
NCI-H660細胞係(人神經內(nei) 分泌前列腺癌細胞)
- 來源:前列腺
- 細胞特征:聚團懸浮,疏鬆貼壁,上皮樣
- 培養(yang) 基:RPMI 1640+10%FBS+10nM Hydrocortisone+10nM β-estradiol+2nM L-Glutamine+0.5%ITS-G+1%P/S
- 其他:NCI-H660細胞表達左旋多巴羧化酶和具有蛙皮素樣免疫反應性
NCI-H660細胞是從(cong) 一名63歲高加索地區(白人)男性前列腺癌患者的淋巴結轉移灶中分離,是一種人神經內(nei) 分泌前列腺癌細胞係。
NCI-H660細胞呈上皮細胞樣形態,懸浮方式生長,但也有少量細胞會(hui) 貼附生長。NCI-H660細胞通常使用10代以內(nei) 的細胞進行實驗。
NCI-H660細胞係特性特征
NCI-H660細胞外觀類似小細胞癌
NCI-H660細胞表達升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素樣免疫反應性
NCI-H660細胞表達功能性心鈉素(ANP)受體(ti) ,但添加ANP不影響細胞生長模式
NCI-H660細胞係參數表
細胞名稱 | NCI-H660細胞係(人神經內分泌前列腺癌細胞) |
細胞別稱 | NCI-H660;NCIH660;H660;人神經內分泌前列腺癌細胞 |
種屬組織來源 | 人(Homo sapiens);前列腺癌淋巴結轉移 |
細胞類型 | 神經內分泌前列腺癌小細胞 |
患者信息 | 63歲高加索地區(白人)男性 |
ATCC編號 | CRL-5813 |
形態特征 | 上皮細胞樣;主要懸浮生長,少量貼附 |
基礎培養基/血清 | RPMI-1640;5% FBS |
添加劑 | 0.005 mg/ml 胰島素、轉鐵蛋白、30nM 亞硒酸鈉、10 nM 氫化可的鬆、10 nM beta-雌二醇、2mM L-穀氨酰胺、1%雙抗 |
培養環境 | 37℃;95%空氣 + 5%二氧化碳 |
傳代條件 | 密度80%-90%;首次傳代比例1:2;推薦使用10代以內 |
凍存條件 | 無血清凍存液;液氮儲存 |
受體表達 | 表達功能性心鈉素(ANP)受體;雄激素受體(AR)可能低表達或缺失(待驗證) |
癌症標誌物 | 表達升高的左旋多巴羧化酶和蛙皮素樣免疫反應性;可能表達嗜鉻粒蛋白A (CgA)和突觸素 (SYN)(待驗證) |
其他標誌物 | 前列腺特異性抗原(PSA)表達未知;可能表達ASCL1或NEUROD1(待驗證) |
基因改變/擴增 | 可能存在TP53、RB1、PTEN突變或缺失;MYCN、AURKA可能擴增(待驗證) |
質量控製 | 應進行支原體檢測和STR鑒定 |
運輸方式 | 複蘇發貨(T25瓶)或凍存發貨(需幹冰) |
供應限製 | 僅限科學研究,不可用於治療 |
生物安全等級 | 未明確說明(通常為BSL-2) |
主要研究方向 | 前列腺癌(特別是神經內分泌型)、小細胞癌、癌症生物學、藥物篩選和開發、轉移機製研究 |
細胞特性 | 培養代次建議20代以內,貼壁效率>90% |
腫瘤相關特性 | 遷移能力低,侵襲能力中等,在免疫缺陷小鼠中可形成腫瘤 |
轉染和藥物反應 | 轉染效率中等(40-60%),對米托坦(Mitotane)敏感 |
細胞周期分布 | G0/G1: 60-70%, S: 15-20%, G2/M: 10-15% |
其他特征 | 基礎凋亡率<5%,高糖酵解率 |
培養教程
NCI-H660人神經內分泌前列腺癌細胞係培養教程
NCI-H660細胞複蘇
a. 將含1 mL NCI-H660細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍。
b. 加入4 mL預熱的培養(yang) 基混合均勻。
c. 1000 rpm離心3分鍾,棄去上清液。
d. 加入1-2 mL培養(yang) 基重懸細胞。
e. 將NCI-H660細胞懸液轉移到含適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶或10 cm培養(yang) 皿中(約8 mL培養(yang) 基)。 f. 培養(yang) 過夜,第二天換液並檢查細胞密度。
NCI-H660細胞傳代:
a. 當NCI-H660細胞密度達到80%-90%時進行傳(chuan) 代。
b. 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
c. 加入適量胰酶消化液,37℃消化2-3分鍾。
d. 顯微鏡下觀察細胞變圓並開始脫落。
e. 加入含血清的培養(yang) 基終止消化。
f. 吹打NCI-H660細胞,製成單細胞懸液。
g. 按1:2的比例進行傳(chuan) 代(例如,1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或2個(ge) 6cm皿)。
注意事項與NCI-H660細胞質量控製:
使用產(chan) 品時應注意無菌操作,避免汙染。
本產(chan) 品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外添加。
首次傳(chuan) 代建議1:2傳(chuan) 代。
NCI-H660細胞主要呈懸浮生長,少量細胞會(hui) 貼附。
培養(yang) 過程中要定期觀察NCI-H660細胞狀態,確保細胞健康。
推薦使用10代以內(nei) 的NCI-H660細胞。
定期進行支原體(ti) 檢測和STR鑒定,以確保NCI-H660細胞係的真實性和純度。
NCI-H660細胞凍存:
使用無血清凍存液。
將NCI-H660細胞懸液分裝到凍存管中。
緩慢降溫後轉入液氮中長期保存。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 18,24 |
D3S1358 | 14,18 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 9,10 |
D13S317 | 8 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,31 |
FGA | 23,24 |
Penta D | 9,12 |
Penta E | 12 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |