MEC-1細胞（人慢性B細胞白血病細胞）

MEC-1細胞係來源於(yu) 人類慢性B細胞白血病（B-CLL）的細胞係，於(yu) 1993年從(cong) 一名61歲男性患者的外周血中建立。該患者患有B-CLL並經曆了前淋巴細胞樣轉化（B-PLL），與(yu) MEC-2細胞係同源。MEC-1細胞屬於(yu) 慢性淋巴細胞白血病細胞係，能在體(ti) 外持續增殖，保持其B細胞特性，是研究CLL的重要模型。

MEC-1細胞係與(yu) MEC-2細胞係共同建立，兩(liang) 者都從(cong) 患者的外周血中獲得，並表現出不同的培養(yang) 特性。MEC-1細胞在液體(ti) 培養(yang) 中表現為(wei) 附著生長，形成微小團塊；而MEC-2細胞則表現為(wei) 懸浮生長，形成較大的細胞團塊。MEC-1的倍增時間為(wei) 40小時，MEC-2為(wei) 31小時。

MEC-1細胞特性特征

• 表麵標誌物：MEC-1細胞高表達成熟B細胞標誌物，如CD19、CD20、CD21、CD22、CD80和CD86，同時表現出CD5陰性和CD23陽性。與(yu) 之相比，MEC-2細胞的CD5表達在培養(yang) 幾個(ge) 月後丟(diu) 失。
  

• 輕鏈和重鏈：MEC-1細胞係表達與(yu) 新鮮親(qin) 本B-CLL細胞相同的輕鏈（κ）和重鏈（μ，δ）。

• 細胞信號通路：MEC-1細胞與(yu) Bax一起過表達Bcl-2，並表達大量Bcl-xL和微量Bcl-xS，這表明其在細胞凋亡調控方麵的特性。

• 基因組特征：MEC-1細胞的腫瘤起源通過IgH位點的Southern印跡分析和Ig基因DNA測序得到證實，使用VH4-Ig家族，沒有發生體(ti) 細胞突變，其與(yu) 種係Ig基因4-59的同源性為(wei) 94.8%。
  

• 複雜核型：MEC-1細胞具有複雜的核型，顯示出其遺傳(chuan) 多樣性

MEC-1細胞參數表

MEC-1人慢性B細胞白血病細胞培養教程

MEC1細胞複蘇步驟

• 從(cong) 液氮中取出MEC1細胞凍存管，立即置於(yu) 37°C的水浴中快速解凍，時間約為(wei) 1-2分鍾，直至MEC1細胞完全解凍。

• 將解凍後的MEC1細胞緩慢加入預先準備好的37°C IMDM培養(yang) 基中，輕輕混勻以保護MEC1細胞的完整性。

• 將MEC1細胞懸液轉移至T25培養(yang) 瓶中，並補充適量培養(yang) 基至總體(ti) 積達到5-10 mL。

• 將培養(yang) 瓶置於(yu) 37°C、5% CO₂的培養(yang) 箱中，確保MEC1細胞在穩定的環境中複蘇。

MEC1細胞傳代步驟

• 每2-3天檢查MEC1細胞的生長狀態，當MEC1細胞達到80%匯合時，進行傳(chuan) 代。

• 使用無菌PBS輕輕洗滌MEC1細胞層1-2次，去除殘留的培養(yang) 基。

• 加入適量的預熱胰酶-EDTA溶液，置於(yu) 37°C孵育2-3分鍾，直至MEC1細胞開始脫落。

• 當MEC1細胞層脫落後，加入等量預熱的IMDM培養(yang) 基終止胰酶作用。

• 將MEC1細胞懸液轉移至15 mL離心管中，以1000 rpm離心5分鍾，沉澱MEC1細胞。

• 棄去上清液後，用新鮮預溫IMDM培養(yang) 基重懸MEC1細胞，並按所需密度調整接種。

• 將MEC1細胞重新接種至新的培養(yang) 瓶中，加入適量培養(yang) 基，並置於(yu) 37°C、5% CO₂培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。

細胞凍存

• 收集對數生長期的MEC-1細胞，離心收集細胞沉澱。

• 棄上清，用預冷的凍存液重懸細胞，調整細胞濃度至1×10⁶-1×10⁷cells/mL。

• 將MEC-1細胞懸液分裝至預冷的凍存管中，每管1-2 mL。

• 將凍存管置於(yu) -80°C的冰箱或製冰機中緩慢凍結（降溫速率為(wei) 1°C/min）。

• 次日，將凍存管迅速轉入液氮罐中保存

注意事項

• 操作MEC1細胞時應嚴(yan) 格遵循無菌操作，以防止汙染。

• 由於(yu) 培養(yang) 基中已包含血清和抗生素，通常不需為(wei) MEC1細胞額外添加其他成分。

• 不宜將MEC1細胞的培養(yang) 基長時間暴露在室溫或高溫下，以防其失效。

• 確保所有實驗材料在有效期內(nei) 使用，以保證MEC1細胞培養(yang) 的成功率。

• MEC1細胞係僅(jin) 限於(yu) 科研用途，禁止用於(yu) 任何臨(lin) 床或治療應用。