
RM-1細胞(小鼠前列腺癌細胞)
- 來源:前列腺癌
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:癌症基因:ras;myc
RM-1小鼠前列腺癌細胞係是一種具有成纖維細胞樣形態的細胞模型,源自17日齡的C57BL/6小鼠。RM-1細胞係的建立是通過用Zipras/myc9逆轉錄病毒感染泌尿生殖竇細胞,然後將這些感染後的細胞移植到同源成年雄性小鼠的腎包膜下進行培養(yang) 。
RM-1細胞特性特征
RM-1細胞係中表達的癌症基因包括ras和myc。
RM-1細胞係通常在3-5代內(nei) 傳(chuan) 代,保持較低的傳(chuan) 代次數以確保細胞活性和質量。
RM-1細胞經過嚴(yan) 格的無菌和無支原體(ti) 檢測,複蘇活力通常超過90%,確保實驗的可靠性。
RM-1細胞係廣泛用於(yu) 前列腺癌的基礎研究、藥物篩選以及3D細胞培養(yang) 實驗
RM-1細胞參數表
細胞名稱 | RM-1細胞(小鼠前列腺癌細胞) |
別稱 | RM1 |
細胞來源 | 17日齡C57BL/6小鼠泌尿生殖竇細胞 |
感染病毒 | Zipras/myc9逆轉錄病毒 |
移植部位 | 同基因成年雄性小鼠的腎包膜下 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣,貼壁生長 |
細胞類型 | 上皮細胞樣 |
培養基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1%青黴素-鏈黴素 |
培養條件 | 溫度:37℃,氣相:95%空氣,5%二氧化碳,濕度:70%-80% |
傳代比例 | 1:2 - 1:3 |
傳代頻率 | 每周換液2-3次 |
凍存液 | 90%胎牛血清 + 10% DMSO |
運輸條件 | T25瓶常溫運輸或幹冰運輸 |
質量控製 | 嚴格的無菌和無支原體檢測,複蘇活力>90% |
基因特征 | 表達癌症基因ras和myc |
應用領域 | 前列腺癌機製研究、藥物篩選、3D細胞培養 |
細胞狀態檢測 | 通過細菌、真菌、支原體、內毒素檢測 |
細胞複蘇活力 | 複蘇存活率>90% |
運輸注意事項 | 收到細胞後需消毒,觀察細胞狀態 |
用途限製 | 僅供科研使用,不適用於人類或臨床診斷 |
培養教程
RM-1細胞培養教程
RM1細胞的複蘇步驟
將含有1 mL RM1細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中,迅速且持續搖晃,直到RM1細胞完全解凍。
將解凍後的RM1細胞懸液轉移至離心管中,加入4 mL預溫的RPMI-1640培養(yang) 基,混勻後在800-1000 RPM下離心4-5分鍾,棄去上清液。
加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基,將RM1細胞輕輕吹打混勻。
將重懸後的RM1細胞轉移至T25培養(yang) 瓶,補充培養(yang) 基至6 mL,放入培養(yang) 箱中培養(yang) ,確保37℃、5% CO₂的環境。
RM1細胞的傳代步驟
當RM1細胞生長至80%匯合時,進行傳(chuan) 代操作。
吸除舊培養(yang) 基,加入3-4 mL常溫PBS潤洗RM1細胞10-20秒,吸走PBS。
加入1 mL胰蛋白酶,輕輕晃動培養(yang) 瓶使酶液均勻覆蓋RM1細胞層,將培養(yang) 瓶放入37℃培養(yang) 箱中消化。觀察到RM1細胞間隙增大但未完全脫落時,立即加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化。
將消化後的RM1細胞懸液混勻後,在900 RPM下離心3-5分鍾,棄去上清液。再加入新鮮的培養(yang) 基重懸RM1細胞。
將重懸的RM1細胞均勻分配至新的培養(yang) 瓶中,補足完全培養(yang) 基,放回培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
RM1細胞的凍存步驟
選擇生長狀態良好的RM1細胞進行凍存。
按照傳(chuan) 代步驟進行RM1細胞的收集,離心後棄去上清液。
用預先配製的凍存液重懸RM1細胞,確保RM1細胞濃度達到1-5 × 10^6/mL。
將RM1細胞懸液分裝至凍存管中,並進行標記。
將RM1細胞凍存管置於(yu) -80℃冰箱中過夜保存,然後轉移至液氮中進行長期保存。
注意事項
消化時間控製:不同品牌的胰蛋白酶消化時間可能不同,需根據具體(ti) 情況進行調整。
RM1細胞狀態觀察:避免在觀察RM1細胞狀態時產(chan) 生氣泡,以免影響細胞的健康狀況。
RM1細胞運輸條件:RM1細胞運輸時可選擇常溫或幹冰運輸,收到後應立即進行處理,確保細胞活性。
相關資料
STR鑒定及相關
參考文獻
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