
HKb20細胞(人腎上皮細胞)
- 來源:腎髒
- 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+800μg/ml G418+1% P/S
- 其他:HKb20細胞表達BtR175b(Cry 1Aa receptor)
HKb20人腎上皮細胞係由日本科學家杉本健司於(yu) 2002年從(cong) 正常人類腎髒上皮組織中提取並轉化而成。hkb20細胞經過轉化處理,具備了穩定的生長特性,適合在實驗室中進行長期培養(yang) 。
HKb20細胞呈現典型的上皮細胞形態,具有貼壁生長的特征,能夠較好地模擬腎小管上皮細胞的生理功能。hkb20細胞係廣泛應用於(yu) 生物醫學研究,特別是在藥物篩選和腎髒疾病模型的構建中,因其可以有效反映腎髒上皮細胞的生理狀態,成為(wei) 研究腎髒疾病的理想工具。
HKb20細胞參數表
細胞名稱 | HKb20細胞(人腎上皮細胞) |
別稱 | 人腎上皮細胞 |
種屬來源 | 人類 |
組織來源 | 腎髒 |
細胞類型 | 轉化細胞係 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 |
背景描述 | HEK293細胞的亞型,表達BtR175b(Cry 1Aa receptor) |
支原體檢測 | 陰性 |
細胞規格 | 1x10^6 cells/T25或1mL凍存管 |
培養基 | DMEM (89%) + FBS (10%) + PS + G-418 (800 μg/ml) |
培養條件 | 溫度:37℃;氣相:95%空氣 + 5% CO₂ |
換液頻次 | 每2-3天更換一次 |
傳代比例 | 初次傳代建議1:2,通常為1:3至1:4 |
凍存液 | 55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO |
凍存條件 | 液氮儲存 |
凍存細胞密度 | 5x10^6至1x10^7 cells/mL |
收貨處理 | 收到後用75%酒精消毒瓶壁,靜置2-4小時以穩定狀態 |
生物安全等級 | BSL-2 |
使用限製 | 僅限於科學研究,不可用於醫療產品 |
培養教程
HKb20人腎上皮細胞培養教程
細胞複蘇步驟
從(cong) 液氮中取出HKb20細胞凍存管後,立即放入37℃水浴中解凍,解凍過程應在1至2分鍾內(nei) 完成。解凍後,將HKb20細胞懸液轉移至含有5mL新鮮培養(yang) 基的離心管中,輕輕混勻。
以1000 RPM的速度離心5分鍾,棄去上清液。然後加入1-2mL新鮮培養(yang) 基,輕輕吹打均勻,之後將HKb20細胞懸液接種於(yu) 6cm培養(yang) 皿或T25培養(yang) 瓶中,並加入約6mL培養(yang) 基,放入培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
細胞傳代步驟
當HKb20細胞覆蓋培養(yang) 瓶80%-90%時,進行傳(chuan) 代操作。通常HKb20細胞的傳(chuan) 代比例為(wei) 1:3至1:4,初次傳(chuan) 代時建議按1:2的比例進行。
先棄去舊培養(yang) 基,用無鈣鎂的PBS輕輕衝(chong) 洗HKb20細胞1-2次,然後加入0.25%胰蛋白酶(含EDTA)消化細胞,消化時間約為(wei) 2-3分鍾。當大部分細胞變圓並脫落時,迅速加入完全培養(yang) 基終止消化。
胰酶消化後的HKb20細胞懸液以1000 RPM離心5分鍾,棄去上清液,補加新鮮培養(yang) 基後按比例接種到新的培養(yang) 瓶中。
細胞凍存步驟
HKb20細胞在生長狀態良好時可以進行凍存操作。通常在細胞達到適合的密度或傳(chuan) 代狀態時,收集用於(yu) 凍存。
用少量胰酶消化HKb20細胞,輕輕吹打使其脫落。隨後,將細胞懸液離心(1000 RPM,5分鍾),棄去上清液後用凍存液(90% FBS + 10% DMSO)重懸HKb20細胞。按照5x10^6至1x10^7 cells/mL的密度,將細胞分裝入凍存管中,逐步降溫至液氮溫度進行長期保存。
相關資料
- 探究HK-2細胞形態異常的原因及調整策略
- 問:我在培養HK2人腎皮質細胞時,為什麽會出現空泡?答:出現空泡可能有兩種情況。如果細胞的...
- 查看完整內容 >
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D5S818 | 8,9 |
D7S820 | 11 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 11 |
vWA | 16,19 |
參考文獻
上一篇:G401細胞(人腎癌細胞)