RD細胞（人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞）

RD細胞係是從(cong) 一名3歲女性患者的骨盆惡性胚胎橫紋肌肉瘤中分離出的細胞，由McAllister等人在1969年首次建立。RD細胞是源自肌肉組織的典型大型、多核、紡錘形細胞，主要應用於(yu) 癌症研究和病毒學檢測。

RD細胞在49和50的超二倍體(ti) 雙峰莖係數內(nei) 的不穩定性。根據ATCC的初始種子庫，22個(ge) 細胞顯示染色體(ti) 關(guan) 聯，15個(ge) 細胞具有微染色體(ti) ，2個(ge) 細胞存在片段，2個(ge) 細胞出現斷裂，2個(ge) 沒有彩色間隙，1個(ge) 細胞具備二次收縮現象。RD細胞具備遺傳(chuan) 不穩定性。

RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞特征特性

• RD細胞能夠產(chan) 生肌紅蛋白和肌球蛋白ATPase，這些是橫紋肌細胞的典型標誌物，反映了其肌肉來源的特性。
  

• RD細胞常見多核細胞，顯示出腫瘤細胞的多樣性和複雜性；細胞形態呈紡錘形，具有典型的肌肉細胞特征。

• 蛋白質表達：RD細胞在培養(yang) 過程中會(hui) 表達多種與(yu) 肌肉細胞相關(guan) 的蛋白質，包括肌紅蛋白和肌球蛋白ATPase。
  

• 貼壁生長：RD細胞主要為(wei) 貼壁生長。

• 基因突變：作為(wei) 惡性胚胎橫紋肌肉瘤細胞，RD細胞攜帶多種基因突變。

• 同工酶：G6PD，B

• 病毒易感性：人脊髓灰質炎病毒1；水皰性口炎，格拉斯哥（印第安納州）；水皰性口炎，奧賽（印第安納州）；單純皰疹病毒；痘苗病毒

RD細胞係參數表

RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞係培養教程

RD細胞複蘇

• 將含有RD細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中快速解凍，約1-2分鍾。
  

• 將1 mL RD細胞懸液轉移至含4 mL預熱培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。
  

• 以1000 rpm離心3分鍾，棄去上清。
  

• 用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸RD細胞。
  

• 將RD細胞懸液轉移至含8-10 mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中，在37℃、5% CO2條件下培養(yang) 過夜。
  

• 次日換液並顯微鏡下觀察RD細胞狀態，確保RD細胞貼壁良好並無汙染。
  

RD細胞傳代

• 細胞密度：當RD細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代。

• 棄去舊培養(yang) 液，用PBS緩衝(chong) 液洗滌RD細胞1-2次。
  

• 加入0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液，置於(yu) 37℃下消化約1分鍾。

• 在顯微鏡下觀察，RD細胞大部分變圓並開始脫落時，加入少量培養(yang) 基終止消化。
  

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清，用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸RD細胞。
  

• 按1:2或1:4比例將RD細胞接種到新的培養(yang) 瓶中，加入足夠培養(yang) 基並在標準條件下培養(yang) 。
  

RD細胞凍存

• 收集對數生長期的RD細胞。
  

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。
  

• 用預冷的凍存液（90% FBS + 10% DMSO）重懸RD細胞，調整密度至1×10^6/mL。

• 將RD細胞懸液分裝至凍存管中，使用程序降溫盒在-80℃降溫24小時。
  

• 將凍存管轉移至液氮中進行長期保存。
  

提高RD細胞培養效率的策略

• 優(you) 化培養(yang) 基：確保使用高質量的DMEM培養(yang) 基，定期更換以提供RD細胞充足的營養(yang) 和生長因子。

• 控製培養(yang) 環境：嚴(yan) 格控製培養(yang) 溫度、CO2濃度和濕度，保持RD細胞環境穩定。

• 定期傳(chuan) 代：及時傳(chuan) 代以避免RD細胞過度擁擠，影響生長效率。

• 使用新鮮培養(yang) 基：RD細胞傳(chuan) 代後立即補充新鮮培養(yang) 基，確保細胞快速恢複生長。

RD細胞在不同培養基中的生長差異

• DMEM基礎培養(yang) 基：RD細胞在DMEM中生長迅速，適合常規培養(yang) 和傳(chuan) 代。

• RPMI-1640：適合某些特定實驗，但RD細胞生長速度可能較慢。

• MEM：對於(yu) 營養(yang) 需求較低的實驗條件，RD細胞在此培養(yang) 基中的生長速度可能不如DMEM快。

避免RD細胞傳代損傷的措施

• 溫和消化：嚴(yan) 格控製RD細胞消化時間，觀察細胞脫落狀態以避免過度消化。

• 適當離心：使用低速離心避免對RD細胞的機械損傷(shang) ，建議1000 rpm離心3-4分鍾。

• 輕柔操作：在處理RD細胞懸液時，避免劇烈震蕩，以保護細胞的完整性。