C8-D1A細胞（小鼠小腦組織細胞）

C8-D1A細胞是一種來源於(yu) 出生8天的小鼠小腦的星形膠質細胞I型克隆，廣泛應用於(yu) 神經科學研究。C8-D1A細胞是在1980年代由B. Pessac和D. Trisler通過外植體(ti) 培養(yang) 方法建立。最初從(cong) 小鼠小腦中分離的細胞經曆了多階段的體(ti) 外培養(yang) 過程，在經過4個(ge) 月的培養(yang) 後，自發轉化形成了幾種具有不同形態的緩慢增殖的細胞群落，最終被富集為(wei) 具有統一形態的細胞係。

C8-D1A細胞係中存在三種類型的GFAP陽性克隆。I型細胞具有較小的細胞體(ti) 和多個(ge) 短的突起；II型細胞也有較小的細胞體(ti) ，但其突起包括一個(ge) 非常細長的過程；III型細胞體(ti) 較大且扁平，通常沒有突起。這些克隆類型可能對應於(yu) 不同的星形膠質細胞亞(ya) 型：I型為(wei) 纖維狀星形膠質細胞，II型可能與(yu) 高爾基上皮細胞相似，III型則表現出帆狀星形膠質細胞的特征。

C8-D1A細胞特性特征

• 細胞類型：C8-D1A細胞主要表現為(wei) 星形膠質細胞，特別是I型和III型星形膠質細胞。I型細胞具有多個(ge) 短突起，而III型細胞則具有大而扁平的細胞體(ti) ，沒有突起。

• 形態特征：C8-D1A細胞呈現纖維狀星形膠質細胞的形態，細胞體(ti) 較小，且在培養(yang) 過程中可觀察到不同的細胞形態。

• 標記物表達：C8-D1A細胞為(wei) GFAP（膠質纖維酸性蛋白）陽性。
  

• 基因特征：C8-D1A細胞是假二倍體(ti) ，具有穩定的遺傳(chuan) 特性，適合在體(ti) 外進行長期培養(yang) 。

• 生長因子合成：C8-D1A細胞已知能夠合成巨噬細胞小膠質細胞生長因子（M-CSF），這對於(yu) 神經細胞的生長和維持具有重要意義(yi) 。

• C8-D1A細胞係經過永生化處理，能夠在體(ti) 外長期穩定地培養(yang) 。

• C8-D1A細胞克隆是纖維狀（I型）或帆狀（III型）星形膠質細胞和高爾基上皮細胞（II型）的體(ti) 外對應物。

C8-D1A細胞參數表

C8-D1A小鼠小腦組織細胞培養教程

C8-D1A細胞的複蘇

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的C8-D1A細胞，迅速將凍存管放入37℃水浴中，輕輕搖動，直至C8-D1A細胞完全解凍（通常需1-2分鍾）。
  

• 在無菌條件下，將解凍後的C8-D1A細胞懸液轉移至預熱至37℃的10-12 ml完全培養(yang) 基中，並輕輕吹打混勻。

• 將混合後的C8-D1A細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，並放入37℃、5% CO2的培養(yang) 箱中孵育，使C8-D1A細胞能夠充分附著於(yu) 培養(yang) 瓶底部。

C8-D1A細胞的傳代操作

• 小心吸幹培養(yang) 瓶中的舊C8-D1A細胞培養(yang) 基，避免對C8-D1A細胞造成過度擾動。
  

• 用3-4 ml的無鈣鎂PBS輕輕潤洗C8-D1A細胞，去除殘餘(yu) 的培養(yang) 基成分，然後吸走PBS。

• 加入1 ml胰酶（Trypsin），輕輕搖動培養(yang) 瓶，使胰酶均勻覆蓋C8-D1A細胞層表麵，放入37℃培養(yang) 箱中消化約1-3分鍾，直至C8-D1A細胞間隙變大但未完全脫落時，立即加入2-3 ml完全培養(yang) 基以終止消化。

• 輕輕吹打培養(yang) 瓶，將消化下來的C8-D1A細胞懸浮均勻，然後按1:3至1:4的比例轉移至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) ，以確保C8-D1A細胞的健康生長。

注意事項

• C8-D1A細胞狀態監測：定期使用顯微鏡觀察C8-D1A細胞的形態和生長情況，確保C8-D1A細胞保持良好的生長狀態，避免C8-D1A細胞過度融合或形態異常。

• 無菌操作：在整個(ge) C8-D1A細胞培養(yang) 過程中，嚴(yan) 格遵循無菌操作原則，防止C8-D1A細胞受到細菌、真菌或支原體(ti) 的汙染。

• C8-D1A細胞凍存：如需長期保存C8-D1A細胞，使用凍存液（如含10% DMSO的培養(yang) 基）將C8-D1A細胞凍存於(yu) 液氮中，並確保冷凍過程緩慢降溫，以維持C8-D1A細胞的存活率。

• C8-D1A細胞鑒定：為(wei) 了確保實驗結果的可靠性，定期進行C8-D1A細胞鑒定，以驗證C8-D1A細胞係的純度和特性，防止C8-D1A細胞係的混雜或變異。