RAW264.7細胞【小鼠單核巨噬細胞白血病細胞】

RAW264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞是用Abelson鼠白血病病毒誘導的雄性小鼠腫瘤的巨噬細胞係。

RAW264.7細胞以其巨噬細胞的特征而著稱，表達H-2d抗原和溶菌酶，並具有吞噬抗原、釋放趨化因子以及參與(yu) 免疫反應的能力。RAW264.7細胞易於(yu) 培養(yang) 和傳(chuan) 代，對RNA幹擾敏感、DNA轉染效率高。

RAW264.7細胞表達同向性和多向性MuLV，且對病毒複製呈陽性反應。RAW264.7細胞係能夠吞噬乳膠顆粒和酵母聚糖，以及以抗體(ti) 依賴性方式分解綿羊紅血球和腫瘤靶細胞。雖然LPS或PPD處理可誘導其分解紅血球，但對腫瘤靶細胞無影響。且RAW264.7細胞係對表麵免疫球蛋白（sIg-）、Ia（Ia-）和Thy-1.2（Thy-1.2）呈陰性

RAW264.7細胞株具有易分化、不宜用胰酶消化的特點。

RAW264.7細胞特征如下

• RAW264.7是從(cong) 用Abelson鼠白血病病毒誘導的雄性小鼠的腫瘤中建立的巨噬細胞係。

• 抗原表達：H-2d

• 基因表達：溶菌酶；H-2d；天花病毒（鼠痘）陰性

• 表達式標記：補體(ti) （C3）

• RAW264.7細胞易於(yu) 繁殖，DNA轉染效率高，對RNA幹擾敏感，並支持小鼠諾如病毒的複製。

• RAW264.7細胞係對表麵免疫球蛋白（sIg-）、Ia（Ia-）和Thy-1.2（Thy-1.2）呈陰性。

• 在建立RAW264.7細胞係時，不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC菌斑形成試驗呈陰性。

• 根據研究，RAW264.7細胞係表達同向性和多向性MuLV，並使用XC菌斑分析法對病毒複製呈陽性。

• RAW264.7細胞可以吞噬乳膠顆粒與(yu) 酵母聚糖，並且可以抗體(ti) 依賴性地分解綿羊紅血球與(yu) 腫瘤靶細胞。

• LPS或PPD處理2天可誘導RAW264.7細胞分解紅血球，但對腫瘤靶細胞無作用。

• RAW264.7細胞株來源於(yu) Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤，具有相似的特性。

RAW264.7細胞參數表

RAW264.7細胞培養條件

• 培養(yang) 基：DMEM-HD + 10% FBS

• CO2濃度：5%

• 溫度：37.0°C

• 培養(yang) 器皿：推薦使用培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶

RAW264.7細胞傳代技巧

• 棄去培養(yang) 液上清：在傳(chuan) 代過程中，首先將培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液棄去，並用PBS（磷酸鹽緩衝(chong) 鹽水）潤洗細胞，以保持培養(yang) 環境的潔淨。

• 加入胰酶消化液：為(wei) 了將細胞從(cong) 培養(yang) 器皿中剝離，需要加入含有胰酶的消化液，然後將培養(yang) 器皿置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中進行1-2分鍾的消化。

• 加入含有10%血清的完全培養(yang) 基：在消化結束後，加入含有10%血清的完全培養(yang) 基終止消化，防止胰酶繼續對細胞產(chan) 生影響，並為(wei) 細胞提供足夠的營養(yang) 。

• 吹打細胞並重懸：用吸管輕輕吹打培養(yang) 皿或培養(yang) 瓶，以將細胞徹底分散，然後將細胞收集並重懸，以確保細胞的均勻分布。

• 控製傳(chuan) 代比例和時間：在傳(chuan) 代過程中，需要控製好傳(chuan) 代比例和時間，避免過度傳(chuan) 代導致細胞的異常增殖和功能失調。

RAW264.7細胞常見問題及解決方案

• 細胞形態發生變異：改善培養(yang) 環境，使用高質量的培養(yang) 基和培養(yang) 器皿，有助於(yu) 減少細胞形態的變異。

• 細胞生長速度緩慢：定期傳(chuan) 代，控製傳(chuan) 代比例和時間，及時檢測支原體(ti) 汙染，以促進細胞的正常生長。

• 存在少量分化細胞：采用刮取的方式進行傳(chuan) 代，控製細胞的匯合程度，避免分化細胞的擴散和影響。

• 對胰酶敏感：不建議使用胰酶進行傳(chuan) 代，推薦使用刮取的方法，以避免細胞受到胰酶的刺激和分化。