rpm離心3-5分鍾，吸去上清，並用預熱的完全培養(yang) 基重懸HEL細胞。

• 根據所需的傳(chuan) 代比例（通常為(wei) 1:2至1:4），將HEL細胞均勻分配到新的培養(yang) 瓶中，加入適量培養(yang) 基。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) HEL細胞。

HEL細胞的換液步驟

• 每2-3天更換一次HEL細胞培養(yang) 基，確保HEL細胞獲得足夠的營養(yang) 。

• 輕輕吹打HEL細胞，將培養(yang) 基收集到離心管中，1000 rpm離心3-5分鍾。

• 吸去上清，用新鮮預熱的培養(yang) 基重懸HEL細胞，重新接種回原培養(yang) 瓶中。

• 補充足夠的培養(yang) 基，繼續在培養(yang) 箱中培養(yang) HEL細胞。

HEL細胞的計數及凍存步驟

• 取少量HEL細胞懸液，用血球計數板或自動細胞計數儀(yi) 進行HEL細胞計數，確保HEL細胞濃度在適當範圍內(nei) 。

• 按照92% FBS + 8% DMSO的比例配製HEL細胞凍存液。

• 將HEL細胞懸浮在凍存液中，分裝到預冷的凍存管中，每管裝入200-300萬(wan) HEL細胞。

• 將HEL細胞凍存管置於(yu) -80°C冰箱中過夜，次日轉移至液氮罐中長期保存HEL細胞。

重要注意事項

• 輕柔操作：在傳(chuan) 代HEL細胞時，應輕輕吹打HEL細胞，避免產(chan) 生氣泡，以防止對HEL細胞的機械損傷(shang) 。

• 無抗生素培養(yang) ：HEL細胞培養(yang) 基中不建議加入抗生素，以避免掩蓋可能的細菌汙染。

• 定期監測：定期檢查HEL細胞形態和生長狀態，如發現異常應及時處理。

• 懸浮與(yu) 貼壁特性：HEL細胞主要以懸浮形式生長，但部分HEL細胞會(hui) 貼壁。在傳(chuan) 代和換液過程中，應注意輕輕吹打HEL細胞，確保懸浮HEL細胞均勻收集。

• HEL細胞密度控製：建議將懸浮的HEL細胞的生長密度保持在（1-5）x10^5 cells/mL之間，以維持HEL細胞的健康狀態。