
IMR32細胞(人神經母細胞瘤細胞係)
- 來源:神經母細胞瘤,大腦
- 細胞特征:貼壁細胞 , 成纖維細胞樣
- 培養(yang) 基:生長培養(yang) 基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:IMR32細胞可能堆積並成片生長,但可能不會(hui) 100%融合。IMR32細胞係可以傳(chuan) 代培養(yang) 到80代以上。
IMR-32人神經母細胞瘤細胞由W.W. Nichols, J. Lee和S. Dwight於(yu) 1967年四月建立。IMR32細胞是從(cong) 一名13個(ge) 月大的高加索男性腹部腫塊中分離,該腫瘤被診斷為(wei) 神經母細胞瘤,並具有罕見的類器官分化區域。
IMR-32細胞存在兩(liang) 種類型:主要是小的神經母細胞樣細胞,另一種是大的透明成纖維細胞。
IMR32細胞具有穩定的雄性核型,幹細胞數為(wei) 49,包含兩(liang) 個(ge) 大的標記染色體(ti) ,具有亞(ya) 中間著絲(si) 粒。一條1號染色體(ti) 缺失,一條16號染色體(ti) 缺失,C組多出2條染色體(ti) 。
IMR32細胞係的亞(ya) 型具有50和48條染色體(ti) ,分別表現為(wei) 額外的或缺失的C組染色體(ti) 。
IMR32細胞特性
IMR32細胞存在兩(liang) 種類型:小的神經母細胞樣細胞和大的透明成纖維樣細胞。
IMR32細胞具有穩定的雄性核型,染色體(ti) 數目為(wei) 49,其中一些亞(ya) 型具有50或48條染色體(ti) 。
IMR32細胞具有一定的細胞遺傳(chuan) 學不穩定性。
IMR32細胞可能堆積並成片生長,但可能不會(hui) 100%融合。IMR32細胞係可以傳(chuan) 代培養(yang) 到80代以上。
IMR32細胞對幾種病毒的易感性:水泡性口腔炎(奧賽和格拉斯哥,印第安納州)、單純皰疹病毒、痘苗病毒、人類柯薩奇病毒B3和人類脊髓灰質炎病毒3。
IMR-32細胞表達同工酶G6PD,B。
IMR32細胞參數表
細胞名稱 | IMR-32細胞, ATCC CCL-127細胞, IMR32細胞, 人神經母細胞瘤細胞 |
細胞又名 | IMR 32; IMR32; Institute for Medical Research-32; GM03320; GM03320D |
種屬來源 | 人 |
組織來源 | 大腦 |
疾病特征 | 神經母細胞瘤 |
細胞形態 | 神經母細胞,成纖維細胞 |
生長特性 | 貼壁生長 |
細胞生長特性 | IMR-32細胞可能堆積並成片生長。 |
生物安全級別 | 2 |
細胞活力 | 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
細胞檢測 | 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
病毒易感性 | 水泡性口腔炎(印第安納州、格拉斯哥),單純皰疹病毒,痘苗病毒,人類柯薩奇病毒B3,人類脊髓灰質炎病毒3 |
同工酶 | G6PD,B |
傳代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
傳代周期 | - |
培養條件 | MEM + 10% FBS;37°C,5% CO2 |
凍存條件 | 90% 完全培養基 + 10% DMSO,液氮儲存 |
推薦培養基 | MEM培養基,90%;FBS,10%。 |
生長條件 | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37℃ |
保藏機構 | ATCC;BCRC;BCRJ;DSMZ;ECACC |
細胞融合 | IMR-32細胞可能不會100%融合。 |
供應限製 | 僅供科研使用 |
培養教程
IMR32人神經母細胞瘤細胞係培養教程
細胞傳代
吸走用於(yu) 培養(yang) 基,加入3-5mL PBS後輕輕晃動培養(yang) 瓶潤洗IMR-32細胞;
吸幹淨PBS後加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yang) 皿使胰酶浸沒IMR-32細胞表麵,培養(yang) 瓶放37°C培養(yang) 箱消化(IMR-32細胞對於(yu) 消化比較敏感,消化過度會(hui) 嚴(yan) 重影響細胞狀態,導致細胞傳(chuan) 代死亡漂浮或者傳(chuan) 代後不長。消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻IMR-32細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。);
加入6-8mL完全培養(yang) 基終止消化,輕輕吹下IMR-32細胞混勻;
將混勻的IMR-32細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yang) 基重懸,37°C培養(yang) 箱繼續培養(yang) 。
不同細胞生長速度不一,具體(ti) 傳(chuan) 代比例視IMR-32細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳(chuan) 代,生長較慢的細胞可以1:2傳(chuan) 代。
細胞凍存
將含有1mL IMR-32細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yang) 基混合均勻。
在1000rpm條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 基後吹勻。
將所有IMR-32細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8mL培養(yang) 基,培養(yang) 過夜)。
第二天換液並檢查IMR-32細胞密度。
操作注意事項
IMR-32細胞消化時對於(yu) 消化比較敏感,消化過度會(hui) 嚴(yan) 重影響細胞狀態,導致細胞傳(chuan) 代死亡漂浮或者傳(chuan) 代後不長。消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮。混勻IMR-32細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。
傳(chuan) 代比例視IMR-32細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳(chuan) 代,生長較慢的細胞可以1:2傳(chuan) 代。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 8 (ATCC=CCL-127; CCRID; COG; DSMZ=ACC-165; IZSLER=BS TCL 29; JCRB=IFO50283; JCRB=JCRB9050;PubMed=25877200; PubMed=31581737; PubMed=33460449; RCB=RCB1895; TKG=TKG 0207) |
8,10 (CLS=300148) | |
D18S51 | 12,15 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 11,12 |
Penta E | 7,15 |
TH01 | 7,9.3 (ATCC=CCL-127; CCRID; CLS=300148; COG; DSMZ=ACC-165; IZSLER=BS TCL 29; JCRB=IFO50283; KCLB=10127; PubMed=25877200; PubMed=31581737; PubMed=33460449; RCB=RCB1895; TKG=TKG 0207) |
7,10 (JCRB=JCRB9050) | |
TPOX | 11 |
vWA | 15 |