HL-60細胞（人原髓細胞白血病細胞）

HL-60細胞是一種來自36歲白人女性急性早幼粒細胞白血病患者外周血的原髓細胞白血病細胞係。HL-60細胞係最初由Collins等人在1977年分離並建立，廣泛應用於(yu) 癌症研究、免疫學研究和藥物篩選。
HL-60細胞屬於(yu) 早幼粒細胞（promyeloblast），呈現假二倍體(ti) 染色體(ti) 數目，2S成分占比6.2%，中期染色體(ti) 中存在五個(ge) 標記（M2至M6），同時檢測到雙微體(ti) （DM），但未發現著絲(si) 粒擴展（HSR）染色體(ti) 。

HL-60細胞特性特征

• 致瘤性：HL-60細胞在裸鼠體(ti) 內(nei) （皮下髓係腫瘤）能夠形成腫瘤。

• 癌症基因：HL-60細胞表達致癌基因myc+。

• 基因表達：HL-60細胞在刺激下（如佛波醇肉豆蔻酸）可表達腫瘤壞死因子α（TNF-α）。

• 同工酶：HL-60細胞表達多種同工酶，包括AK-1、ES-D、G6PD、GLO-I、Me-2、PGM1和PGM3。

• 吞噬活性：HL-60細胞表現出吞噬活性，並對趨化刺激有響應，能夠參與(yu) 免疫反應。

• 自發分化能力：HL-60細胞具有自發分化的能力，可以在特定刺激下（如丁酸鹽、次黃嘌呤、DMSO、放線菌素D和視黃酸）進一步分化為(wei) 成熟的粒細胞或單核細胞。
  

• 細胞因子：HL-60細胞可分泌多種細胞因子，參與(yu) 調節免疫反應和細胞間的信號傳(chuan) 遞

HL-60細胞參數表

HL-60人原髓細胞白血病細胞培養教程

HL-60細胞複蘇步驟

• 從(cong) 液氮罐中取出凍存的HL-60細胞管，迅速將其放入37°C水浴中解凍，過程中輕輕搖動，以確保HL-60細胞的存活。

• 解凍後，迅速將HL-60細胞懸液用無菌槍頭轉移至15 mL離心管中。

• 緩慢加入5 mL預熱的完全培養(yang) 基，輕輕混勻，以避免對HL-60細胞的應激反應。

• 以900 rpm離心3分鍾，棄去上清液，以便去除殘餘(yu) 的DMSO，保護HL-60細胞的健康。

• 用5 mL完全培養(yang) 基重懸HL-60細胞，並將細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，放置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中培養(yang) 。

HL-60細胞常規傳代操作

• 當HL-60細胞密度達到1×10⁶ cells/mL時，進行傳(chuan) 代。

• 將HL-60細胞懸液轉移至50 mL離心管，以900 rpm離心3分鍾。

• 棄去上清，用適量預熱的完全培養(yang) 基重懸HL-60細胞。

• 根據所需的接種密度，將重懸後的HL-60細胞接種至新的培養(yang) 瓶中，並添加適量完全培養(yang) 基。

• 輕輕搖動培養(yang) 瓶以確保HL-60細胞均勻分散後，置於(yu) 培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

HL-60細胞換液操作

• 將培養(yang) 瓶豎直靜置，以便HL-60細胞沉澱。

• 小心吸出一半的上清培養(yang) 基，轉移至離心管中，以保留足夠的HL-60細胞用於(yu) 後續培養(yang) 。

• 以900 rpm離心3分鍾，棄去上清。

• 用預熱的完全培養(yang) 基重懸沉澱的HL-60細胞。

• 將重懸後的HL-60細胞懸液重新加入到原培養(yang) 瓶中，補足培養(yang) 基至所需體(ti) 積。

HL-60細胞培養注意事項

• 健康的HL-60細胞表現為(wei) 細胞膜完整、細胞質豐(feng) 富且無明顯顆粒。

• 推薦接種密度為(wei) 2-5×10⁵ cells/mL，以保持HL-60細胞的最佳生長狀態。

• 每2-3天應更換培養(yang) 基或進行傳(chuan) 代，以維持HL-60細胞的健康生長。

• 傳(chuan) 代時避免劇烈吹打，以減少對HL-60細胞的損傷(shang) 。

• 細胞複蘇後應盡快離心去除DMSO，因其對HL-60細胞具有一定的毒性。