C4-2B細胞（人前列腺癌細胞） （暫不提供）

C4-2B細胞係是一種源自1993年從(cong) 人前列腺癌細胞係LNCaP衍生的C4-2細胞的骨轉移亞(ya) 係，具有上皮樣形態。

LNCaP細胞最初從(cong) 一位患有前列腺癌的白人男性的前列腺組織中分離。C4-2細胞是通過將LNCaP細胞與(yu) 骨肉瘤衍生的人成纖維細胞共同接種到無胸腺的雄性裸鼠體(ti) 內(nei) ，經去勢處理後，分離並培養(yang) 出的一種前列腺上皮細胞。C4-2B細胞則進一步源自C4-2細胞，是從(cong) 一名50歲前列腺癌患者的左鎖骨上淋巴結轉移灶中分離，專(zhuan) 門用於(yu) 研究前列腺癌，尤其是其骨轉移的相關(guan) 機製。

C4-2B細胞特性特征

• c42b細胞本身偏嗜酸性，培養(yang) 基消耗較快

• c42b細胞在裸鼠中具有致瘤性

• 表達前列腺特異性抗原(PSA)和前列腺酸性磷酸酶(PAP)等前列腺特異性標記物
  

• 表達雄激素受體(ti) (AR)，對雄激素有反應

• 缺失PTEN基因，表達高水平的p-Akt

• 高表達EGFR和HER2/ne

C4-2B細胞參數表

C4-2B人前列腺癌細胞培養教程

C4-2B細胞複蘇

• 快速解凍：從(cong) 液氮中取出凍存的C4-2B細胞凍存管，立即置於(yu) 37℃水浴中，輕輕搖動以加速C4-2B細胞的解凍過程。

• 稀釋C4-2B細胞：C4-2B細胞完全解凍後，立即將其轉移至4 mL預溫的完全培養(yang) 基中（RPMI-1640培養(yang) 基，含10%胎牛血清（FBS）和1%青黴素-鏈黴素（P/S）），輕柔混勻。

• 離心分離：將混合物以1000 RPM離心4分鍾，去除上清液以減少DMSO對C4-2B細胞的毒性。

• C4-2B細胞重懸：加入1-2 mL新的完全培養(yang) 基，輕輕吹打混勻C4-2B細胞懸液。

• 初步培養(yang) C4-2B細胞：將重懸後的C4-2B細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中，加入8 mL完全培養(yang) 基，置於(yu) 37℃、5% CO2培養(yang) 箱中過夜培養(yang) ，以便C4-2B細胞貼壁。

C4-2B細胞傳代

• C4-2B細胞狀態評估：當C4-2B細胞的貼壁細胞密度達到70%-90%時，應及時進行傳(chuan) 代以保持C4-2B細胞的健康生長。

• 洗滌C4-2B細胞：棄去培養(yang) 基後，用不含鈣鎂的PBS緩衝(chong) 液洗滌C4-2B細胞1-2次以去除殘留培養(yang) 基。

• 消化C4-2B細胞：加入2 mL胰酶-EDTA溶液（0.25%胰酶，0.53 mM EDTA），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，直到C4-2B細胞大部分變圓並脫落。

• 終止C4-2B細胞消化：立即加入適量完全培養(yang) 基終止消化，並輕輕吹打確保C4-2B細胞完全脫離瓶壁。

• C4-2B細胞離心：將C4-2B細胞懸液以1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。

• C4-2B細胞重懸：加入6-8 mL完全培養(yang) 基重懸C4-2B細胞，並充分混勻。

• C4-2B細胞分裝：將重懸的C4-2B細胞按1:2至1:4的比例分裝到新的培養(yang) 瓶中，通常加入8 mL完全培養(yang) 基進行培養(yang) 。

C4-2B細胞凍存

• C4-2B細胞準備：待C4-2B細胞狀態良好且生長密度適中時，棄去培養(yang) 基，並用PBS洗滌C4-2B細胞1-2次。

• 消化C4-2B細胞：加入1 mL胰酶，待C4-2B細胞變圓並脫落後，加入2 mL完全培養(yang) 基終止消化。

• C4-2B細胞離心：在1000 RPM下離心5分鍾，去除上清液。

• C4-2B細胞凍存混合物製備：用FBS重懸C4-2B細胞，並加入DMSO使終濃度達到10%，迅速混勻。

• C4-2B細胞分裝凍存：將混合物按每管1 mL的量分裝到凍存管中，並貼上標識。

• 程序降溫C4-2B細胞：將C4-2B細胞凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80℃冰箱，至少2小時後轉移至液氮中長期保存。

注意事項

• C4-2B細胞貼壁能力較弱，因此在操作和運輸過程中應避免劇烈震動。

• C4-2B細胞在略微偏酸性的環境下生長狀態更好，需注意培養(yang) 基pH的調節。

• 當C4-2B細胞密度達到70%-80%時，應及時傳(chuan) 代，以防止過度擁擠導致C4-2B細胞死亡或脫落。