TCMK-1細胞（小鼠腎小管上皮細胞）

TCMK-1細胞是一種小鼠腎小管上皮細胞係，源自C3H/Mai小鼠的腎小管組織，於(yu) 1963年建立。tcmk1細胞係通過SV40病毒轉化而成，具有較高的穩定性和生長能力。
TCMK-1細胞呈現上皮細胞樣，細胞形狀多為(wei) 多邊形或長條形，大小約為(wei) 15-30微米，胞質豐(feng) 富，核大而圓，核仁明顯。tcmk1細胞係以貼壁生長為(wei) 特征，生長迅速，傳(chuan) 代周期約為(wei) 24-48小時。
TCMK-1細胞的染色體(ti) 模態數為(wei) 78，範圍在64到157之間。所有細胞均顯示2-6條具有次級收縮的著絲(si) 粒染色體(ti) ，每個(ge) 細胞有1-4條雙臂染色體(ti) ，且60%的細胞有一條或多條微小染色體(ti) 。

TCMK-1細胞特性特征

• tcmk1細胞表達H-2k抗原
  

• 表達多種特異性標誌物，包括：Ksp-cadherin、AQP1, AQP2, AQP3, AQP4、NHE3、Na-K-ATPase；

• 約2%的細胞對SV40病毒抗原呈陽性，但病毒不可恢複
  

• tcmk1細胞對水皰性口炎病毒、格拉斯哥（印第安納州）、人脊髓灰質炎病毒1型敏感

• 經檢測，tcmk1細胞鼠痘病毒呈陰性

• tcmk1細胞在免疫抑製小鼠中不致瘤
  

TCMK-1細胞參數表

TCMK-1小鼠腎小管上皮細胞培養教程

TCMK-1細胞複蘇

• 將凍存管內(nei) 的1 mL TCMK-1細胞懸液在37℃水浴中快速解凍。

• 加入4 mL預熱的完全培養(yang) 基並輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心3分鍾，棄去上清。

• 用6-8 mL新鮮培養(yang) 基重懸TCMK-1細胞。

• 將TCMK-1細胞懸液轉移到含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。

• 培養(yang) 過夜後更換新鮮培養(yang) 基，並檢查細胞密度。

TCMK-1細胞傳代

• 當TCMK-1細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代：

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS洗滌TCMK-1細胞1-2次。

• 加入1-2mL 0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液，使其覆蓋所有TCMK-1細胞。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

• 在顯微鏡下觀察TCMK-1細胞，當大部分細胞變圓並脫落時，加入少量培養(yang) 基終止消化。

• 補加6-8 mL培養(yang) 基並輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清。

• 用新鮮培養(yang) 基重懸TCMK-1細胞。

• 按1:2至1:3的比例將TCMK-1細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

日常維護

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 定期觀察TCMK-1細胞形態和生長狀況。

• 保持培養(yang) 基pH在7.2-7.4之間。

TCMK-1細胞凍存

• 收集對數生長期的TCMK-1細胞。

• 製備凍存液（ 5% DMSO）。

• 調整TCMK-1細胞濃度至約5 x 10^5 cells/mL。

• 將TCMK-1細胞懸液分裝到凍存管中，每管1 mL。

• 使用程序降溫盒或細胞凍存容器，將TCMK-1細胞緩慢降溫至-80℃。

• 24小時後轉移到液氮中長期保存。

注意事項

• 操作過程中保持無菌條件。

• 避免TCMK-1細胞過度消化，以維持細胞活力。

• 定期檢測TCMK-1細胞是否有汙染。

• 建議使用低代次TCMK-1細胞進行實驗，以確保結果的可靠性。