
SF295細胞係(人XG惡性膠質瘤細胞)
- 來源:腦部
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:不表達膠質標記物GFAP或穀氨酰胺合成酶,實陽性表達神經纖維蛋白-1
SF-295細胞係是從(cong) 患者的左額葉惡性膠質瘤組織中分離並培養(yang) 得到的,屬於(yu) 人類惡性膠質母細胞瘤細胞係。SF295細胞在培養(yang) 過程中表現出超三倍體(ti) 和膠質樣形態。SF295細胞係常用於(yu) 評估藥物和分子調節劑對膠質母細胞瘤的影響。
SF295細胞特性特征
不表達: 膠質標記物GFAP(膠質纖維酸性蛋白)和穀氨酰胺合成酶
陽性表達: 神經纖維蛋白-1(Neurofibromin-1,NF1),這是多形性膠質母細胞瘤中最常見的突變因子之一
致瘤性: SF295細胞在無胸腺小鼠中不致瘤
SF295細胞係參數表
細胞名稱 | SF295細胞係(人XG惡性膠質瘤細胞) |
別稱 | SF-295 Cell; SF295; SF-295; SF 295 |
種屬 | 人 |
組織來源 | 左額葉腫瘤(left frontal lobe tumor) |
細胞類型 | 惡性膠質瘤細胞 |
生物安全級別 | 2級 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
倍增時間 | 27-36小時 |
細胞活力 | 通常保持在95%左右(使用台盼藍排除法測定) |
培養基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(青黴素/鏈黴素) |
培養環境 | 37°C,5% CO2 |
傳代方法 | 1:2-1:3,每2-3天換液一次 |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO |
複蘇條件 | 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入培養基混合均勻 |
不表達 | 膠質標記物GFAP(膠質纖維酸性蛋白)、穀氨酰胺合成酶 |
陽性表達 | 神經纖維蛋白-1(NF1) |
染色體特征 | 超三倍體 |
基因突變 | NF1(神經纖維蛋白-1)突變 |
致瘤性 | 在無胸腺小鼠中不致瘤 |
無菌檢測 | 細菌、酵母、支原體檢測均為陰性 |
病原體檢查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎檢查均為陰性 |
研究用途 | 腫瘤生物學研究、藥物篩選、抗癌藥物研究、基因功能研究 |
特殊應用 | 評估藥物和分子調節劑對膠質母細胞瘤的影響 |
培養教程
SF295人XG惡性膠質瘤細胞係培養教程
SF-295細胞複蘇
將SF-295細胞凍存管在37°C水浴中快速解凍(約1分鍾)
將SF-295細胞懸液轉移到含有5mL預熱培養(yang) 基的離心管中
以1000 RPM離心5分鍾
棄去上清,用新鮮培養(yang) 基重懸SF-295細胞
將SF-295細胞轉移到培養(yang) 瓶中,放入培養(yang) 箱中培養(yang)
日常SF-295細胞培養
每天觀察SF-295細胞形態和生長狀況
每2-3天換液一次
當SF-295細胞密度達到80-90%時進行傳(chuan) 代
SF-295細胞傳代方法
棄去舊培養(yang) 基
用PBS輕輕衝(chong) 洗SF-295細胞1-2次
加入適量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C消化3-5分鍾
用顯微鏡觀察SF-295細胞是否脫落
加入含血清的培養(yang) 基終止消化
以1000 RPM離心5分鍾
棄去上清,用新鮮培養(yang) 基重懸SF-295細胞
按1:2或1:3的比例將SF-295細胞接種到新的培養(yang) 瓶中
SF-295細胞凍存
使用90% FBS + 10% DMSO的凍存液
將SF-295細胞懸液分裝到凍存管中
使用程序降溫盒,在-80°C冰箱中存放過夜
次日轉移到液氮中長期保存
SF-295細胞培養注意事項
保持無菌操作,定期進行支原體(ti) 檢測
SF-295細胞生長較快,建議使用較大的培養(yang) 瓶
避免SF-295細胞過度生長或“抱團”現象
定期檢查SF-295細胞活力,保持在95%左右
SF-295細胞的特殊處理
進行藥物處理或基因轉染實驗時,確保SF-295細胞生長狀態良好
實驗前進行SF-295細胞計數,確保實驗條件的一致性
SF-295細胞質量控製
定期進行SF-295細胞形態學觀察
檢測SF-295細胞關(guan) 鍵蛋白表達(如神經纖維蛋白-1)
監測SF-295細胞生長曲線和倍增時間
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,13 |
D2S1338 | 15,20 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,13 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 10 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 12,15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 22,25 |
Penta D | 13,14.4 |
Penta E | 5,7 |
TH01 | 9.3 (Cosmic-CLP=905985) |
9.3,10 (AddexBio=C0005005/415; Millipore=SCC289; PubMed=19372543) | |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16,17 |
參考文獻
上一篇:SF-763細胞(人腦瘤細胞)