DH82細胞（犬巨噬細胞、狗腎惡性組織細胞增生症細胞）

DH82細胞係來源於(yu) 一隻10歲雄性金毛尋回犬，犬隻被診斷為(wei) 惡性組織細胞增生症（Malignant Histiocytosis）。該細胞係表現出巨噬細胞樣形態，具有較強的吞噬能力，能夠吞噬乳膠顆粒，並在貼壁培養(yang) 狀態下生長。DH82細胞對Fcγ受體(ti) 呈陽性，但對Fcμ受體(ti) 和C3b受體(ti) 呈陰性，不產(chan) 生IL-1。作為(wei) 一種犬類巨噬細胞係，DH82細胞廣泛應用於(yu) 免疫學、腫瘤學及獸(shou) 醫學研究。它為(wei) 研究犬類免疫反應、細胞因子產(chan) 生、病原體(ti) 相互作用等方麵，尤其在理解惡性組織細胞增生症的生物學特性及腫瘤機製方麵具有重要價(jia) 值。此外，DH82細胞的研究對開發新的治療靶點和生物標誌物也有潛在意義(yi) ，尤其在獸(shou) 醫腫瘤學領域，為(wei) 診斷和治療提供了新的視角。

DH82細胞特性特征

• DH82細胞係具有巨噬細胞樣形態，能夠吞噬乳膠顆粒。
  

• 受體(ti) 表達：對Fcγ受體(ti) 呈陽性，表明其能夠結合免疫球蛋白G（IgG）；對Fcμ和C3b受體(ti) 呈陰性，顯示其對其他免疫成分的低親(qin) 和力。

• 細胞因子產(chan) 生：不產(chan) 生IL-1，這可能影響其在免疫反應中的角色。

• 研究表明DH82細胞在與(yu) 病原體(ti) （如Leishmania物種）相互作用時，其基因表達模式可能與(yu) 小鼠RAW264.7巨噬細胞不同。例如，在感染後，DH82細胞表現出不同的細胞因子反應譜，如誘導IL-12和IL-10等。

DH82犬巨噬細胞參數表

DH82犬巨噬細胞、狗腎惡性組織細胞增生症細胞培養教程

DH82細胞複蘇步驟

• 將凍存管快速放入37°C水浴中進行解凍，輕輕搖晃以確保細胞均勻解凍。

• 將解凍後的DH82細胞懸液轉移至含4-6 mL完全培養(yang) 基的離心管中，輕輕混合。

• 在1000 RPM下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 使用完全培養(yang) 基重懸DH82細胞，將細胞懸液轉移至含6-8 mL完全培養(yang) 基的T25培養(yang) 瓶中。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中，培養(yang) 過夜，並在第二天觀察DH82細胞的生長情況。

DH82細胞傳代步驟

• 當DH82細胞密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代操作：

• 棄去培養(yang) 上清液，用無鈣鎂PBS洗滌DH82細胞1-2次。

• 加入2 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），將DH82細胞置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察細胞是否大部分脫落。

• 細胞脫落後，輕敲培養(yang) 瓶，加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化反應。

• 輕輕混勻後，將DH82細胞懸液在1000 RPM下離心3-5分鍾，棄去上清液。

• 用新鮮完全培養(yang) 基補充至1-2 mL，輕輕吹勻。按1:2或1:3的比例分配至新的T25培養(yang) 瓶中，並添加6-8 mL完全培養(yang) 基。

DH82細胞凍存步驟

• 在凍存前，棄去細胞培養(yang) 基，並用PBS洗滌一次。

• 加入1 mL胰蛋白酶，待DH82細胞脫落後，加入1 mL含血清的培養(yang) 基終止消化。

• 在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液。

• 將DH82細胞重懸於(yu) 適量血清和DMSO（終濃度為(wei) 10%）中，確保每支凍存管中細胞密度不低於(yu) 1x10^6/mL，每支凍存管凍結1 mL細胞懸液，並進行標記。

• 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，在-80°C冰箱中保存至少2小時後，轉入液氮中長期保存。

注意事項

• 換液頻率：每周更換培養(yang) 基2-3次，以保持DH82細胞良好的生長環境。

• 傳(chuan) 代比例：根據DH82細胞的生長情況，推薦傳(chuan) 代比例為(wei) 1:2至1:4。