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貨號：STM-CL-6066 規格：1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管
TtT/GF細胞（小鼠垂體(ti) 促甲狀腺濾泡星狀細胞）
- 來源：垂體(ti) 瘤；C57BL/6N x C3H/2N
- 細胞特征：貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基：DMEM/F12＋10% HS＋2.5% FBS＋2ng/mL bFGF＋1% P/S
- 其他：FGF依賴性。GFAP陽性。S-100陽性。
TtT/GF細胞（小鼠垂體(ti) 促甲狀腺濾泡星狀細胞）是由井上健司教授團隊於(yu) 1996年從(cong) C57BL/6N和C3H/2N小鼠雜交產(chan) 生的垂體(ti) 瘤（具有促甲狀腺激素分泌功能）中成功分離。TtT/GF細胞係作為(wei) 一種永生化的細胞模型，來源於(yu) 小鼠垂體(ti) ，並表現出濾泡星狀細胞的典型形態特征。
TtT/GF細胞特性
依賴性：TtT/GF細胞係是FGF（成纖維細胞生長因子）依賴性細胞係，增殖和存活高度依賴於(yu) 外源性FGF的供應.
GFAP陽性：細胞表達膠質纖維酸性蛋白（GFAP），這是一種神經膠質細胞的標誌性分子.
S-100陽性：細胞也表達S-100蛋白，具有神經膠質細胞的某些特性.
細胞因子分泌：TtT/GF細胞能夠分泌白細胞介素-6（IL-6）.
TtT/GF細胞參數表
| 細胞名稱 | TtT/GF細胞（小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞） |
| 種屬 | 小鼠 |
| 細胞類型 | 腫瘤細胞 |
| 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
| 生長特性 | 貼壁細胞 |
| 組織來源 | 垂體瘤（C57BL/6N x C3H/2N） |
| 培養基 | DMEM/F12 + 10%馬血清（HS）+ 2.5%胎牛血清（FBS）+ 2ng/mL FGF + 1% P/S |
| 培養環境 | 37℃；5% CO2；飽和濕度 |
| 推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
| 培養基體積 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 傳代方法 | 詳見注意事項，需輕柔操作，避免過多氣泡 |
| 凍存條件 | 凍存液：92%FBS+8%DMSO或92%完全培養基+8%DMSO；溫度：液氮 |
| 凍存規格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 消化並離心獲得細胞沉澱後，加凍存液重懸，程序凍存後轉入液氮 |
| 特異性標記物 | GFAP陽性，S-100陽性 |
| 細胞因子分泌 | 能夠分泌白細胞介素-6（IL-6） |
| 注意事項 | 貼壁鬆散，操作輕柔；換液時需預熱培養基；收貨時大塊脫落細胞團為正常現象 |
培養教程
TtT/GF小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞培養教程
細胞複蘇
從(cong) 液氮中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中，輕輕晃動直至冰晶完全融化。
將融化的細胞懸液轉移至含有10mL預溫的完全培養(yang) 基的離心管中。
1000 rpm離心5分鍾，棄上清，輕輕吹打重懸細胞。
將細胞懸液轉移至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 培養(yang) 箱中培養(yang) 。
細胞傳代
當TtT/GF細胞生長達到70-80% confluency時進行傳(chuan) 代。
吸棄舊培養(yang) 基，加入適量胰酶消化，直至細胞變圓浮起。
加入新鮮培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打製成細胞懸液。
將細胞懸液按一定比例分至新的培養(yang) 瓶中。
細胞凍存
收集對數生長期的TtT/GF細胞，離心後棄上清。
加入凍存液（如含80% FBS和20% DMSO的凍存液），輕輕混勻。
將細胞懸液分裝到凍存管中，置於(yu) -80℃冰箱過夜，然後轉移至液氮中長期保存。
注意事項
FGF的重要性： FGF是維持TtT/GF細胞生長的關(guan) 鍵因子，必須加入培養(yang) 基中。
細胞貼壁性： TtT/GF細胞貼壁相對較弱，操作時應輕柔，避免過度吹打。
無菌操作： 所有操作均應在無菌條件下進行，防止汙染。
凍存液配製： 凍存液的配製應嚴(yan) 格按照標準操作，避免細胞損傷(shang) 。
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