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Plat-e細胞係(人逆轉錄病毒包裝細胞係)貨號:STM-CL-5584 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

Plat-e細胞係(人逆轉錄病毒包裝細胞係)

  • 來源:
  • 細胞特征:貼壁細胞 ,上皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:90%DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:Plat-e細胞隻能容易地感染小鼠或大鼠細胞注:鉑逆轉錄病毒包裝細胞。
Tags: 逆轉錄病毒細胞    
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價(jia) 格:¥ 2,300.00
提供STR鑒定報告

Plat-E細胞係是一種由HEK-293T細胞改良而來的高效人源逆轉錄病毒包裝細胞,廣泛應用於(yu) 基因治療和病毒載體(ti) 的生產(chan) 。Plat-E細胞係具備高度穩定性和瞬時轉染的高效性,能夠產(chan) 生10^6至10^7感染單位/毫升的逆轉錄病毒,並且在藥物選擇的條件下可持續生產(chan) 病毒長達4個(ge) 月。

Plat-E細胞源自人胚腎細胞(HEK,Human Embryonic Kidney),具體(ti) 為(wei) 293T細胞的改造版本,293T細胞具有優(you) 良的生長特性和轉染效率,因而被廣泛用於(yu) 生物醫學研究。Plat-E細胞係優(you) 化的包裝載體(ti) 確保了病毒結構蛋白的高效表達,使其成為(wei) 基因治療和相關(guan) 研究中的理想選擇。

Plat-e細胞係特性特征

  • 平均滴度:可達到106-107感染單位/毫升。

  • 穩定性:Plat-E細胞在藥物選擇存在下,能夠持續產(chan) 生親(qin) 生態逆轉錄病毒,最長可達4個(ge) 月。

  • 病毒結構蛋白:Plat-E細胞係通過表達MMLV(Moloney Murine Leukemia Virus)Gag和Pol蛋白,確保病毒顆粒的有效包裝。

  • 包膜蛋白:Plat-E細胞係產(chan) 生的病毒隻能感染小鼠或大鼠細胞,因其表達單嗜性的包膜蛋白。

  • 基因表達:Plat-E細胞係中插入了gag、pol和env基因,這些基因通過內(nei) 部核糖體(ti) 進入位點(IRES)序列連接,以提高表達效率。

  • 兼容性:Plat-E細胞與(yu) 多種基於(yu) MMLV的表達載體(ti) (如pBABE和pMX)兼容,適合多種實驗設計。

  • Plat-E細胞係廣泛應用於(yu) :逆轉錄病毒的快速生成和穩定生產(chan) 、基因功能研究和基因治療相關(guan) 實驗

Plat-e細胞係參數表

細胞名稱Plat-E逆轉錄病毒包裝細胞係
別稱Plat-E;Platinum-E
來源人胚腎細胞(HEK293T)
組織來源胚胎,腎髒
細胞形態上皮細胞樣
生長特性貼壁生長
生物安全等級BSL-1
支原體檢測暫無數據
培養基DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S
培養條件氣相:95%空氣,5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率每2-3天
傳代周期每2-4天
傳代比例1:3至1:15
凍存液配方70%基礎培養基 + 20% FBS + 10% DMSO
凍存條件無血清凍存液,液氮儲存
平均滴度1 × 10^7感染單位/毫升
穩定性在藥物選擇下可持續生產4個月
表達特征表達MMLV-Gag-Pol和親嗜性包膜蛋白
兼容性與基於MMLV的表達載體(如pBABE和pMX)兼容
感染特性僅能感染小鼠或大鼠細胞
應用領域基因治療、病毒載體生產

培養教程

Plat-e人逆轉錄病毒包裝細胞係培養教程

細胞複蘇

  • 從(cong) 液氮中取出凍存的Plate細胞,將凍存管迅速放入37℃水浴中,保持凍存管上部不接觸水麵,輕輕搖晃,約1-2分鍾解凍。解凍後迅速轉移到無菌環境下,加入4 mL預熱至37℃的完全培養(yang) 基(DMEM + 10% FBS + 1% P/S),輕輕混勻。

  • 將Plate細胞懸液轉移至離心管中,以1000 rpm離心3分鍾,棄去上清液。

  • 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基輕輕吹打懸浮Plate細胞。隨後,將細胞懸液轉移至含有預熱培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,並置於(yu) 37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

  • Plate細胞貼壁後,第二天觀察細胞狀態,及時更換新鮮培養(yang) 基。

細胞傳代

  • 準備傳(chuan) 代:當Plate細胞達到80%-90%匯合度時,棄去培養(yang) 上清液,並用無鈣鎂離子的PBS衝(chong) 洗細胞1-2次。

  • 加入1 mL胰酶消化液(0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA),覆蓋細胞表麵,隨後迅速棄去多餘(yu) 消化液。將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化1分鍾。

  • 通過顯微鏡觀察Plate細胞形態,當細胞大部分變圓並開始脫落時,輕輕敲擊培養(yang) 瓶幫助細胞脫離瓶壁。加入少量預熱的完全培養(yang) 基終止消化。

  • 將Plate細胞懸液轉移至離心管中,1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液。加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基輕輕混勻。

  • 將Plate細胞懸液按照1:2的比例分到新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,加入8 mL新鮮培養(yang) 基,繼續培養(yang) 。

細胞凍存

  • 選擇健康生長的Plate細胞,棄去培養(yang) 基,使用PBS衝(chong) 洗一次。將Plate細胞收集後,1000 rpm離心4分鍾,棄去上清液。

  • 用無血清凍存液將Plate細胞重懸,並調整細胞密度至5×10^6至1×10^7/mL。輕輕混勻細胞懸液,每支凍存管中加入1 mL細胞懸液,標記清楚。

  • 將裝有Plate細胞的凍存管放入程序降溫盒中,置於(yu) -80℃冷凍24小時後,轉入液氮中長期保存。

注意事項

  • 收到Plate細胞後,首先檢查細胞瓶是否完好,培養(yang) 基是否出現漏液或混濁現象,若發現問題,請及時聯係供應商。

  • 在轉移Plate細胞至無菌環境前,使用75%酒精消毒細胞瓶表麵,並在顯微鏡下檢查細胞狀態。若有異常情況,請做好記錄並與(yu) 技術支持聯係。

  • 收到的Plate細胞運輸培養(yang) 基僅(jin) 用於(yu) 運輸,不適合細胞長期培養(yang) 。請用新鮮配製的完全培養(yang) 基進行培養(yang) 。

  • 傳(chuan) 代時應根據Plate細胞的密度及瓶皿大小選擇合適的比例。例如,1:2的傳(chuan) 代是將一個(ge) T25培養(yang) 瓶的細胞傳(chuan) 至兩(liang) 個(ge) T25瓶或兩(liang) 個(ge) 6 cm皿中。

  • Plate細胞僅(jin) 限於(yu) 科研用途,禁止用於(yu) 臨(lin) 床診斷或治療。

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