
Y79細胞係(人視網膜母細胞瘤細胞)
- 來源:視網膜
- 細胞特征:懸浮生長, 圓形、成簇細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+20% FBS+1% P/S
- 其他:Y79細胞可以在軟瓊脂中生長,並能在兔子體(ti) 內(nei) 引發腫瘤
Y79細胞係是來源於(yu) 視網膜母細胞瘤的多細胞簇細胞係,最初由Reid TW及其團隊於(yu) 1971年1月建立。Y79細胞源自一名年僅(jin) 兩(liang) 歲半的白人女性患者的右眼切除腫瘤組織,患者有視網膜母細胞瘤的家族遺傳(chuan) 背景。
Y79細胞係顯示出多倍體(ti) 特征,表現為(wei) 雙著絲(si) 粒、斷裂、粉碎及分鍾體(ti) 等異常。
Y79細胞係特性特征
超微結構:Y79細胞的超微結構與(yu) 原始腫瘤相似,包括核膜內(nei) 折、三層膜結構、大的被膜小泡、環孔板、微管、中心粒和基粒等特征。
生長特性:Y79細胞為(wei) 懸浮生長型,呈球形,通常形成葡萄串狀多細胞聚集體(ti) 。
增殖能力:Y79細胞具有較強的增殖能力,通常每周可以進行2-3次傳(chuan) 代,傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3至1:4。
同工酶:Y79細胞的同工酶特征包括AK-1(1),ES-D(1),G6PD(B),GLO-I(2),PGM1(1)。
腫瘤形成能力:Y79細胞可以在軟瓊脂中生長,並能在兔子體(ti) 內(nei) 引發腫瘤。
Y79細胞係參數表
細胞名稱 | Y79細胞係(人視網膜母細胞瘤細胞) |
細胞別稱 | 人視網膜母細胞瘤細胞;Y79; GM01232; GM01232E |
來源 | 人視網膜;2.5歲白人女性,具有視網膜母細胞瘤家族史 |
建立信息 | 1971年1月,由T.W. Reid及其同事建立 |
細胞特性 | 懸浮生長;圓形,成簇細胞樣,葡萄串狀多細胞聚集體 |
染色體特征 | 多倍體;雙著絲粒、斷裂、粉碎和分鍾染色體異常 |
超微結構 | 核膜內折、三層膜結構、大的被膜小泡、環孔板、微管、中心粒、基粒 |
基因特征 | RB1基因部分缺失 |
同工酶 | AK-1(1),ES-D(1),G6PD(B),GLO-I(2),PGM1(1) |
培養基 | RPMI-1640 + 20% FBS + 1% 青黴素/鏈黴素 |
培養條件 | 37℃,95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代信息 | 密度80%-90%;比例1:3至1:4;每周2-3次;10代以內 |
凍存條件 | 無血清凍存液;液氮儲存 |
細胞規格 | 1x10^6 cells/T25或1mL凍存 |
質量控製 | 支原體、細菌、真菌檢測均陰性 |
生物安全等級 | BSL-1 |
應用與限製 | 用於基礎研究和藥物篩選;不可用於疾病治療 |
供應信息 | 現貨,約1周;僅限科研用途 |
收貨處理 | 75%酒精消毒瓶壁,37℃培養箱放置2-4小時 |
特殊說明 | 細胞成團聚集生長,請勿人為分散;可在軟瓊脂中生長,能在兔子體內引發腫瘤 |
培養教程
Y79人視網膜母細胞瘤細胞培養教程
Y79細胞培養基準備
基礎培養(yang) 基:RPMI-1640
胎牛血清:添加20%優(you) 質胎牛血清(FBS)以支持Y79細胞的生長
抗生素:加入1%青黴素/鏈黴素(P/S)以防止Y79細胞的汙染
可選培養(yang) 基:直接使用Y79細胞的完全培養(yang) 基(如YCM-0334),以優(you) 化Y79細胞的培養(yang) 條件
Y79細胞培養條件
溫度:37℃,這是Y79細胞的最佳生長溫度
氣相:95%空氣,5%二氧化碳,適合Y79細胞的生理環境
培養(yang) 容器:使用適合懸浮Y79細胞的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿
Y79細胞複蘇操作
從(cong) 液氮中取出Y79細胞凍存管,並迅速在37℃水浴中解凍。
將解凍後的Y79細胞懸液轉移至含有預熱培養(yang) 基的離心管中。
以1000 RPM離心5分鍾,棄去上清液以獲得Y79細胞。
用新鮮培養(yang) 基重懸Y79細胞,並轉移到培養(yang) 瓶中進行培養(yang) 。
Y79細胞日常培養
每2-3天觀察Y79細胞的生長狀態。
注意Y79細胞以團狀形式生長,切勿人為(wei) 分散Y79細胞團。
Y79細胞傳代操作
頻率:每周傳(chuan) 代2-3次以保持Y79細胞的活力
密度:當Y79細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代
比例:1:3至1:4以保持Y79細胞的最佳生長狀態
步驟:
收集Y79細胞懸液,1000 RPM離心8-10分鍾。
棄去上清液,用新鮮預熱培養(yang) 基重懸Y79細胞。
按1:3至1:4的比例將Y79細胞分裝到新的培養(yang) 瓶中。
Y79細胞換液
可采用半數換液方式:棄去一半的培養(yang) 基,然後加入等量新鮮培養(yang) 基以維持Y79細胞的生長。
Y79細胞凍存
使用無血清凍存液以保護Y79細胞。
將Y79細胞懸液與(yu) 凍存液混合均勻。
分裝到凍存管中,並置於(yu) -80℃冰箱或液氮中長期保存Y79細胞。
注意事項
所有操作需在無菌條件下進行,以確保Y79細胞的純淨性。
定期檢查Y79細胞是否有汙染,如支原體(ti) 、細菌和真菌。
建議使用10代以內(nei) 的Y79細胞進行實驗,以確保細胞特性的穩定性。
Y79細胞自然聚集成團,不要人為(wei) 分散。
額外注意
細胞計數:盡管細胞計數對於(yu) 監控Y79細胞生長和確定傳(chuan) 代時機很有用,但由於(yu) Y79細胞成簇生長,進行準確計數可能較為(wei) 困難。
生長因子:標準培養(yang) 基配方已包含大多數Y79細胞所需的生長因子,因此通常不需要額外添加,除非特定實驗有需求。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11 (ICLC=HTL99029) |
11,12 (AddexBio=C0029001/4898; ATCC=HTB-18; CLS=300382; DepMap=ACH-001295; DSMZ=ACC-246; ECACC=86093003; JCRB=JCRB3020; RCB=RCB1645) | |
D7S820 | 8,9 |
D8S1179 | 13,16 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 13,14 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 30,32 |
FGA | 20,22 (ATCC=HTB-18; DepMap=ACH-001295; DSMZ=ACC-246) |
22 (CLS=300382) | |
Penta D | 12 |
Penta E | 13,18 |
TH01 | 6 (JCRB=JCRB3020) |
6,9.3 (AddexBio=C0029001/4898; ATCC=HTB-18; CLS=300382; DepMap=ACH-001295; ECACC=86093003; ICLC=HTL99029; RCB=RCB1645) | |
6,10 (DSMZ=ACC-246) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15,18 |