C643人甲狀腺癌細胞

細胞係C643由Mark等人於(yu) 1987年從(cong) 一名76歲男性的間變性甲狀腺癌進行細針活檢建立，患者在確診後5個(ge) 月內(nei) 死亡。甲狀腺球蛋白mRNA的證明確定了C643細胞係的甲狀腺上皮起源。

C643細胞代表轉移性甲狀腺乳頭狀癌（PTC）、濾泡狀甲狀腺癌（FTC）和未分化甲狀腺癌（ATC），其基因組成在甲狀腺癌中觀察到的常見突變，例如BRAF、RAS和PI3K基因的改變。

C643是人未分化甲狀腺乳頭狀癌細胞（anaplastic thyroid carcinoma, ATC），C643細胞係經過STR鑒定，與(yu) 國際上多家機構的STR數據庫進行比對，排除了被常見細胞係汙染的可能。C643細胞表現為(wei) 上皮細胞樣且具有貼壁生長的特性。

C643人甲狀腺癌細胞特性

• C643細胞係由Mark等人於(yu) 1987年從(cong) 一名76歲男性的間變性甲狀腺癌細針活檢中建立，患者在診斷後5個(ge) 月內(nei) 死亡。

• C643細胞表達甲狀腺球蛋白mRNA，確認其起源於(yu) 甲狀腺上皮。

• C643細胞代表甲狀腺癌的轉移性乳頭狀癌（PTC）、濾泡狀甲狀腺癌（FTC）和未分化甲狀腺癌（ATC）。

• C643細胞的基因組顯示常見突變，如BRAF、RAS和PI3K基因的改變，這些突變激活重要的信號通路。

C643人甲狀腺癌細胞參數表

C643人甲狀腺癌細胞培養

凍存C643細胞的複蘇步驟

• 將含有1 mL C643細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6 mL完全培養(yang) 基的離心管中混合均勻。

• 在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液，用完全培養(yang) 基重懸C643細胞。

• 將C643細胞懸液加入含6-8 mL完全培養(yang) 基的培養(yang) 瓶（或培養(yang) 皿）中，37℃培養(yang) 過夜。

• 第二天顯微鏡下觀察C643細胞生長情況和細胞密度。

C643細胞傳代方法

• 當C643細胞密度達到80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗C643細胞1-2次。

• 加入0.25%（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA到培養(yang) 瓶中（T25瓶1-2 mL，T75瓶2-3 mL），置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。若C643細胞難以消化，可以適當延長時間。

• 顯微鏡下觀察C643細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基終止消化。

• 輕輕打勻後吸出，在1000 RPM條件下離心3-5分鍾，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yang) 基後吹勻。

• 將C643細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8 mL新的完全培養(yang) 基以保持C643細胞生長活力。後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

C643細胞凍存方法

• 建議在培養(yang) 前3代時凍存一批C643細胞種子以備後續實驗使用。
  

• 使用55%基礎培養(yang) 基、40% FBS和5% DMSO作為(wei) 凍存液。

• 將C643細胞懸液分裝到凍存管中，放置於(yu) 程序降溫盒內(nei) ，逐漸降溫至-80℃，然後轉移到液氮中長期保存。