SK-N-SH細胞（人神經母細胞瘤細胞）

SK-N-SH人神經母細胞瘤細胞係是應用於(yu) 細胞介導的細胞毒性試驗中的靶細胞係，也是一種理想的轉染宿主。SK-N-SH細胞來源於(yu) 一名4歲女性患者的神經母細胞瘤，該腫瘤已轉移至骨髓，由 J.L. Bieder 博士建立。

SK-N-SH細胞係是超二倍體(ti) 人類雌性（XX），具有47條染色體(ti) 。正常的N9和N22染色體(ti) 是單染色體(ti) ，每條染色體(ti) 的一個(ge) 拷貝結構上發生改變，形成了9q+和22q+標記染色體(ti) 。此外，N7染色體(ti) 是三體(ti) ，其中一個(ge) 拷貝帶有額外條帶，形成標記染色體(ti) ，這種情況是由R.C. Seeger描述的。可能存在部分轉移到N9和N22染色體(ti) 的q臂的現象。

SK-N-SH細胞特征特性

• SK-N-SH細胞形態:上皮細胞樣,貼壁生長、倍增時間:約44小時、半貼半懸浮生長；

• 多巴胺-β-羥基酶水平較高、表達纖溶酶原激活物、β-澱粉樣肽處理後M-CSF表達增加

• 抗原表達：血型:A型,Rh陽性

• 同工酶表達：AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; Me-2, 2; PGM1, 1; PGM3, 1

• 功能特性：在細胞介導的細胞毒性試驗中可用作靶細胞係、適合作為(wei) 轉染宿主

• SK-N-SH細胞具有較強的成瘤性和轉移性(在動物實驗中觀察到)

SK-N-SH細胞參數表

SK-N-SH人神經母細胞瘤細胞培養教程

細胞複蘇

• 解凍：將凍存管中的SK-N-SH細胞從(cong) 液氮中取出，立即置於(yu) 37°C水浴中迅速解凍。

• 轉移：將解凍後的SK-N-SH細胞懸液轉入含10ml預熱培養(yang) 基的15ml離心管中。

• 離心：以1000rpm離心5分鍾，棄去上清液。

• 重懸：用5ml新鮮培養(yang) 基重懸SK-N-SH細胞，然後轉移至T25培養(yang) 瓶中。

• 培養(yang) ：將T25培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C，5% CO2培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 傳(chuan) 代密度：當SK-N-SH細胞密度達到70-80%時，進行傳(chuan) 代。

• 洗滌：棄去舊培養(yang) 基，用PBS洗滌1-2次。

• 消化：加入適量胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C消化2-3分鍾。

• 終止消化：加入含血清的培養(yang) 基終止消化，輕輕吹打收集SK-N-SH細胞。

• 離心：以1000rpm離心5分鍾，棄去上清。

• 重懸和接種：用新鮮培養(yang) 基重懸SK-N-SH細胞，按1:2至1:6的比例接種到新培養(yang) 瓶中。

細胞凍存

• 收集細胞：選擇對數生長期的SK-N-SH細胞。

• 配製凍存液：使用90%完全培養(yang) 基 + 10% DMSO。

• 細胞濃度：調整SK-N-SH細胞濃度至1-2×10^6個(ge) /ml。

• 分裝：將細胞懸液分裝入凍存管，置於(yu) -80°C冰箱過夜。

• 長期保存：次日將凍存管轉入液氮中保存。

注意事項

• 細胞形態：觀察SK-N-SH細胞是否保持正常的上皮樣貼壁生長。

• 生長密度：在SK-N-SH細胞密度達到70-80%時進行傳(chuan) 代。

• 培養(yang) 基顏色：觀察培養(yang) 基顏色變化，反映pH值和SK-N-SH細胞的代謝狀態。

• 汙染情況：定期檢查是否有細菌或真菌汙染。

• 細胞活性：評估SK-N-SH細胞的生長狀態和活力。

• 貼壁情況：確保SK-N-SH細胞正常貼壁生長。

• 無菌操作：所有操作應在無菌條件下進行，以避免汙染SK-N-SH細胞。

• 傳(chuan) 代間隔：不宜過長，以免影響SK-N-SH細胞的活性。

• 凍存和複蘇速度：操作需迅速，以減少DMSO對SK-N-SH細胞的毒性作用。

培養時間

• SK-N-SH細胞的倍增時間約為(wei) 44小時，通常從(cong) 接種到傳(chuan) 代需要3-4天。具體(ti) 時間可能因實驗需求和培養(yang) 條件而有所不同。

不同溫度下的生長情況

• SK-N-SH細胞的最佳生長溫度為(wei) 37°C。溫度的偏離會(hui) 影響SK-N-SH細胞的生長速度和狀態。