ACT1細胞（人未分化甲狀腺癌細胞）

ACT1細胞係起源於(yu) 一例甲狀腺未分化癌（Anaplastic Thyroid Carcinoma, ATC）患者的腫瘤組織，甲狀腺間變性癌（NCIt:C3878），是通過酶消化法進行原代培養(yang) ，並經過單細胞克隆篩選獲得。ACT1細胞呈上皮樣生長，常用於(yu) 研究甲狀腺未分化癌的生物學特性及潛在的治療策略。

ACT1細胞特性特征

• 基因表達：ACT1細胞係可能表達與(yu) 癌症相關(guan) 的多種基因，包括促進細胞增殖和抑製凋亡的基因。這些基因的表達特征與(yu) 未分化癌的惡性程度密切相關(guan) 。
  

• 突變特征：ACT1細胞可能攜帶特定的基因突變，這些突變與(yu) 甲狀腺癌的發生和發展有關(guan) 。

• 支原體(ti) 檢測：在細胞培養(yang) 過程中，ACT1細胞經過支原體(ti) 檢測，結果為(wei) 陰性，確保細胞的純度和實驗的可靠性。

ACT1細胞參數表

ACT1人未分化甲狀腺癌細胞培養教程

細胞複蘇

• 從(cong) 液氮中取出ACT1細胞凍存管，並立即放入37°C水浴中，輕輕搖晃，使細胞迅速解凍。
  

• 準備DMEM高糖培養(yang) 基，補充10%胎牛血清（FBS）和1%雙抗（青黴素-鏈黴素）。

• ACT1細胞完全解凍後，將懸液轉移到離心管中，加入4 mL預溫的培養(yang) 基，輕輕混合。
  

• 在1000 RPM離心4分鍾，棄去上清液。
  

• 加入1-2 mL新鮮培養(yang) 基，輕輕吹打ACT1細胞沉澱，確保細胞分散均勻。
  

• 將重懸的ACT1細胞轉移至T25培養(yang) 瓶中，加入8 mL培養(yang) 基，置於(yu) 37°C、5% CO2的培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
  

細胞傳代

• 當ACT1細胞生長覆蓋瓶底的80%-90%時，可以進行傳(chuan) 代操作。
  

• 棄去舊的培養(yang) 基，用無鈣鎂的PBS輕柔洗滌ACT1細胞1-2次，以去除殘留的培養(yang) 基成分。
  

• 加入1 mL胰蛋白酶-EDTA溶液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA），置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾，觀察ACT1細胞逐漸變圓並開始脫附。
  

• 當ACT1細胞脫附後，加入適量培養(yang) 基以中和胰蛋白酶，輕輕吹打確保細胞完全懸浮。
  

• 在1000 RPM下離心4分鍾，棄去上清液，加入6-8 mL培養(yang) 基，輕輕混勻。
  

• 按1:2或1:3比例將ACT1細胞懸液分配到新的培養(yang) 瓶中，補充新鮮培養(yang) 基。
  

細胞凍存

• 凍存液通常由90%的完全培養(yang) 基和10%的DMSO（二甲基亞(ya) 碸）組成。
  

• 當ACT1細胞生長狀況良好時，洗滌並用胰蛋白酶消化細胞。消化後將ACT1細胞重懸於(yu) 凍存液中。
  

• 將ACT1細胞懸液分裝到凍存管中，做好標記，確保每管含有足夠數量的細胞。
  

• 將凍存管放入程序化降溫盒中，置於(yu) -80°C冰箱中預凍24小時後，轉移至液氮中長期保存。
  

注意事項

• 無菌操作：在整個(ge) 培養(yang) 過程中應保持無菌操作，避免ACT1細胞汙染。

• 培養(yang) 環境監控：定期觀察ACT1細胞的形態和生長狀態，確保細胞健康並及時進行傳(chuan) 代。

• 培養(yang) 基更換：每2-3天更換培養(yang) 基，維持ACT1細胞培養(yang) 環境的穩定和清潔。

常見問題

• 細胞密度過高：如果ACT1細胞密度過高，應及時進行傳(chuan) 代，否則會(hui) 導致細胞接觸抑製，影響生長。

• 解凍後細胞活力下降：解凍後ACT1細胞活力可能有所下降，但通常經過1-2次傳(chuan) 代後能恢複至正常生長狀態。