WERI-Rb-1細胞（人視網膜神經膠質瘤細胞）

WERI-Rb-1細胞係是來源於(yu) 一名1歲女性患者視網膜母細胞瘤組織的人類視網膜神經膠質瘤細胞。WERI-RB-1細胞係由R.M. McFall和T.W. Sery於(yu) 1974年建立，並由美國細胞庫（ATCC）保存。

WERI-Rb-1細胞係的染色體(ti) 接近二倍體(ti) ，模式染色體(ti) 數目為(wei) 47，出現率為(wei) 38%，並且多倍體(ti) 細胞占9%。WERI-RB-1細胞係具有15到16條標記染色體(ti) ，包括以下重排：t(1, ?), t(3p, 5q), der(3)t(?q29; ?), t(3q, ?), 5q+, i(6p), t(7q, ?), 9q+, t(10q, 21q), 16q+，以及其他五到六個(ge) 標記染色體(ti) 。正常的3號、10號、13號和16號染色體(ti) 缺失，X染色體(ti) 存在兩(liang) 個(ge) 拷貝，而在QM染色製劑中未檢測到Y染色體(ti) 。

WERI-Rb-1細胞係因其獨特的形態和遺傳(chuan) 特征，廣泛用於(yu) 視網膜母細胞瘤的研究，也是研究基因轉染的理想宿主細胞係。

WERI-Rb-1細胞特性特征

• WERI-RB-1細胞呈圓形，通常聚集成葡萄狀的細胞簇。

• 致瘤性：WERI-RB-1細胞具有致瘤性。

• 同工酶：ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，1；PGM1，1；PGM3，0。

• 電鏡觀察：掃描電鏡顯示，WERI-Rb-1細胞表麵有囊泡、片足和微絨毛，且這些結構在數量和頻率上存在變化。
  

• 培養(yang) 特性：在Difco Bacto瓊脂中培養(yang) 後，WERI-Rb-1細胞能夠存活但不形成菌落

WERI-Rb-1細胞參數表

WERI-Rb-1人視網膜神經膠質瘤細胞培養教程

WERI-Rb1細胞複蘇

• 將水浴預熱至37℃。
  

• 準備一個(ge) 含有4-6mL完全培養(yang) 基（RPMI-1640培養(yang) 基，添加10% FBS和1%雙抗）的離心管。

• 將含有1mLWERI-Rb1細胞懸液的凍存管在37℃水浴中快速解凍（約1-2分鍾），確保蓋緊閉。
  

• 解凍後立即用75%酒精消毒凍存管外表麵。

• 將解凍後的WERI-Rb1細胞懸液轉移到準備好的離心管中，輕輕混合。
  

• 在1000RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 加入1-2mL完全培養(yang) 基，輕輕吹打混勻WERI-Rb1細胞。

• 將WERI-Rb1細胞懸液接種到新的培養(yang) 瓶（如T25瓶）或培養(yang) 皿（如10cm皿）中，加入約8mL完全培養(yang) 基。
  

• 將培養(yang) 瓶放置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

• 次日換液，檢查WERI-Rb1細胞密度和狀態。
  

WERI-Rb1細胞傳代

• 傳(chuan) 代準備：傳(chuan) 代前準備好無鈣鎂離子的PBS和消化液（0.25% Trypsin-0.53mM EDTA）。

• 當WERI-Rb1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，用PBS潤洗WERI-Rb1細胞1-2次。

• 加1mL消化液至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 在顯微鏡下觀察，WERI-Rb1細胞大部分變圓並脫落時，迅速終止消化，加少量培養(yang) 基。

• 加6-8mL培養(yang) 基輕輕混勻，在1000RPM離心4分鍾，棄去上清液，重懸於(yu) 1-2mL培養(yang) 基。

• 將WERI-Rb1細胞懸液按1:2比例分到新的含8mL培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中。

WERI-Rb1細胞凍存

• 凍存準備：準備凍存液（90%血清，10% DMSO），現用現配。

• 預冷凍存管。

• WERI-Rb1細胞狀態良好時，棄去上清，用PBS潤洗1-2次。
  

• 加1mL消化液消化1-2分鍾，終止消化後離心收集WERI-Rb1細胞。

• 將WERI-Rb1細胞重懸於(yu) 凍存液中，密度為(wei) 1x10⁶/mL。

• 分裝至凍存管，每管1mL。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，以-1℃/分鍾降溫至-80℃，然後轉移至液氮中長期保存。

優化和注意事項

• 傳(chuan) 代時機選擇：在WERI-Rb1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代，以維持細胞活力；避免過度生長或過低密度。

• 傳(chuan) 代比例調整：初次傳(chuan) 代建議采用1:2比例，根據WERI-Rb1細胞生長情況，調整至1:2到1:5之間。

• 離心參數優(you) 化：使用1000RPM的離心速度，時間為(wei) 3-5分鍾，以收集WERI-Rb1細胞而不損傷(shang) 。

• 培養(yang) 基選擇和更換：使用RPMI-1640培養(yang) 基，添加10% FBS和1%雙抗；定期更換培養(yang) 基，保持WERI-Rb1細胞生長環境新鮮。

• 無菌操作：嚴(yan) 格遵循無菌操作，減少汙染風險；使用75%酒精消毒操作台麵和器具。

• 細胞狀態記錄：在收到WERI-Rb1細胞後的前3天拍攝照片，記錄狀態。

• 懸浮細胞處理：由於(yu) WERI-Rb1細胞為(wei) 懸浮細胞，傳(chuan) 代時需要離心收集細胞；可采用半數換液方式，按1:2到1:3比例分配。

• 環境條件控製：維持WERI-Rb1細胞的培養(yang) 環境在37℃，5% CO₂條件下；確保培養(yang) 箱溫度和氣體(ti) 濃度穩定。