C2C12細胞（小鼠成肌細胞）

C2C12細胞係是具有持續增殖和分化潛能的小鼠細胞亞(ya) 克隆，源於(yu) 1977年由以色列魏茨曼科學研究所的D. Yaffe和O. Saxel從(cong) 正常C3H小鼠的股骨肌肉中提取。C2C12細胞是在小鼠遭受壓碎性損傷(shang) 後的肌肉組織中分離。

C2C12細胞不攜帶鼠痘病毒染色體(ti) 數在69至77之間。C2C12細胞係具有貼壁生長的特性，呈現放射狀的細胞形態，並由許多沿多個(ge) 方向延伸的長纖維構成。在高血清條件下，C2C12細胞能夠迅速增殖；在低血清條件下，它們(men) 能夠分化為(wei) 肌母細胞，並進一步融合形成多核肌管，表現出特征性的肌肉蛋白表達。因此，C2C12細胞成為(wei) 研究肌肉發育和分化的重要模型。

C2C12細胞特性特征

• c2c12細胞在低血清條件下會(hui) 分化成肌肉束,形成可收縮的肌管

• c2c12細胞能夠快速分化為(wei) 表達特征性肌蛋白的肌管

• 用骨形成蛋白2(BMP-2)處理可使其分化途徑從(cong) 成肌細胞轉向成骨細胞

• c2c12細胞經檢測鼠痘病毒呈陰性

• 應用特點：c2c12細胞是一種理想的轉染宿主、可用於(yu) 3D細胞培養(yang) 、是研究肌肉發育、分化及相關(guan) 機製的重要模型

C2C12細胞參數表

C2C12小鼠成肌細胞培養教程

細胞複蘇

• 將凍存的C2C12細胞管從(cong) 液氮罐中取出，迅速放入37°C水浴中複蘇，直至管內(nei) 僅(jin) 殘留少量冰塊。

• 將複蘇的C2C12細胞懸液轉移至預熱的完全培養(yang) 基中（DMEM + 10% FBS + 1% P/S），輕輕吹打均勻以混勻。

• 將C2C12細胞懸液轉移到15 mL離心管中，緩慢加入5 mL預熱的培養(yang) 基。

• 在1000 rpm下離心5分鍾，棄去上清液，用5 mL預熱的培養(yang) 基重懸C2C12細胞。

細胞播種

• 將重懸的C2C12細胞接種到已用培養(yang) 基濕潤的培養(yang) 瓶中，播種密度設為(wei) 1×10⁴ cells/cm²。

• 輕輕搖動培養(yang) 瓶，使C2C12細胞均勻分布。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中培養(yang) 。

細胞傳代

• 當C2C12細胞達到80-90%的匯合度時，進行傳(chuan) 代操作。

• 棄去舊培養(yang) 基，用預熱的PBS輕輕衝(chong) 洗C2C12細胞1-2次。

• 添加適量預熱的傳(chuan) 代酶（如Accutase），在37°C下孵育2-3分鍾。

• 輕輕吹打以促使C2C12細胞脫離培養(yang) 瓶底。

• 加入2-3倍體(ti) 積的完全培養(yang) 基以終止酶的活性。

• 將C2C12細胞懸液轉移到離心管中，1000 rpm離心5分鍾。

• 棄去上清液，用預熱的培養(yang) 基重懸C2C12細胞，並按1:3至1:4的比例接種至新的培養(yang) 瓶中。

• 將新接種的培養(yang) 瓶放入37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞培養

• 每2-3天更換一次培養(yang) 基，以保持C2C12細胞在對數生長期。

• 定期觀察C2C12細胞的生長情況，確保其處於(yu) 最佳生長狀態。

• 當C2C12細胞達到所需密度或分化程度時，即可進行相關(guan) 實驗或處理。