小鼠視網膜微血管內(nei) 皮細胞 （kaiyun网站安全）

小鼠視網膜微血管內(nei) 皮細胞（Mouse Retinal Microvascular Endothelial Cells）是從(cong) 小鼠的視網膜組織中分離出的內(nei) 皮細胞。小鼠視網膜微血管內(nei) 皮細胞在密度梯度離心法下製備而來，具有較高的純度（約90%以上）和特定標識物（如vWF、Factor VIII的陽性表達）。

視網膜微血管內皮細胞特性

• 視網膜是眼球壁內(nei) 層的一層透明薄膜，含有豐(feng) 富的血管和色素細胞。

• 視網膜血管分為(wei) 大血管層、中血管層和毛細血管層，血管內(nei) 皮細胞具有多種生理功能，包括血管調節、凝血、免疫等。

• 小鼠視網膜微血管內(nei) 皮細胞采用密度梯度離心法製備，具有高純度和特定標識物的陽性表達。

• 小鼠視網膜微血管內(nei) 皮細胞來源於(yu) 成年小鼠視網膜組織，具有調節血管張力、血壓以及抗血栓形成等重要功能。

小鼠視網膜微血管內皮細胞參數表

小鼠視網膜微血管內皮細胞培養

取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4小時，以穩定細胞狀態。

貼壁細胞消化

• 吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3分鍾。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 用吸管輕輕吹打混勻，按傳(chuan) 代比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的完全培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5% CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。

• 待細胞完全貼壁後，培養(yang) 觀察。之後按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yang) 基。

細胞收貨脫落

• 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5分鍾，保留沉澱。

• 添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉澱，放置於(yu) 37℃消化3分鍾（或4℃冰箱靜置5-7分鍾）。消化完向離心管內(nei) 加入5mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 經1000rpm，離心5分鍾，丟(diu) 棄上清，用5mL完全培養(yang) 基（補加1% FBS，促進貼壁）重懸沉澱，接種於(yu) 新的培養(yang) 瓶內(nei) 。

• 待細胞完全貼壁後，培養(yang) 觀察。之後按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yang) 基（37℃預熱）。

細胞實驗

• 因kaiyun网站安全貼壁特殊性，貼壁的kaiyun网站安全在消化後轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yang) 板、共聚焦培養(yang) 皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。

• 包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/mL），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。

• 懸浮/半懸浮細胞無需包被。