RWPE1細胞（人正常前列腺上皮細胞）

RWPE-1細胞係是一種人類前列腺上皮細胞係，最初從(cong) 一名54歲白人男性的正常前列腺周邊組織分離。RWPE1細胞經過人乳頭瘤病毒18型（HPV-18）轉染，獲得了持續培養(yang) 的能力。RWPE1細胞係保留了許多正常前列腺上皮細胞的特征。
RWPE1細胞在32代時，大多數細胞的染色體(ti) 數目在二倍體(ti) 範圍內(nei) （45-51），主要有兩(liang) 個(ge) 染色體(ti) 群體(ti) ：45，X，-Y和51，XY。RWPE1細胞不致瘤。

RWPE1細胞特征特性

• RWPE1細胞表達激肽釋放酶3（KLK3），即前列腺特異性抗原（PSA）。表達雄激素受體(ti) ，暴露於(yu) 雄激素後可激活。

• RWPE1細胞表達細胞角蛋白8和細胞角蛋白18。

• p53和pRB基因陽性。

• 三維培養(yang) 特性：在三維基質膠（Matrigel）培養(yang) 中，RWPE1細胞在暴露於(yu) 雄激素時能組織成腺泡（acini）並將PSA分泌到管腔中。

• 體(ti) 內(nei) 特性：當與(yu) Matrigel或基質細胞混合注射到雄性無胸腺齧齒動物體(ti) 內(nei) 時，RWPE1細胞也會(hui) 組織成腺泡並產(chan) 生PSA。

細胞係衍生及致瘤性研究

• RWPE-1細胞可通過Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）轉化為(wei) 致瘤細胞係RWPE-2和RWPE2-W99。

• 通過暴露於(yu) N-甲基-N-亞(ya) 硝基脲（MNU），可從(cong) RWPE-1細胞係衍生出一係列模擬前列腺癌症進展的致瘤細胞係，包括WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26。

病毒篩查

• 對乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒和人類免疫缺陷病毒均為(wei) 陰性。

• PCR檢測證實存在HPV病毒DNA序列。

RWPE1細胞參數表

RWPE1人正常前列腺上皮細胞培養教程

RWPE-1細胞傳代步驟

觀察RWPE-1細胞生長狀態

• 若細胞密度低於(yu) 60%，可更換新鮮培養(yang) 基繼續培養(yang) 。

• 若細胞密度達到80-90%，進行傳(chuan) 代。

傳代操作

• 移除培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 基。

• 用PBS輕輕清洗細胞1-2次。

• 加入適量胰酶-EDTA消化液，37℃消化3-5分鍾。

• 輕輕拍打培養(yang) 瓶，觀察細胞是否脫落。

• 加入等量完全培養(yang) 基終止消化。

• 收集RWPE-1細胞懸液，1000 rpm離心5分鍾。

• 棄上清，用新鮮完全培養(yang) 基重懸細胞。

• 按1:3-1:5的比例將細胞接種到新的培養(yang) 瓶中。

• 加入適量新鮮完全培養(yang) 基，放入37℃、5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

RWPE-1細胞培養注意事項

• 定期觀察RWPE-1細胞形態和生長狀態。

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基。

• 保持培養(yang) 環境的無菌狀態。

• 避免RWPE-1細胞過度生長或密度過高。

RWPE-1細胞複蘇步驟

• 快速解凍RWPE-1細胞。

• 將RWPE-1細胞懸液轉移到含有預熱完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中。

• 24小時後更換新鮮培養(yang) 基，去除DMSO。

RWPE-1細胞在Matrigel培養中的表現

• 在三維Matrigel培養(yang) 中，RWPE-1細胞表現出以下特征：

• 腺泡形成：在雄激素刺激下，RWPE-1細胞能夠形成腺泡（acini）結構。

• PSA分泌：這些腺泡能夠向培養(yang) 基中分泌前列腺特異性抗原（PSA）。

• 體(ti) 內(nei) 表現：將RWPE-1細胞與(yu) Matrigel或基質細胞混合後注射到雄性裸鼠體(ti) 內(nei) ，也能形成腺泡並產(chan) 生PSA。