
GL261細胞(小鼠膠質瘤細胞)
- 來源:膠質瘤
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:gl261細胞係以攜帶TP53和KRAS基因突變而聞名
GL-261細胞係起源於(yu) C57BL/6小鼠,通過顱內(nei) 注射3-甲基膽蒽誘導形成腫瘤,經過多代移植以在同係小鼠中維持其存活。gl261細胞係以攜帶TP53和KRAS基因突變而聞名。gl261細胞係常用於(yu) 研究膠質母細胞瘤的模型。
GL261細胞特性特征
gl261細胞攜帶TP53和KRAS基因的突變。這些突變導致了C-Myc的高度表達,影響了細胞的生長和增殖特性。
gl261細胞高度表達MHC I類分子。
gl261細胞有限表達MHC II類分子、CD80和CD86。
侵襲性:gl261細胞具有高度侵襲性。
轉移性:雖然具有侵襲性,但GL-261細胞不易發生轉移。
持續性:已知GL-261腫瘤不會(hui) 自發消退。
由於(yu) 其MHC分子的表達模式,gl261細胞具有部分免疫原性。
某些gl261細胞係被轉染了熒光素酶基因(如GL-261-LUC),使其能夠用於(yu) 生物發光成像研究。
GL261細胞參數表
細胞名稱 | GL261細胞(小鼠膠質瘤細胞) |
細胞別稱 | GL-261 / GL261 |
來源 | 小鼠膠質瘤 |
生長特性/形態 | 貼壁生長,成纖維細胞樣 |
細胞代數 | 10代以內 |
檢測 | 支原體檢測陰性; |
熒光素酶標記 | GL-261-LUC (可選) |
培養基 | 87% DMEM + 10% FBS + 1% GlutaMAX-1穀氨酰胺 + 1% HEPES 1M Buffer + PS + 1.0 µg/ml puro |
培養條件 | 37℃,95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代 | 密度80%-90%時傳代;首次1:2傳代;0.25% Trypsin-0.02% EDTA消化 |
凍存/運輸 | 無血清凍存液,液氮儲存;複蘇或凍存發貨 |
藥篩濃度 | puro 1.0 µg/ml篩選,0.5 µg/ml維持 |
突變/表達 | TP53和KRAS突變,C-Myc高度表達 |
分子表達 | 高度表達MHC I類;有限表達MHC II類、CD80和CD86 |
研究用途 | 腦腫瘤模型、藥物篩選、基因研究 |
生物學特性 | 高度侵襲性,不易轉移,不會自發消退 |
組織學特征 | 類似成腦室管膜細胞瘤,具膠質母細胞瘤表型 |
使用限製 | 僅限科研,不可用於治療 |
收貨處理 | 75%酒精消毒,37℃培養箱放置2-4小時穩定;立即凍存或複蘇 |
基因表達情況 | 促腎上腺皮質激素 (ACTH) |
抗病毒特性 | 能抗脊髓灰質炎病毒;鼠痘病毒陰性 |
培養教程
GL261小鼠膠質瘤細胞培養教程
細胞複蘇
迅速在37℃水浴中解凍凍存管中的1 mL GL261細胞懸液。
加入4 mL預熱的培養(yang) 基並混勻。
以1000 rpm離心3-4分鍾,棄去GL261細胞的上清。
用1-2 mL新鮮培養(yang) 基重懸GL261細胞。
將GL261細胞轉移至培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿,加入適量培養(yang) 基後置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳代
當GL261細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
棄去GL261細胞的培養(yang) 上清,用無鈣鎂的PBS潤洗1-2次。
加入1 mL 0.25% Trypsin-0.02% EDTA消化液,37℃消化1-3分鍾,觀察GL261細胞脫落。
加入3-5 mL含血清的培養(yang) 基終止消化。
吹打GL261細胞後以1000 rpm離心3-5分鍾,棄去上清。
用新鮮培養(yang) 基重懸GL261細胞後,按1:2或其他所需比例接種到新培養(yang) 瓶中。
換液
在傳(chuan) 代後第2-3天進行換液,加入新鮮預熱的完全培養(yang) 基。
定期為(wei) GL261細胞換液,通常每2-3天一次,以根據細胞生長情況進行調整。
細胞凍存
使用無血清凍存液,DMSO終濃度為(wei) 10%。
GL261細胞的密度應不低於(yu) 1x10⁶/mL。
將GL261細胞懸液分裝到凍存管中,置於(yu) 程序降溫盒內(nei) ,過夜後轉入液氮中長期保存。
注意事項
細胞觀察:定期檢查GL261細胞的形態和生長狀況,以確保其健康。
無菌操作:始終保持無菌技術,防止GL261細胞的汙染。
支原體(ti) 檢測:定期進行以確保GL261細胞培養(yang) 環境的純淨。
均勻分布:確保新培養(yang) 瓶中GL261細胞均勻分布,避免GL261細胞過度融合或分裂。
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