
A673細胞(橫紋肌肉瘤細胞係)
- 來源:尤因肉瘤
- 細胞特征:貼壁細胞 , 多邊形
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:A673細胞能產(chan) 生致癌潛力的生長因子,同時也分泌生長抑製因子
A673人橫紋肌肉瘤細胞是從(cong) 一名患有尤因肉瘤的15歲女性患者的肌肉中分離出來的呈現多邊形形態的細胞係。
A673細胞的顯著特征之一是能夠產(chan) 生幾種具有致癌潛力的生長因子。同時還分泌生長抑製因子,為(wei) 細胞生長調節提供平衡的環境。
A673細胞特性
A673細胞是源自15歲女性患者尤因肉瘤的肌肉中分離出的腫瘤細胞係。
A673細胞呈多邊形,貼壁生長
最初被認為(wei) 是橫紋肌肉瘤細胞係,後證實來自Ewing肉瘤。
在軟瓊脂上可形成克隆,具有四個(ge) 以上的標誌染色體(ti) 、一個(ge) 額外的F染色體(ti) 和兩(liang) 個(ge) 異常的B染色體(ti) 。
A673細胞能產(chan) 生致癌潛力的生長因子,同時也分泌生長抑製因子,維持細胞生長的平衡環境。
具有致瘤性,在免疫抑製的小鼠中可誘導腫瘤形成。
A673細胞參數表
細胞名稱 | A-673(人橫紋肌肉瘤細胞) |
別稱 | A673; RMS 1598; RMS1598 |
種屬 | 人 (Homo sapiens) |
來源 | 患者:15歲女性;疾病:尤因肉瘤 |
組織來源 | 肌肉 |
細胞形態 | 多邊形 |
生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時間 | 約28小時 |
生物安全等級 | BSL-1 |
染色體特征 | 四個以上的標誌染色體,一個額外的F染色體和兩個異常的B染色體 |
克隆形成能力 | 在軟瓊脂上形成克隆 |
致瘤性 | 能在免疫抑製的小鼠中成瘤 |
生長因子 | 產生多種具有致癌潛力的生長因子;分泌生長抑製因子,提供平衡的生長環境 |
培養基 | DMEM (高糖) + 10% FBS + 1% P/S |
培養環境 | 95%空氣 + 5% CO2,37℃ |
推薦傳代比例 | 1:3至1:4 |
推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
傳代方法 | 消化2分鍾,每2至3天換液一次 |
凍存液配方 | 配方一:基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO 配方二:DMEM (高糖) + 10% FBS + 10% DMSO |
儲存溫度 | 液氮 |
活力 | 95%(通過台盼藍排除法檢測) |
支原體檢測 | 無支原體汙染 |
其他檢測 | 不含HIV-1、HBV、HCV、細菌、酵母和真菌 |
保藏機構 | ATCC (CRL-1598); ECACC (85111504) |
應用 | 用於研究腫瘤促進因子和腫瘤抑製因子之間的相互作用 |
培養教程
A673人橫紋肌肉瘤細胞培養
A673細胞傳代步驟
當A-673細胞密度達到80%-90%時,可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,使用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
在培養(yang) 瓶中加入2ml消化液(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA),37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。
觀察細胞消化情況,大部分細胞變圓並脫落後,加入適量培養(yang) 基終止消化,輕敲幾下培養(yang) 瓶。
補加6-8ml/瓶培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
首次傳(chuan) 代時,將A-673細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中,建議凍存備用。
A673細胞凍存步驟
棄去培養(yang) 基後,用PBS潤洗一遍細胞,加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml含血清的培養(yang) 基終止消化。
以4min 1000rpm離心去掉上清,加入1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,細胞密度不低於(yu) 1x10^6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液。
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2小時後轉入液氮灌儲(chu) 存。記得標識凍存管位置。
A673細胞培養注意事項
收到A-673細胞後,請檢查產(chan) 品包裝狀況,如有破損、溢出或汙染,請及時聯係。
在75%酒精處理A-673細胞培養(yang) 瓶表麵後,先不打開培養(yang) 瓶蓋,靜置2-3小時以穩定細胞狀態。
靜置完成後,確認A-673細胞生長狀態並拍照記錄。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 16,21 |
D3S1358 | 14 |
D5S818 | 11,12 (ATCC=CRL-1598; CCRID=3101HUMTCHu223; CLS=300454; Cosmic-CLP=684052; ECACC=85111504; KCLB=21598; PubMed=24312454; PubMed=25010205; PubMed=25877200; PubMed=30879952) |
12 (PubMed=19787792) | |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 8,13 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,30.2 |
FGA | 19,20 |
Penta D | 12,13 |
Penta E | 10,13 |
SE33 | 30.2,32.2 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 15,18 |
參考文獻
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