Super Tube細胞（犬腎上皮細胞）

Super Tube細胞係是源自犬腎的上皮樣細胞株，最初從(cong) 表觀健康的成年雌性可卡犬的腎髒組織中分離，並通過從(cong) MDCK（Madin-Darby Canine Kidney）細胞株中克隆獲得。Super Tube細胞在培養(yang) 過程中表現出上皮樣形態，並且在高細胞密度條件下，能夠快速形成小管結構（如在24孔板中每孔接種7×10^5個(ge) 細胞，3天內(nei) 形成明顯的小管）。在培養(yang) 時，Super Tube細胞需要頻繁更換培養(yang) 基（每天兩(liang) 次），以提供充足的養(yang) 分來支持其小管的形成。Super Tube細胞常用於(yu) 研究腎髒功能、腎小管形成以及相關(guan) 疾病模型、在藥物篩選、細胞生物學研究等領域也有著廣泛應用。

Super Tube細胞特性特征

• cAMP水平：與(yu) 原始MDCK細胞株相比，Super Tube細胞的cAMP檢測水平顯著降低。
  

• 腺苷環化酶活性：在毛喉素刺激下，Super Tube細胞的腺苷環化酶活性低於(yu) MDCK和Super Dome細胞。

• 跨上皮電阻：Super Tube細胞跨上皮電阻也低於(yu) MDCK和Super Dome細胞係，表明其屏障功能相對較弱。

• 與(yu) MDCK和其他相關(guan) 細胞株相比，Super Tube細胞具有較低的腺苷環化酶活性，且在毛喉素刺激下cAMP水平升高較為(wei) 有限。

Super Tube細胞參數表

Super Tube細胞（犬腎上皮細胞）培養教程

傳代步驟

• 當細胞達到80%-90%匯合度時，進行傳(chuan) 代。
  

• 使用不含鈣、鎂的PBS緩衝(chong) 液清洗細胞1-2次，去除殘留的血清成分，以提高胰酶消化效率。
  

• 加入0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA混合液（2 ml），在37℃下消化1-2分鍾。
  

• 觀察細胞形態，待細胞變圓、輕微脫落時，立即終止消化。

• 加入6-8 ml含10% FBS的新鮮培養(yang) 基，終止消化，輕輕吹打混勻。

• 將細胞懸液收集到離心管中，以1000 RPM離心4分鍾，去除上清。
  

• 用1-2 ml新鮮培養(yang) 基重懸細胞。

• 以1:3至1:4的比例，將細胞分瓶接種到新的培養(yang) 瓶中。

凍存步驟

• 配製凍存液，成分包括：55%基礎培養(yang) 基、40%胎牛血清和5%二甲基亞(ya) 碸（DMSO），其中DMSO作為(wei) 細胞保護劑，防止冰晶形成。
  

• 將細胞重懸於(yu) 凍存液中，密度不低於(yu) 1×10^6 cells/ml。
  

• 每支凍存管加入1 ml細胞懸液，並做好標簽標識。

• 將凍存管放入程序降溫盒（如Mr. Frosty™），以每分鍾-1℃的速率降溫，置於(yu) -80℃冰箱中預凍至少2小時。

• 最後將凍存管轉入液氮罐中長期保存，確保細胞活性和穩定性。

注意事項

• 無菌操作：所有培養(yang) 和傳(chuan) 代操作應在無菌條件下進行，使用無菌移液器、培養(yang) 瓶和培養(yang) 基，防止細胞汙染。

• 細胞狀態監測：定期觀察細胞形態和生長狀態，若出現汙染或異常，應及時更換培養(yang) 基或重新複蘇細胞。

• 凍存細胞複蘇：從(cong) 液氮中取出的凍存管需迅速置於(yu) 37℃水浴中解凍，待細胞完全溶解後，立即加入10 ml新鮮培養(yang) 基，離心去除DMSO，再將細胞重新培養(yang) 。