U138MG細胞（人腦神經膠質瘤細胞）

U-138MG人腦神經膠質瘤細胞係是從(cong) 一名47歲白人男性的IV級膠質母細胞瘤中分離出來，由J. Ponten等人在1966年至1969年間建立。U138MG細胞屬於(yu) 神經膠質瘤細胞，廣泛應用於(yu) 神經科學領域，特別是在腫瘤生物學、藥物篩選以及治療響應研究中。

U-138MG細胞具有典型的上皮樣形態，呈貼壁生長，其細胞遺傳(chuan) 學特征顯示多倍體(ti) （從(cong) 超二倍體(ti) 到五倍體(ti) ）狀態，莖係染色體(ti) 接近三倍體(ti) 。染色體(ti) 組成高度一致，標記染色體(ti) 包括t(11;5)、t(8q;4)、t(19;18)等。在所有的中期細胞中都檢測到4號染色體(ti) 。U138MG細胞係已被多家生物樣本庫收錄，包括ATCC、DSMZ、ECACC等。

U138MG細胞特性特征

• 抗原表達：U138MG細胞係表達A型血抗原，Rh+，同時具有多種同工酶活性，如AK-1、ES-D、G6PD等。

• 致瘤性：U138MG細胞在免疫抑製小鼠中不致瘤，表明其在體(ti) 內(nei) 的致瘤能力較低。

• 遺傳(chuan) 相似性：U-138MG與(yu) U-118MG細胞在細胞遺傳(chuan) 學上非常相似，至少共享六條衍生標記染色體(ti) 。兩(liang) 者在VNTR（變異數量串聯重複）和STR（短串聯重複）模式上也表現出相似性。
  

• 支原體(ti) 汙染：1974年3月觀察到支原體(ti) 汙染並得到治愈。

• U138MG細胞形態上與(yu) HTB-14細胞不同，增殖速率較慢。

• 同工酶:AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，1
  

U138MG細胞參數表

U138MG人腦神經膠質瘤細胞培養教程

細胞複蘇步驟

• 快速解凍：將冷凍的U138MG細胞從(cong) 液氮中取出，立即放入37°C水浴中，輕輕晃動1-2分鍾，直至細胞完全解凍。

• 稀釋細胞：將解凍後的U138MG細胞懸液移入含有9 ml預熱的完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混勻。

• 離心：以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 重懸細胞：將U138MG細胞沉澱重懸於(yu) 5 ml完全培養(yang) 基中。

• 培養(yang) ：將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱內(nei) 進行培養(yang) 。

細胞傳代步驟

• 檢查匯合度：當U138MG細胞匯合度達到70%-80%時，進行傳(chuan) 代操作。

• 細胞洗滌：棄去舊培養(yang) 基，用無鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液輕輕洗滌U138MG細胞1-2次。

• 細胞消化：加入0.25%胰蛋白酶（1-2 ml），37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，直至細胞開始脫落。

• 終止消化：加入5 ml完全培養(yang) 基終止胰蛋白酶的作用。

• 細胞收集與(yu) 離心：將U138MG細胞懸液轉移至離心管中，1000 rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 細胞重懸：將U138MG細胞重懸於(yu) 適量完全培養(yang) 基中（約5-10 ml）。

• 分瓶：按1:3至1:5的比例進行分瓶培養(yang) ，補充培養(yang) 基至適量（5-8 ml）。

• 繼續培養(yang) ：將新的U138MG細胞培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中。

細胞凍存步驟

• 製備凍存液：按90%胎牛血清（FBS）和10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO）的比例配製凍存液。

• 收集細胞：傳(chuan) 代後將U138MG細胞重懸於(yu) 凍存液中，細胞濃度約為(wei) 1×10^6 cells/ml。

• 分裝：將U138MG細胞懸液分裝至凍存管中，每管1 ml。

• 程序冷凍：使用程序降溫儀(yi) ，以每分鍾1°C的降溫速度冷凍U138MG細胞，最終儲(chu) 存在液氮罐中。