K1細胞（GLAG-66細胞係）人甲狀腺癌細胞係

K1(GLAG-66)細胞係來源於(yu) 一名58歲男性患者的原發性乳頭狀甲狀腺癌組織。K1(GLAG-66)細胞係保留了甲狀腺濾泡細胞的分化特性，能夠合成甲狀腺球蛋白，顯示出上皮樣形態，貼壁生長。這些特性使其在甲狀腺癌研究中具有重要的應用價(jia) 值，特別是在研究腫瘤發生、發展機製以及藥物篩選和治療策略的探索方麵。文獻表明K1細胞係與(yu) GLAG-66細胞係密切相關(guan) ，進一步確認了其作為(wei) 甲狀腺癌研究模型的可靠性。

K1細胞（GLAG-66細胞係）特性特征

• 基因表達：K1細胞係表達野生型p53，這一基因在腫瘤發生中起著重要的抑製作用。

• 甲狀腺相關(guan) 基因：維持甲狀腺濾泡細胞的分化能力，能夠合成甲狀腺球蛋白

K1細胞（GLAG-66細胞係）參數表

K1（GLAG-66細胞）人甲狀腺癌細胞係培養教程

細胞複蘇

• 完全培養(yang) 基：GLAG-66細胞的培養(yang) 基使用F-12K基礎培養(yang) 基，加入10%胎牛血清和1%青黴素-鏈黴素混合雙抗。
  

• 預熱培養(yang) 基：將5 mL的完全培養(yang) 基在37℃水浴中預熱，為(wei) GLAG-66細胞的解凍做準備。

• 從(cong) 液氮或-80℃冰箱中取出GLAG-66細胞的凍存管，迅速置於(yu) 37℃水浴中，輕輕搖晃以加速解凍。
  

• 解凍後的GLAG-66細胞立即轉移至含有4 mL預熱完全培養(yang) 基的15 mL離心管中，輕輕混勻。

• 以1000 rpm離心3分鍾，棄去上清。
  

• 加入1-2 mL完全培養(yang) 基重懸GLAG-66細胞。

• 將GLAG-66細胞懸液接種到培養(yang) 瓶中，加入適量完全培養(yang) 基。
  

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃、95%空氣和5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。

• 第三天更換培養(yang) 基，並定期觀察GLAG-66細胞的生長狀態。

細胞傳代

• 當GLAG-66細胞在培養(yang) 瓶表麵達到80%-90%密度時，可進行傳(chuan) 代。
  

• 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣鎂的PBS衝(chong) 洗GLAG-66細胞1-2次。
  

• 加入1 mL胰蛋白酶-EDTA消化液（0.25%胰蛋白酶和0.02% EDTA），確保GLAG-66細胞表麵均勻覆蓋消化液。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-3分鍾，觀察GLAG-66細胞狀態，當細胞開始變圓並脫落時，輕敲瓶壁幫助細胞完全脫離。

• 加入2-3 mL完全培養(yang) 基終止消化過程，輕輕混勻後轉移至無菌離心管中。
  

• 以1000 rpm離心5分鍾，棄去上清液，再次用完全培養(yang) 基重懸GLAG-66細胞。

• 將GLAG-66細胞懸液按1:2或1:3比例重新接種至新培養(yang) 瓶中，加入8 mL完全培養(yang) 基後，繼續培養(yang) 。
  

細胞凍存

• 凍存GLAG-66細胞使用的凍存液為(wei) 90%胎牛血清和10%二甲基亞(ya) 碸（DMSO），現用現配。
  

• 當GLAG-66細胞生長狀態良好時，收集細胞並用PBS衝(chong) 洗，轉移至無菌離心管中。
  

• 以1000 rpm離心4分鍾，棄去上清後，用PBS洗滌一次。

• 將GLAG-66細胞重懸於(yu) 適量凍存液中，確保細胞密度適宜（通常為(wei) 1 mL）。
  

• 將含有GLAG-66細胞的凍存管放入-80℃冰箱中過夜，隨後轉移至液氮儲(chu) 存。