
lncap細胞(人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC)
- 來源:前列腺;左鎖骨淋巴結癌轉移灶
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:可誘導EMT,存在具有更強遷移能力的S/P細胞亞(ya) 群
LNCaP clone FGC是一種源自人前列腺癌的上皮樣細胞係,於(yu) 1977年從(cong) 一名50歲白人男性(血型B+;確診為(wei) 轉移性前列腺癌)的左鎖骨上淋巴結的針吸活檢中分離。LNCaP clone FGC細胞廣泛應用於(yu) 癌症研究。
lncap細胞係屬於(yu) 異四倍體(ti) 細胞係,具有複雜的染色體(ti) 組成。其模態染色體(ti) 數為(wei) 84,在22%的細胞中出現。染色體(ti) 數目為(wei) 86(20%)和87(18%)的細胞也較為(wei) 常見,高倍性細胞的比例為(wei) 6.0%。LNCaP clone FGC細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 表現出致瘤性。
lncap細胞獨特的生物學特性:
基因表達:雄激素受體(ti) (AR)和前列腺特異性抗原(PSA)。
雄激素敏感性:對5α-二氫睾酮(DHT)有響應。
酸性磷酸酶:表達人前列腺酸性磷酸酶。
致瘤性:在體(ti) 外和體(ti) 內(nei) (裸鼠)均具有致瘤性。
遺傳(chuan) 特征:染色體(ti) 數目:46-91,眾(zhong) 數為(wei) 76-91、染色體(ti) 異常:多種染色體(ti) 異常,包括缺失和易位。
LNCaP clone FGC細胞是致瘤的,這些細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) 具有致瘤性
LNCaP細胞可能具有EMT特性,這與(yu) 癌症轉移和侵襲能力相關(guan)
lncap細胞參數表
細胞名稱 | lncap細胞(人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC) |
別稱 | LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC |
來源信息 | 50歲白人男性,B+血型,左鎖骨淋巴結轉移性前列腺癌 |
建立信息 | 1977年由J.S. Horoszewicz等人建立 |
基本特征 | 人源上皮樣腫瘤細胞,BSL-1級別 |
生長特性 | 貼壁生長,形成集落,輕微吸附,不形成完全匯合 |
生長參數 | 倍增時間約32-36小時,快速酸化培養基 |
遺傳特征 | 染色體數46-91,眾數76-91 |
培養基和添加物 | RPMI 1640 + 10% FBS + 2 mM L-穀氨酰胺 + 抗生素(可選) |
培養環境 | 37°C, 5% CO2 |
培養容器 | Corning cellbind細胞培養瓶或多聚-L-賴氨酸包被的培養皿 |
傳代和換液 | 比例1:3至1:4,每周換液2-3次,傳代後48小時內不擾動 |
受體表達 | 雄激素受體(AR)+, 雌激素受體(ER)+ |
特異性標記 | 前列腺特異性抗原(PSA)+, 人前列腺酸性磷酸酶+, 前列腺特異性膜抗原(PSMA)+ |
基因狀態 | p53野生型, PTEN缺失 |
激素反應 | 對5α-二氫睾酮(DHT)敏感,初始雄激素依賴可發展為非依賴 |
腫瘤特性 | 中等轉移潛能,相對較低侵襲能力,軟瓊脂和裸鼠中具致瘤性 |
特殊性質 | 可誘導EMT,存在具有更強遷移能力的S/P細胞亞群 |
凍存方法 | 55%基礎培養基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮氣相保存 |
複蘇後存活率 | 約70-80% |
汙染檢測 | 細菌、真菌、支原體均為陰性 |
鑒定 | 人源確認,STR分型應與ATCC參考譜一致 |
主要用途 | 前列腺癌研究,藥物篩選,雄激素信號通路研究,EMT研究 |
細胞庫編號 | ATCC: CRL-1740; ECACC: 89110211; BCRJ: 0149; BCRC: 60088 |
培養教程
LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞培養教程
細胞接種和傳代
接收細胞處理:
使用75%酒精消毒培養(yang) 瓶表麵。
放入37°C培養(yang) 箱靜置2-4小時。
接種密度:
T25瓶中加入10-12ml完全培養(yang) 基,10cm皿中加12-15ml。
傳(chuan) 代比例:
首次傳(chuan) 代建議1:2,之後推薦1:3-1:4。
細胞密度達到70-80%時進行傳(chuan) 代,避免過度生長。
傳(chuan) 代步驟:a. 棄舊培養(yang) 基,PBS洗滌1-2次。 b. 加入預熱的胰酶,37°C消化。 c. 每30秒輕柔吹打檢查細胞是否脫落,避免過度消化。 d. 細胞脫落後,加入等體(ti) 積培養(yang) 基終止消化。 e. 1000rpm離心5分鍾,棄上清。 f. 加入新鮮培養(yang) 基重懸細胞,按傳(chuan) 代比例接種。
細胞凍存:
凍存液配方: 55%基礎培養(yang) 基 + 40% FBS + 5% DMSO。
凍存步驟:a. 常規消化收集細胞。 b. 加入預冷的凍存液重懸細胞。 c. 轉移至凍存管,放入-80°C冰箱過夜,次日轉入液氮長期保存。
常見問題與注意事項
細胞聚集問題:
在傳(chuan) 代時使用滴管反複輕柔吹打來分散細胞集落。
使用CellBIND細胞培養(yang) 瓶或多聚-L-賴氨酸溶液包被過的培養(yang) 皿,有助於(yu) 減少細胞聚集。
培養(yang) 基pH控製:
每周換液2-3次,密切觀察培養(yang) 基顏色變化。
細胞密度達到70%以上時,培養(yang) 基消耗較快,需更頻繁地觀察並換液。
細胞生長特性:
LNCaP細胞生長緩慢,形成集落而非單層,傳(chuan) 代時應注意避免過度生長。
避免劇烈震蕩和低溫刺激,以維持細胞的健康狀態。
常見問答
- 我應該多久傳代LNCaP clone FGC一次?
- LNCaPclone FGC的傳代 培養應在細胞達到60-70%匯合時進行。培養物通常可以按1:3的比例傳代,大約每4-5天傳代一次。
- LNCaPcloneFGC的形態是什麽?
- LNCaPcloneFGC細胞形成弱貼壁的單層。培養物需要溫和的處理,因為輕敲、搖晃或移液很容易使細胞移位。細胞不會產生整齊的單層,但傾向於聚集生長,在製備亞培養物時,應通過反複移液將其分離。解離細胞的再附著是緩慢的,並且在48小時內隻有約70%的來自原始接種物的細胞粘附到生長表麵。因此,將新接種的燒瓶靜置48小時。
- LNCaPcloneFGC細胞的生長速率是多少?
- LNCaPcloneFGC是特別難以評估生長速率的細胞係。這是由於貼壁性較弱的單層和聚集的趨勢。這也是由於不同密度下不同的生長速率造成的。一般來說,LNCaPcloneFGC細胞生長相當緩慢。細胞計數表明,一個群體需要1到3天才能翻倍。
- LNCaPcloneFGC細胞的正常生長和形態是什麽?
- LNCaPcloneFGC細胞生長非常緩慢。這些細胞隻輕微地貼壁在基質上,可能不會融合,但它們可以迅速酸化培養基的pH值。懸浮細胞通常仍然存活,並且當培養物從冷凍保存中完全恢複時可能貼壁。在恢複的第一周,不要丟棄任何懸浮的細胞。應通過溫和離心(125 x g,10分鍾)將其保留,並將其添加回貼壁群體中。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 16 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9.1,10.3 (AddexBio=C0019003/4953; ATCC=CRL-1740; CCRID; TKG=TKG 0603) |
11 (Cosmic-CLP=907788) | |
9 (RCB=RCB2144) | |
9,11 (ECACC=89110211; KCLB=21740) | |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 11,12 |
D19S433 | 13.2,15 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 19,20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17,18 (RCB=RCB2144) |
16,18 (AddexBio=C0019003/4953; ATCC=CRL-1740; CCRID; Cosmic-CLP=907788; ECACC=89110211; KCLB=21740; TKG=TKG 0603) |
