
Z-138細胞係來源於(yu) 一名慢性淋巴細胞白血病(CLL)的70歲男性患者。經過大約兩(liang) 年,該患者的疾病進展為(wei) 侵襲性的B細胞急性淋巴細胞白血病(ALL),並最終被重新分類為(wei) 套細胞淋巴瘤(MCL),根據現行的世界衛生組織淋巴瘤分類標準,這種腫瘤在終末期表現為(wei) 囊胚樣轉化。
Z-138細胞係是來源於(yu) 男性的超二倍體(ti) 細胞,具有49條染色體(ti) ,存在4%的多倍體(ti) 率。大多數細胞攜帶套細胞淋巴瘤常見的t(11;14)(q13;q32)染色體(ti) 易位,此外,還觀察到包括del(5)(p15)、der(9)t(9;?)、加(17p)在內(nei) 的其他染色體(ti) 異常。整體(ti) 核型特征與(yu) 已發布的相關(guan) 文獻報道一致。
Z-138細胞特性特征
抗原表達:CD3-、CD5-、CD10-、CD19+、CD20+、CD23+、FMC7-(在ATCC驗證)
基因表達:CD3-;CD5-;CD10-;CD19+;CD20+;CD23+;FMC7-
Z-138細胞過度表達Cyclin D1,這在B細胞腫瘤中是一個(ge) 常見的特征
Z-138細胞參數表
細胞名稱 | Z-138細胞(人套細胞淋巴瘤細胞) |
細胞別稱 | Z138 |
年齡/性別 | 70歲/男 |
組織來源 | 骨髓/外周血 |
疾病類型 | 套細胞淋巴瘤(MCL) |
細胞類型 | 腫瘤細胞 |
形態學特征 | 淋巴母細胞 |
生長方式 | 懸浮 |
倍增時間 | 大約24-30小時 |
培養基組成 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
培養條件 | 37℃、95%空氣 + 5% CO₂ |
pH值 | 7.2 - 7.4 |
微生物檢測 | 陰性 |
支原體檢測 | 無 |
凍存條件 | 無血清凍存液 |
傳代方法 | 1:2或1:3傳代 |
細胞規格 | 1×10^6 cells/T25培養瓶或1mL凍存管包裝 |
生物安全等級 | BSL-1 |
抗原表達特征 | CD3-、CD5-、CD10-、CD19+、CD20+、CD23+、FMC7- |
基因表達特征 | 過度表達Cyclin D1 |
核型特征 | t(11;14)(q13;q32)異常,含有其他衍生染色體 |
保藏機構 | ATCC (CRL-3001) |
培養教程
Z-138人套細胞淋巴瘤細胞培養教程
Z-138細胞複蘇
將含有Z-138細胞的凍存管置於(yu) 37℃水浴中快速解凍,期間輕輕搖晃,確保均勻解凍。
在解凍Z-138細胞的同時,準備4-6 mL的完全培養(yang) 基(IMDM + 10%胎牛血清 + 1%青黴素/鏈黴素)。
解凍後的Z-138細胞懸液在1000 RPM下離心5分鍾,去除上清液以除去冷凍保護劑。
用4-6 mL的完全培養(yang) 基重懸Z-138細胞,輕輕吹勻後轉移至培養(yang) 瓶中。
將Z-138細胞懸液均勻鋪在培養(yang) 皿中,置於(yu) 37℃、5% CO₂的培養(yang) 箱中過夜培養(yang) 。
次日觀察Z-138細胞的生長情況,並根據細胞密度更換培養(yang) 基。
Z-138細胞傳代
當Z-138細胞密度達到80%-90%時應進行傳(chuan) 代。Z-138細胞為(wei) 懸浮細胞,因此不需要胰酶消化。
方法一:收集與(yu) 離心
將Z-138細胞懸液在1000 RPM條件下離心8-10分鍾,棄去上清液。
1-2 mL的完全培養(yang) 基輕輕重懸Z-138細胞,並按1:2至1:5的比例將細胞轉移至新的培養(yang) 瓶或培養(yang) 皿中,補加8 mL的完全培養(yang) 基。
方法二:半量換液
去除一半培養(yang) 基,保留剩餘(yu) 的Z-138細胞和培養(yang) 液。
按1:2至1:3的比例稀釋Z-138細胞,並補加新鮮的完全培養(yang) 基至8 mL。
每2-3天更換培養(yang) 基,注意Z-138細胞的生長狀態,適時傳(chuan) 代。
Z-138細胞凍存
確保Z-138細胞生長良好,達到80%-90%密度。
使用PBS輕輕清洗Z-138細胞,確保無汙染。
對於(yu) 懸浮細胞,直接將Z-138細胞懸液在1000 RPM下離心5分鍾,棄去上清液。
使用適量的凍存液(90%胎牛血清 + 10% DMSO)重懸Z-138細胞,每管細胞數應在1-2 x 10⁶個(ge) 左右。
將Z-138細胞懸液分裝入凍存管中,放置在-20℃下預凍1.5小時。
隨後將凍存管轉移至-80℃冰箱中長期保存。
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STR鑒定及相關
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 8 |
D8S1179 | 8,13 |
D13S317 | 9,12 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 14,18 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 30,32.2 |
FGA | 20,22 |
Penta D | 13,15 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8 |
vWA | 15,18 |