
SNB19細胞(人膠質瘤細胞)
- 來源:腦
- 細胞特征:貼壁細胞 , 上皮細胞樣
- 培養(yang) 基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:SNB-19細胞表達野生型p53蛋白;具有CDKN2A/p16缺失和PTEN突變。
SNB-19人膠質瘤細胞來源於(yu) 一名75歲男性星形細胞瘤患者。
研究發現,SNB-19細胞與(yu) U-373 MG細胞具有相同的短串聯重複序列(STR)分析模式,並共享一些衍生染色體(ti) 。由此,SNB-19細胞係隨後停止了銷售。
SNB19細胞特征特性
SNB-19細胞表達野生型p53蛋白;具有CDKN2A/p16缺失和PTEN突變。
SNB-19細胞表達MGMT(O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉移酶)基因。
SNB-19細胞表達神經膠質細胞標誌物GFAP(膠質纖維酸性蛋白)。
SNB-19細胞表達CD133、表達EGFR(表皮生長因子受體(ti) )
SNB-19細胞攜帶IDH1(異檸檬酸脫氫酶1)野生型基因。
SNB-19細胞具有侵襲性和遷移能力。
SNB-19細胞可以在體(ti) 外形成神經球,具有幹細胞樣特性。
SNB-19細胞對某些化療藥物表現出耐藥性,這可能與(yu) 其MGMT表達有關(guan) 。
SNB-19細胞形態為(wei) 上皮細胞樣或成纖維細胞樣、貼壁生長,在培養(yang) 皿或瓶中呈單層生長、倍增時間約為(wei) 24-36小時
SNB19人膠質瘤細胞參數表
細胞名稱 | SNB19細胞(人膠質瘤細胞) |
細胞名稱/別稱 | SNB-19; SNB.19; SNB19 |
來源 | 人源, 75歲男性, 腦膠質瘤 |
細胞類型 | 人膠質瘤細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣或成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長, 倍增時間約24-36小時 |
安全等級 | 生物安全1級 |
細胞代數 | 10代以內 |
保藏信息 | DSMZ; ACC-325 |
培養基 | 89% DMEM + 10% FBS + 1% PS |
培養條件 | 37℃, 5% CO2, 70-80%濕度 |
傳代/換液 | 1:2傳代, 2-3天換液一次 |
凍存/儲存 | 無血清凍存液, 液氮儲存 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25瓶或1mL凍存管 |
質控 | 支原體陰性, STR鑒定通過 |
基因狀態 | p53野生型, CDKN2A/p16缺失, PTEN突變 |
表達標記物 | MGMT, GFAP, CD133, EGFR表達 |
其他基因特征 | IDH1野生型, TERT啟動子可能突變 |
惡性特征 | 具侵襲性和遷移能力, 可形成神經球 |
藥物反應 | 對某些化療藥物表現耐藥 |
培養教程
SNB19人膠質瘤細胞培養教程
SNB19細胞複蘇步驟
將培養(yang) 基預熱至37℃,以便用於(yu) SNB19細胞複蘇。
準備一個(ge) 裝有4-6 mL培養(yang) 基的離心管,用於(yu) 處理SNB19細胞懸液。
將含有1 mL SNB19細胞懸液的凍存管放入37℃水浴中,快速搖晃解凍,時間控製在1-2分鍾。
解凍後立即用75%酒精擦拭凍存管外表麵,以消毒處理後的SNB19細胞管。
將解凍後的SNB19細胞懸液轉移到預先準備的離心管中,加入4-6 mL培養(yang) 基,混合均勻。
在1000 rpm下離心3分鍾,棄去上清液。
用1-2 mL培養(yang) 基重懸SNB19細胞沉澱,輕輕吹打使細胞混勻。
將重懸後的SNB19細胞懸液加入到含有適量培養(yang) 基的培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 過夜。
第三天換液並檢查SNB19細胞密度。
SNB19細胞傳代步驟
將PBS和0.25%胰蛋白酶消化液預熱至37℃,以便進行SNB19細胞傳(chuan) 代。
準備新的培養(yang) 瓶和培養(yang) 基,用於(yu) SNB19細胞的後續培養(yang) 。
當SNB19細胞密度達到80%-90%時,進行傳(chuan) 代。
棄去培養(yang) 瓶中的舊培養(yang) 液,用PBS清洗SNB19細胞一次。
加入約1 mL的0.25%胰蛋白酶消化液,置於(yu) 倒置顯微鏡下觀察,待SNB19細胞回縮變圓後,加入完全培養(yang) 液終止消化。
輕輕吹打SNB19細胞使其脫落,將懸液轉移至15 mL離心管中,1000 rpm離心5分鍾。
棄去上清液,用12 mL完全培養(yang) 基重懸SNB19細胞沉澱。
按1:2比例進行分瓶傳(chuan) 代,將SNB19細胞懸液轉移到新的培養(yang) 瓶中,放入37℃,5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。
待SNB19細胞完全貼壁後,觀察培養(yang) 結果並按需進行下一步操作。
注意事項
SNB19細胞貼壁: SNB19細胞貼壁較慢,複蘇後48小時內(nei) 應盡量避免移動培養(yang) 容器,以確保SNB19細胞達到最佳貼壁狀態。
支原體(ti) 檢測: 定期進行支原體(ti) 檢測,確保SNB19細胞培養(yang) 的純淨性。
環境控製: 保持培養(yang) 環境的恒溫恒濕,避免頻繁開關(guan) 培養(yang) 箱門,以減少環境波動對SNB19細胞的影響。
相關資料
STR鑒定及相關
Amelogenin | X (PubMed=25877200) |
X,Y (ATCC=CRL-2219; DSMZ=ACC-325; PubMed=19372543) | |
CSF1PO | 11,12 (ATCC=CRL-2219; DSMZ=ACC-325; PubMed=25877200) |
12 (PubMed=19372543) | |
D2S1338 | 22,24 |
D3S1358 | 16,17 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 (PubMed=19372543) |
10,12 (ATCC=CRL-2219; DSMZ=ACC-325; PubMed=25877200) | |
D8S1179 | 13,15 |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 12 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 29 |
FGA | 21 (PubMed=19372543) |
21,25 (DSMZ=ACC-325; PubMed=25877200) | |
Penta D | 12 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,18 |