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D283Med細胞係(人腦髓母細胞瘤細胞係)貨號:STM-CL-5131 規格:1×10⁶cells/T25培養(yang) 瓶或1mL凍存管

D283Med細胞係(人腦髓母細胞瘤細胞係)

  • 來源:腦組織
  • 細胞特征:半貼半懸,上皮細胞樣
  • 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
  • 其他:基因表達:穀氨酰胺合成酶、神經元特異性烯醇化酶陽性,但不表達膠質纖維酸性蛋白和S100蛋白。
Tags: 髓母細胞瘤細胞    
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價(jia) 格:¥ 1,450.00

D283 Med細胞係由Friedman等人在1985年建立,源自一名6歲患有神經管細胞瘤且有腹腔轉移的白人男性小孩的腹水細胞。D283 Med細胞是一種上皮樣細胞係。

D283 Med細胞係特性

  • 源自6歲白人男性小孩的神經管細胞瘤腹水細胞和腹膜轉移,用於(yu) 研究人腦髓母細胞瘤。

  • 裸鼠實驗中可以形成連續移植的顱內(nei) 和皮下腫瘤。

  • 具有特定的染色體(ti) 核型:45, XY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1;20)(q12;q13), 8q+, 17p+。

  • 基因表達:穀氨酰胺合成酶、神經元特異性烯醇化酶陽性,但不表達膠質纖維酸性蛋白和S100蛋白。

  • 表達SCLC(小細胞肺癌)的生化標誌物:神經元特異性烯醇化酶、肌酸激酶的腦同工酶、L-DOPA脫羧酶和蛙皮素樣免疫反應性

  • 表達同工酶:AK-1, ES-D, G6PD, PGM1, PGM3。

D283 Med細胞係參數表

細胞名稱D283Med細胞係(人腦髓母細胞瘤細胞係)
別稱D283 MED; D283-MED; D283_Med; D-283 Med; D-283MED; D283MED; D283Med; D283-Med; D-283; D283; Med 283; H283
來源一名6歲患有神經管細胞瘤且有腹腔轉移的白人男性小孩的腹水細胞
細胞形態上皮樣細胞
生長特性懸浮細胞的多細胞聚集體,和一些貼壁細胞
倍增時間~52小時
致瘤性是,在裸鼠中形成可連續移植的顱內和皮下腫瘤
基因表達

穀氨酰胺合成酶陽性;神經元特異性烯醇化酶陽性;膠質纖維酸性蛋白陰性;S100蛋白陰性;

表達升高水平的SCLC四種生化標誌物(神經元特異性烯醇化酶;肌酸激酶的腦同工酶;L-DOPA脫羧酶;蛙皮素樣免疫反應性)

同工酶AK-1, 1;ES-D, 1;G6PD, B;GLO-I, 2;Me-2, 0;PGM1, 1;PGM3, 1
細胞汙染HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性
細胞生長細胞生長良好,形態正常
臨床數據

D283-Med細胞係由Friedman等人於(yu) 1985年從(cong) 惡性腹水細胞和腹膜轉移中建立。

核型為(wei) 45,XY,-7,-8,-17,-20,der(20)t(1;20)(q12;q13),8q+,17p+。具有5.4%的較高倍體(ti) 頻率。

存在三條標記染色體(ti) :der(20)t(1;20)(q12;q13)、8q+和17p+。N7、N17和N20具有單個(ge) 副本。

單個(ge) X在結構上是正常的,並且通過熒光顯微鏡證實存在Y染色體(ti) 。

細胞生長特性懸浮聚團生長,有少數貼壁細胞
保藏機構ATCC; HTB-185
用途研究人腦髓母細胞瘤

培養教程

D283Med人腦髓母細胞瘤細胞係培養

傳代方法

  1. 收集細胞:

    • 將培養(yang) 瓶中的懸浮細胞收集到離心管中。

    • 用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,PBS潤洗後細胞會(hui) 脫落,PBS也要回收到離心管中。

  2. 消化細胞:

    • 加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於(yu) 培養(yang) 瓶中(T25瓶1-2 mL,T75瓶2-3 mL),置於(yu) 37°C培養(yang) 箱中消化1-2分鍾。

    • 在顯微鏡下觀察細胞消化情況,細胞大部分變圓並脫落後,輕敲培養(yang) 瓶並加入3-4 mL含10% FBS的培養(yang) 基來終止消化。

  3. 離心:

    • 將收集到的懸浮細胞、PBS清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000 rpm離心5分鍾,棄去上清。

  4. 重懸:

    • 加入1-2 mL培養(yang) 基重懸混勻,將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8 mL新完全培養(yang) 基以保持細胞的生長活力。

    • 後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

凍存步驟

  1. 細胞收集和消化:

    • 按照傳(chuan) 代過程收集和消化細胞。

    • 使用血球計數板計數,決(jue) 定細胞的凍存密度,一般為(wei) 1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞/mL。

  2. 離心和重懸:

    • 1000 rpm離心3-5分鍾,去掉上清。

    • 用配製好的細胞凍存液重懸細胞,每1 mL凍存液含1×10^6~1×10^7個(ge) 活細胞,分配到凍存管中。

  3. 凍存和儲(chu) 存:

    • 標注好名稱、代數、日期等信息。

    • 將細胞置於(yu) 程序降溫盒中,在-80°C冰箱中過夜,然後轉入液氮容器中儲(chu) 存。

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STR鑒定及相關

AmelogeninX,Y
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D13S3178,10
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TH017
TPOX8,11
vWA16,18

參考文獻

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