小鼠腎小球內(nei) 皮細胞（kaiyun网站安全）

原代小鼠腎小球內(nei) 皮細胞是從(cong) 小鼠腎組織中分離得到的。
腎小球是腎髒的功能單位，起著過濾血液、生成原尿的關(guan) 鍵作用。內(nei) 皮細胞作為(wei) 腎小球濾過膜的一部分，位於(yu) 腎小球毛細血管壁腔側(ce) ，與(yu) 血流直接接觸，具有重要的保護作用，可阻止大分子物質通過，並具有抗凝、抗血栓的功能。

小鼠腎小球內皮細胞相關特性

• 腎小球是腎髒的功能單位，用於(yu) 過濾血液生成原尿。其過濾膜包括內(nei) 層、中層和外層，內(nei) 層為(wei) 內(nei) 皮細胞層。

• 小鼠腎小球內(nei) 皮細胞是特殊微血管類型的細胞，位於(yu) 腎小球毛細血管壁腔側(ce) ，是腎小球濾過膜的第一道屏障，具有抗凝、抗血栓作用。

• 腎小球係膜是腎小球毛細血管袢之間的特殊間充質，由係膜細胞和係膜基質組成。係膜細胞具有活躍的功能，包括分泌細胞基質、產(chan) 生細胞因子、吞噬和清除大分子物質等。

小鼠腎小球內皮細胞參數表

小鼠腎小球內皮細胞培養操作步驟

細胞培養環境準備

• 使用75%酒精消毒T25細胞培養(yang) 瓶外表麵，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4小時，穩定細胞狀態。

貼壁細胞消化

• 吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次。

• 添加1mL 0.25%胰蛋白酶消化液至T25培養(yang) 瓶中，輕輕轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3分鍾。

• 倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 用吸管輕輕吹打混勻，按傳(chuan) 代比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的完全培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) 。

• 待細胞完全貼壁後，培養(yang) 觀察；之後按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yang) 基。

細胞收貨脫落

• 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5分鍾，保留沉澱。

• 添加0.5mL 0.25%胰蛋白酶消化液至離心管中，重懸沉澱，放置於(yu) 37℃消化3分鍾。

• 消化完畢後向離心管內(nei) 加入5mL完全培養(yang) 基終止消化。

• 經1000rpm，離心5分鍾，丟(diu) 棄上清，用5mL完全培養(yang) 基(補加1%FBS，促進貼壁)重懸沉澱，接種於(yu) 新的培養(yang) 瓶內(nei) 。

• 待細胞完全貼壁後，培養(yang) 觀察；之後按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yang) 基(37℃預熱)。

細胞實驗

• 若將貼壁的kaiyun网站安全轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yang) 板、共聚焦培養(yang) 皿等），需要對實驗器皿進行包被以增強細胞貼壁性。包被條件可選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）、PLL（0.1mg/ml）、明膠（0.1%）。

注意事項

• 培養(yang) 基於(yu) 4℃條件下可保存3-6個(ge) 月。

• 在細胞培養(yang) 過程中，請注意保持無菌操作。

• 傳(chuan) 代培養(yang) 過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會(hui) 影響細胞貼壁及其生長狀態。