T98G細胞係（人腦膠質瘤細胞係）

T98G細胞是一種成纖維樣人腦膠質瘤細胞係，在1970年代從(cong) 一名61歲白人男性多形性膠質母細胞瘤患者的大腦組織中分離，由GH Stein保藏。T98G細胞係在實驗室條件下能夠持續傳(chuan) 代，並保持相對的遺傳(chuan) 穩定性，是神經科學、腫瘤學和藥物篩選研究中的重要模型係統。

T98G細胞的染色體(ti) 數目超五倍體(ti) ，通常在128至132條之間，且具有顯著的染色體(ti) 結構改變。大部分細胞中存在14至16條標記染色體(ti) ，這些標記染色體(ti) 多為(wei) 複雜的染色體(ti) 間易位形成，如der(1)t(1;?)(p36;?)、i(6p)、der(10)t(10;?)。其中，der(10)和der(19)標記染色體(ti) 可能由平衡易位形成，即t(10;19)(q24;q13)，這些標記物以及微小穩心點在多數細胞中存在三個(ge) 或更多拷貝。此外，N5、N7、N11、N13、N20、N21、N22等染色體(ti) 在大部分細胞中均有六個(ge) 或更多拷貝，而X和N15染色體(ti) 僅(jin) 有一個(ge) 副本。

T98G細胞係特性特征

• 生長特性：在缺乏血清或細胞密度過高的情況下，T98G細胞會(hui) 進入G1期的存活阻滯狀態。表現出不依賴於(yu) 錨定的特性。

• 基因表達：T98G細胞係顯示出特定的基因表達模式。高度表達ACTA2基因，該基因與(yu) 肌肉收縮活動相關(guan) 。

• 致瘤性：T98G細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 不會(hui) 引起腫瘤形成。

• 遺傳(chuan) 穩定性：T98G細胞係在實驗室條件下能夠持續傳(chuan) 代，並保持一定的遺傳(chuan) 穩定性。

T98G細胞係參數表

T98G人腦膠質瘤細胞係培養教程

複蘇T98G細胞

• 將T98G細胞凍存管從(cong) 液氮中取出後，立即將其放入37℃的水浴中，輕輕搖動，直到T98G細胞完全解凍（大約1-2分鍾）。

• 將解凍後的T98G細胞懸液（約1 mL）移入含有4 mL預熱的培養(yang) 基（DMEM + 10% FBS + 1% P/S）的無菌離心管中，輕輕混勻，以稀釋DMSO。
  

• 在1000 rpm下離心T98G細胞3分鍾，小心去除上清液。
  

• 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打使T98G細胞均勻分散。
  

• 將重懸的T98G細胞轉移到培養(yang) 瓶中，添加適量的培養(yang) 基，然後將其放置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
  

• 第二天，檢查T98G細胞密度並更換培養(yang) 基，以去除殘留的DMSO，確保T98G細胞處於(yu) 良好狀態。
  

T98G細胞傳代

• 當T98G細胞達到80%-90%匯合時，可以開始傳(chuan) 代。
  

• 小心地棄去T98G細胞培養(yang) 上清，用無鈣、無鎂的PBS洗滌T98G細胞1-2次。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，確保消化液完全覆蓋T98G細胞。倒掉多餘(yu) 的消化液後，將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中，持續消化約1分鍾，直到T98G細胞開始變圓和脫落。
  

• 輕輕拍打培養(yang) 瓶，加入預熱的培養(yang) 基以終止T98G細胞消化過程。
  

• 將T98G細胞懸液轉移至無菌離心管中，在1000 rpm下離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 加入適量培養(yang) 基（1-2 mL），輕輕吹打使T98G細胞均勻分布。
  

• 將重懸後的T98G細胞按1:2或1:3的比例分配至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中，補充8 mL培養(yang) 基，然後置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。
  

T98G細胞凍存

• 當T98G細胞生長良好並達到適當的匯合度時，收集T98G細胞，將其與(yu) 培養(yang) 液一起轉移至無菌離心管中，1000 rpm離心。
  

• 棄去上清液，加入適量的凍存液（如DMSO與(yu) FBS的混合物），輕輕混勻。
  

• 將T98G細胞懸液分裝至凍存管中，每管不超過1 mL。
  

• 將T98G細胞凍存管先放入-80℃冰箱中冷凍24小時，隨後轉移至液氮罐中進行長期保存。